刘爱花
- 作品数：6 被引量：24H指数：4
- 供职机构：华侨大学材料科学与工程学院更多>>
- 发文基金：福建省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学化学工程更多>>
- 改进RBB染色法初步筛选几丁质酶基因chiA的表达被引量：4
- 2008年
- 对RBB(Remazol Brilliant Blue)底物染色方法进行产几丁质酶细菌的酶活性筛选,应用几丁质胶体平板诱导表达的筛选取得好的效果.粘质沙雷氏菌几丁质酶基因chiA在E.coli中的异源表达过程:首先从质粒pMD-chiA(DH5α)中切出含粘质沙雷氏菌几丁质酶基因chiA的片段,将其插入到表达载体pET-22b(+)内,构建成几丁质酶表达质粒pET-chiA.然后,转化进入DH5α感受态细胞内,鉴定正确后将pET-chiA质粒转入BL21(DE3)pLysS中进行表达,并进行初步筛选.
- 贺淹才刘爱花柴思捷刘治江
- 关键词：粘质沙雷氏菌
- 土壤产几丁质酶菌株的筛选鉴定及产酶条件被引量：4
- 2007年
- 利用几丁质为碳源,从土壤中筛选出3株产几丁质酶菌株,其中酶活最高的为一株革兰氏阴性菌.对该菌株应用16S rDNA法进行鉴定,结果为嗜麦芽窄食单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia).通过单因素优化法和均匀设计法实验,结果表明,以质量分数0.5%的胶体几丁质为碳源,质量分数1.0%的蛋白胨为氮源,及30℃和pH值为7.2,发酵60 h的条件是菌株的最合适产酶条件.此时,胞外几丁质酶酶活力最高.
- 张荣奎贺淹才刘爱花魏巍李红然
- 关键词：嗜麦芽窄食单胞菌几丁质酶发酵条件
- 嗜麦芽窄食单胞菌产生的几丁质酶的特性被引量：4
- 2008年
- 从土壤中筛选出一株产几丁质酶的革兰氏阴性细菌，通过16S rDNA法对酶活力最高的菌株C进行鉴定，确定为嗜麦芽窄食单胞菌（S．maltophilia）菌株．通过单因素优化法和均匀设计法确定S．maltophilia产几丁质酶的最佳条件：在pH值为7．0的基础培养基中添加质量分数为1．0％的酵母膏、质量分数为0．5％的胶体几丁质，于180r·min^-1，30℃的摇床中培养60h．对硫酸铵沉淀获得的粗酶进行酶学性质研究，结果表明，该几丁质酶的最适反应温度为50℃，最适反应pH值为7．2，在55℃以上的温度条件下容易失活．通过聚丙烯酰胺凝胶电泳分析，确定S．maltophilia几丁质酶的相对分子质量为6．8×10^3；以筛选的S．maltophilia菌株的总DNA为模板，利用聚合酶链式反应（PCR）扩增出几丁质酶DNA测序；应用生物信息学手段推导S．maltophilia几丁质酶为分泌型蛋白酶，预测其等电点pI值为5．42，相对分子质量为6．8×10^3（与实验纯化的酶蛋白电泳结果一致）．预测该酶氨基酸序列具有信号肽区（氨基酸残基1～41）、Ⅲ型几丁质结合区（残基47-92）、多囊肾病域（107～194）、类纤维连接蛋白Ⅲ型区（Fn3，201～278）和18家族糖基水解域等5个结构功能区，5个区域被富含Ala，Gly，Pro，Ser和Thr的短序列连接起来；在第400～500个氨基酸残基间有一个螺旋结构．
- 贺淹才刘爱花张荣奎刘治江
- 关键词：几丁质酶嗜麦芽窄食单胞菌发酵培养分子结构生物信息学
- 粘质沙雷氏菌几丁质酶(ChiC)基因克隆及其生物信息学分析被引量：14
- 2006年
- 从粘质沙雷氏菌(Serratia marcescensATCC14041)中克隆出几丁质酶基因(ChiC),将回收纯化的PCR产物与载体pMD18-T连接,构建成的重组质粒命名为pMD-Ch iC,将重组质粒转化到受体E.coliDH5α中进行克隆,经BamHI和NheI双酶切验证、核酸序列测定证实,重组质粒pMD-Ch iC含有几丁质酶C基因(ChiC)。利用生物信息学的方法,推测该粘质沙雷氏菌ChiC基因编码的蛋白质由480个氨基酸组成。预测该蛋白的等电点为5.63,分子量约为52kD。针对粘质沙雷氏菌中的几个几丁质酶基因做了进化树,进而验证了粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)几丁质酶(ChiC)在沙雷氏菌几丁质酶中的分类;同时对粘质沙雷氏菌几丁质酶C(ChiC)蛋白的高级结构作出了预测,得到其编码的属于18家族的蛋白质高级结构图谱。
- 魏巍贺淹才方柏山刘爱花
- 关键词：粘质沙雷氏菌基因克隆生物信息学分析
- 几丁质酶酶活测定方法的研究进展
- 介绍了近年来测定微生物几丁质酶酶活的主要方法,分别对非专一性几丁质酶、内切几丁质酶(endochitinase)和外切几丁质酶(exochitinase)的酶活测定方法进行综述,并分别对各种测定方法的优缺点进行了初步探讨...
- 魏巍贺淹才刘爱花
- 关键词：几丁质酶酶活测定
- 文献传递
- 黑曲霉植酸酶基因序列的研究被引量：1
- 2006年
- 张荣奎刘爱花贺淹才
- 关键词：植酸酶基因序列动物生产性能饲料工业抗营养作用植物性饲料
