刘梦琼 作品数:24 被引量:85 H指数:4 供职机构: 海南省人民医院 更多>> 发文基金: 广东省自然科学基金 海南省自然科学基金 教育部留学回国人员科研启动基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
复制缺陷型腺病毒介导的SOCS1沉默加强树突状细胞疫苗对表达癌蛋白E7荷瘤小鼠的免疫治疗 被引量:1 2010年 目的探讨一种对宫颈癌可能有治疗作用的方法。方法构建SOCS1 RNA沉默的复制缺陷型腺病毒(rAd-RNAi-SOCS1),用重组腺病毒体外感染从小鼠骨髓中分离培养的树突状细胞(DCs),用多肽E7.49-53脉冲,并用LPS使DCs成熟,然后回输到已致瘤的小鼠体内,观察不同处理组小鼠模型肿瘤的生长情况和存活率。结果重组腺病毒的构建经测序证实构建的腺病毒是正确的,定量RT-PCR体外证明SOCS1 RNA对DCs表达SOCS1有抑制作用。用多肽E7.49-53在体外经rAd- RNAi-SOCS1处理后的DCs对荷瘤小鼠模型较对照组有显著的抑制肿瘤生长的作用,小鼠的存活率提高,存活时间延长(P<0.05)。结论SOCS1的干扰介导DCs对肿瘤动物模型的治疗作用,机理可能为SOCS1的沉默突破了机体对肿瘤的免疫耐受。 曾凡杞 刘梦琼 胡必成关键词:SOCS1 HPV16 HPV16E7致瘤相关位点的定向突变及其表达纯化 2016年 目的研究定点突变HPV16E7基因中与转化有关的位点,原核细胞表达突变后的HPV16E7的表达及其免疫原性。方法在引物内设计突变位点,T载体克隆全部与转化有关的全长HPV16E7基因,然后亚克隆构建pET-28a-HPV16E7质粒(命名为pET-28a-HPVm16E7),转化E.Coli BL21细菌,在异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导下表达HPVm16E7蛋白,用HPV16E7单克隆抗体对其进行Western Blot分析。结果 DNA测序证明了构建的pET-28a-HPVm16E7是正确的,转化细菌后能够表达HPVm16E7蛋白,并能与不同的HPV16E7单抗抗体反应。结论在引物中设计突变位点能够定向突变HPV16E7与转化有关的位点,原核表达的HPVm16E7不影响其免疫原性,增加了基于HPV16E7的疫苗的安全性。 彭小丽 郭龙华 吴文权 刘梦琼关键词:人乳头瘤病毒 定点突变 免疫原性 梅毒螺旋体Tp0453-Tp0257重组融合蛋白的表达及作为梅毒诊断候选抗原的初步研究 被引量:2 2016年 目的本研究旨在探讨梅毒螺旋体Tp0453-Tp0257重组融合蛋白检测梅毒感染的可能性。方法用基因合成的方法构建重组p ET-28a-Tp0453-Tp0257质粒,重组融合蛋白的鉴定用SDS-PAGE和Western blot分析鉴定,重组融合蛋白作为抗原用于ELISA实验,该蛋白的灵敏度用来自一期、二期、三期和隐性梅毒患者的血清(90例)进行评估,其特异性用正常体检者的血清(120例)评估。结果 Western Blot分析证实了Tp0453-Tp0257重组融合蛋白能与梅毒阳性血清反应。该蛋白对梅毒诊断的总灵敏度为97.8%、总特异性为100.0%。结论本实验Tp0453-Tp0257重组融合蛋白作为新的梅毒特异诊断的候选抗原,取得较好的实验效果,有望进入临床推广使用。 郭龙华 彭小丽 伍晓飞 吴文权 刘梦琼关键词:梅毒 TP0453 重组融合蛋白 胱抑素C联合eGFR-MDRD诊断早期DN的研究 被引量:3 2015年 目的:比较分析胱抑素C(Cys C)、BUN、Scr、e GFR-MDRD和e GFR-cys等检测指标在诊断早期DN中的应用价值。方法:随机收集2012年1月至2014年10月本院收治的2型糖尿病(Type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者214例和来本院体检的100名健康人,并根据尿蛋白排泄率分为单纯的T2DM组和糖尿病组(DN组),收集患者的血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、血清胱抑素C(Cys C)等检测指标,并采用简化的MDRD公式根据Scr估算出e GFR(e GFR-MDRD),而Cys C则使用CHINAcys方程计算得出e GFR(e GFR-cys),对这些检测指标做统计学分析。结果:DN组和对照组相比BUN、Scr、Cys C、e GFRMDRD和e GFR-cys都有显著性变化,其中BUN、Scr和Cys C均显著高于对照组;e GFR-MDRD和e GFR-cys与对照组相比显著较低,5个检测指标均P<0.05;五个常用的检测指标ROS曲线面积都大于0.5,且P<0.05;单个检测指标中Cys C的检测指标最高能够达到80.38,其次是BUN和e GFR-MDRD;而联合检测中e GFR-MDRD+Cys C的灵敏度和约登指数远远高于e GFRMDRD+e GFR-cys和其他单项检测指标。结论:e GFR-MDRD结合Cys C指标的诊断对早期DN筛查是一种有效、可行且准确度较高的方法。 吴丽婷 刘梦琼关键词:糖尿病肾病 阿魏酸钠对氧化低密度脂蛋白所致的内皮细胞释放NO的影响 被引量:23 2002年 目的 分析阿魏酸钠的抗动脉粥样硬化作用机制 ,为临床治疗提供理论依据。方法 首先在体外进行低密度脂蛋白的氧化 ,然后分别与加有不同浓度的阿魏酸钠的人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)共同孵育 ,测定培养基上清液中NO的含量 ,从而观察阿魏酸钠对氧化低密度脂蛋白所致HUVEC释放NO的影响。结果 阿魏酸钠能明显抑制HUVEC所致的NO下降作用 ,这种抑制作用无剂量依赖性。 刘梦琼 郑义关键词:阿魏酸钠 氧化低密度脂蛋白 人脐静脉内皮细胞 抗动脉粥样硬化作用 血清胱抑素C测定在儿童肾病综合征中的应用 被引量:2 2011年 目的探讨血清胱抑素C(Cys-C)在儿童肾病综合征中的应用价值,并分析经糖皮质激素治疗后血清Cys-C浓度的变化。方法对40例儿童肾病综合征患儿经糖皮质激素治疗前后的血清Cys-C、血清肌酐(SCr)和尿素(Urea)含量进行分析检测,并与健康对照组比较。结果儿童肾病综合征组的血清Cys-C、Urea和SCr含量均显著高于正常对照组(P<0.01)。儿童肾病综合征组经激素治疗前Cys-C、Urea和SCr的阳性率分别为85.0%、52.5%和35.0%,治疗后分别为27.5%、20.0%和17.5%。儿童肾病综合征激素治疗前Cys-C较Scr和Urea浓度已显著增高(P<0.01),儿童肾病综合征激素治疗后有20%患者的Cys-C浓度较激素治疗前增高。结论测定血清Cys-C对诊断早期儿童肾病综合征病比Scr和Urea更具临床意义,使用大量的糖皮质激素治疗会影响Cys-C的浓度测定。 潘虹 李定富 刘梦琼关键词:儿童肾病综合征 血清胱抑素C 血肌酐 尿素 糖皮质激素 紫外酶促法检测血浆及尿中D-乳酸盐 2009年 目的本研究旨在建立了1种检测血浆和尿液中D-乳酸盐的酶学方法并对该法进行了方法学评价。方法用改良的紫外酶促法对血浆及尿中D-乳酸盐检测分析。结果在浓度为0-500μm血浆和尿标准曲线的线性非常好(相关系数,R=0.99)。血浆和尿液批内变异系数(CV)分别为为3.0%和5.8%;血浆和尿液的批间变异系数分别为7.1%和6.8%;血浆和尿液的平均回收率分别为(103.48.2%)和(100.1±7.2)%;结论该方法具有可接受的精度和回收率,准确快速,不需要大型仪器,可适用常规检测。 刘梦琼 林永前 陈代钊不同病理类型肺癌患者血清hsCRP和SA的表达 被引量:2 2008年 选择121例肺癌患者和40例健康体检者,采用免疫透射比浊法检测血清高敏C反应蛋白(hsCRP)水平,酵素法测定血清唾液酸(SA)水平。发现肺癌患者血清hsCRP、SA水平均明显高于对照组。不同病理类型肺癌患者间血清hsCRP和SA的水平相比无统计学差异。认为检测血清hsCRP和SA的水平有可能对肺癌的临床诊断提供有效的依据。 符惠群 陈代钊 刘梦琼 王俏梅关键词:C反应蛋白质 唾液酸 重组腺病毒Ad–sh–SOCS1增强宫颈癌树突状细胞疫苗免疫反应的作用研究 被引量:2 2021年 目的:研究沉默树突状细胞(DCs)中细胞因子信号抑制因子1(SOCS1)能否强化宫颈癌癌蛋白E7的表位肽E7.49–57脉冲DCs疫苗的免疫反应。方法:制备的重组腺病毒Ad–sh–SOCS1和Ad–sh–mSOCS1感染体外培养的小鼠骨髓来源的树突状细胞(BMDCs),用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT–PCR)检测SOCS1的表达,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测培养上清液肿瘤坏死因子α(TNF–α)、白细胞介素(IL)–12、IL–6的水平;并用表位肽E7.49–57脉冲被感染的DCs,体内、外研究对小鼠抗组成式表达HPV16E6E7的小鼠肺上皮肿瘤细胞(TC–1)的抗肿瘤效果。结果:重组腺病毒Ad–sh–SOCS1能显著抑制DCs中SOCS1的表达。与DCs组和Ad–sh–mSOCS1感染DCs组比较,感染重组病毒Ad–sh–SOCS1的DCs分泌的细胞因子IL–6、IL–12和TNF–α显著增多,差异具有统计学意义(P<0.05)。E7.49–57多肽脉冲的Ad–sh–SOCS1感染的DCs在体内及体外均能显著抑制TC–1肿瘤细胞的生长,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:重组腺病毒Ad–sh–SOCS1能增强宫颈癌DC疫苗的抗瘤免疫反应。 郑义 邹琛 徐建华 刘梦琼关键词:宫颈癌 树突状细胞 血浆低密度脂蛋白亚组分分离及鉴定 被引量:2 2002年 目的 :探讨一种分离并鉴定低密度脂蛋白亚组分的方法。方法 :通过沉淀法分离LDL ,然后经过超速离心法分离其亚组分。并用电泳法、免疫扩散法及电镜观察鉴定两种亚组分。结果 :LDL亚组份在较短时间内分离并证实经分离的两种亚组分为纯品。结论 雷森林 刘梦琼关键词:低密度脂蛋白 亚组分