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免疫组织化学法定位猪肾脏中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的研究被引量：1: 2010年; 脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)是目前全球污染谷物最严重的真菌毒素之一。在所有的易感动物中,以猪最为敏感。该研究采用DON标准品,通过静脉注射的途径,研究该毒素在猪体内肾脏的分布情况,为毒素的残留提供依据。选用10头健康阉公猪,随机分为2组,一组经乳静脉注射DON,注射剂量为75μg/kg体质量,另一组经乳静脉注射生理盐水。注射完成后开始计时,并观察记录猪的反应情况,待30min后放血宰杀,并迅速取肾脏,采用免疫组化法定位肾脏中DON的分布情况。研究结果显示,染毒剂量75μg/kg体质量组,静注后约5～10min开始出现明显的异常反应。具体表现为:狂躁不安,不停的磨牙,咀嚼,之后大量流涎,随之出现呕吐等症状,这一过程的持续时间对该组猪来说存在个体差异。免疫组化法定位结果显示,在肾小囊的壁层见有DON的分布。; 钱慧慧牛更智何敏剡海阔马勇江卢培成刘本杰邓衔柏; 关键词：脱氧雪腐镰刀菌烯醇肾脏免疫组织化学法

全能性相关基因在鸡胚胎干细胞中分化过程中的表达: Nanog、PouV与Sox2等基因是调控胚胎干细胞全能性的关键基因,为研究鸡胚胎干细胞分化过程中全能性相关基因的表达模式,本试验采用传代生长至第7代鸡胚胎干细胞以及在不含饲养层、不添加抑分化因子的体系中分化培养1 d、...; 王丙云陈胜锋刘本杰计慧琴陈志胜; 文献传递

全能性相关基因在早期鸡胚发育过程中的表达: Nanog、PouV与Sox2等基因是调控胚胎干细胞全能性的关键基因,为研究全能性相关基因在早期胚胎发育过程中的表达情况,分别提取孵化后0、8、16、22、32及42 h鸡胚的总RNA,反转录后,实时荧光定量PCR检测N...; 陈志胜刘本杰王丙云计慧琴陈胜锋; 文献传递

链霉菌抗生物素蛋白—过氧化物酶连结法定位肝脏中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的研究: 2010年; 脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON),又名呕吐毒素,是目前全球谷物污染最严重的真菌毒素之一。在所有的易感动物中,以猪最为敏感。本研究选用10头健康阉公猪,随机分为2组,染毒组和对照组,染毒组经乳静脉注射DON,注射剂量为75μg/kg体重,对照组经乳静脉注射生理盐水。注射完成后开始计时30 min后放血宰杀,迅速取肝脏,采用链霉菌抗生物素蛋白—过氧化物酶连接结(streptavidin-perosidase,SP)法定位肝组织中的DON。SP法定位结果显示,在染毒组肝门管区小叶间静脉的血管壁有DON的分布。本研究采用SP法定位DON在猪体内消化器官组织的分布情况,为毒素的残留研究提供依据。; 刘本杰牛更智何敏卢培成张曼玉钱慧慧马红娜邓衔柏; 关键词：脱氧雪腐镰刀菌烯醇肝脏 SP法

全能性相关基因cNanog、cPouV和Sox2在鸡早期胚胎中的表达被引量：4: 2012年; 背景:全能性相关基因cPouV、cNanog和Sox2对鸡胚胎干细胞自我更新和全能性的维持起重要调控作用,其在鸡早期胚胎中的表达情况和作用缺乏了解。目的:通过检测cNanog、cPouV和Sox2在鸡早期胚胎中的表达情况,研究基因在早期胚胎发育过程中的作用。方法:将180枚新鲜受精种鸡蛋分为6组,分别孵育0,8,16,22,32,42h后取出。获取胚胎样品,以β-actin为内参基因,采用实时定量PCR检测其cNanog、cPouV和Sox2的相对表达量。结果与结论:cNanog和cPouV的表达量模式相似,在孵育的第0,8,16,22h表达量增加,孵育22h达到峰值,随后逐级下降。Sox2的相对表达量呈明显上调趋势。说明,cNanog、cPouV和Sox2在鸡早期胚胎发育调控中的重要作用,且作为全能性的标志基因,作用有所相同。; 刘本杰陈志胜陈胜锋计慧琴王丙云邓衔柏; 关键词：干细胞全能性 SOX2

全能性相关基因在早期鸡胚发育过程中的表达: 2012年; Nanog、PouV与Sox2等基因是调控胚胎干细胞全能性的关键基因,为研究全能性相关基因在早期胚胎发育过程中的表达情况,分别提取孵化后0、8、16、22、32及42 h鸡胚的总RNA,反转录后,实时荧光定量PCR检测Nanog、PouV与Sox2 mRNA的表达水平。结果显示Nanog与PouV mRNA的表达水平在16及22 h显著上升,此后显著下降直至42 h均维持低水平表达。; 陈志胜刘本杰王丙云计慧琴陈胜锋; 关键词：全能性等基因反转录早期胚胎发育试验期早期发育

全能性相关基因在鸡胚胎干细胞中分化过程中的表达: 2012年; Nanog、PouV与Sox2等基因是调控胚胎干细胞全能性的关键基因,为研究鸡胚胎干细胞分化过程中全能性相关基因的表达模式,本试验采用传代生长至第7代鸡胚胎干细胞以及在不含饲养层、不添加抑分化因子的体系中分化培养1 d、3 d、6 d及10 d的鸡胚胎干细胞,提取总RNA,反转录后实时荧光定量PCR检测细胞中Nanog、PouV与Sox2 mRNA的表达水平。结果显示。; 王丙云陈胜锋刘本杰计慧琴陈志胜; 关键词：胚胎干细胞全能性鸡胚胎等基因分化因子

免疫组织化学法定位肝脏中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的初步研究被引量：2: 2010年; 本研究旨在探索定位肝脏中脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynival,DON)的方法,为以后定位全身组织中的DON提供方法依据。选用刚断奶的二元白猪,保定后,耳缘静脉滴注葡萄糖盐水,外科手术法暴露其肝脏,采用微量进样器缓缓注入DON,采用免疫组织化学染色结合显微镜观察,对肝脏中的DON进行定位研究,可以在注射针眼附近定位到DON。免疫组织化学法可以作为一种定位组织中DON的方法。; 牛更智卢培成刘本杰邓衔柏; 关键词：脱氧雪腐镰刀菌烯醇肝脏免疫组织化学

鸡胚胎干细胞分离方法和培养体系的优化被引量：9: 2011年; 背景:胚胎干细胞是从动物早期胚胎的内细胞团或原始生殖细胞分离出来的具有发育全能性的一种未分化的无限增殖细胞系。而鸡胚胎干细胞则是从X期鸡胚的胚盘分离而来。目的:优化鸡胚胎干细胞分离方法和离体培养体系。方法:采用滤纸纸环-发环的方法从X期鸡胚分离胚盘细胞,并采用STO细胞作为饲养层和大鼠肝细胞(BRL)条件培养基(CM)+细胞因子作为离体培养体系对分离的胚盘细胞进行培养。结果与结论:滤纸纸环-发环法获得的完整胚盘率为75%～85%,克隆形成率约为50%。BRL-CM+饲养层培养体系,鸡胚胎干细胞可传至7代,而BRL-CM+饲养层+细胞因子培养体系,鸡胚胎干细胞可传至25代。分离到的鸡胚胎干细胞,经碱性磷酸酶染色、SSEA-1染色鉴定,表明鸡胚胎干细胞处于未分化状态。提示,实验不仅优化了鸡胚胎的分离方法,获得完整且杂质少的胚盘,而且进一步优化了鸡胚胎干细胞体外培养体系。; 张曼玉陈志胜计慧琴陈胜峰刘本杰邓衔柏王丙云袁立江青艳; 关键词：胚胎干细胞细胞因子

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刘本杰