刘斌剑
- 作品数：9 被引量：8H指数：2
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- 急性肺损伤的基因治疗
- 2003年
- 刘斌剑王建民陈林
- 关键词：急性肺损伤基因治疗
- 角质细胞生长因子受体腺病毒表达载体在脂多糖所致肺泡上皮细胞损伤修复中的应用被引量：3
- 2005年
- 目的观察KGFR腺病毒表达载体在脂多糖(LPS)致A549细胞损伤模型中转基因表达KGFR的情况及其促使A549细胞对抗LPS损伤的效果,为基因治疗急性肺损伤探索有效途径。方法KGFR腺病毒表达载体感染LPS致伤前后的A549细胞,通过形态学观察转基因作用对LPS致伤前后A549细胞的影响,并运用western blot检测KGFR腺病毒表达载体在LPS致伤前后的A549细胞中转基因表达KGFR蛋白情况。结果KGFR腺病毒表达载体感染LPS致伤前后的A549细胞,转基因组对抗LPS致伤作用明显,western blot检测表明KGFR腺病毒表达载体转基因表达KGFR蛋白效果显著(P<0.05)。结论KGFR腺病毒表达载体能够转基因表达KGFR蛋白,并具备转基因治疗急性肺损伤的能力。
- 刘斌剑王建民陈林宋瑞华赵玲宋维威苟元彬
- 关键词：腺病毒载体急性肺损伤脂多糖
- DFF和CIDE介导细胞凋亡的分子机制被引量：2
- 2003年
- DNA裂解因子 (DFF)是由分子量分别为 4 5 k D和 4 0 k D两个亚单位组成的异源二聚体。在细胞凋亡信号启动的 caspase级联活化过程中作为下游 caspase的底物被活化并形成脱氧核糖核酸酶 (DNase) ,从而介导并调节 DNA断裂和染色质凝聚。 DFF作为细胞凋亡信号传递的主要途径在细胞凋亡中起着关键作用。诱导细胞死亡的 DFF4 5样效应因子 (CIDE)是与 DFF同源的诱导凋亡因子 ,CIDE与 DFF在结构、功能和作用上有很大的相似性 ,可发挥诱导凋亡的作用。本文阐述了 DFF和 CIDE在诱导细胞凋亡过程中担当的角色和它们相互作用的机制 ,从而揭示 DFF和 CIDE在细胞凋亡过程中作为传递凋亡信号——
- 刘斌剑王建民陈林
- 关键词：介导细胞凋亡分子机制
- KGFR腺病毒表达载体的构建及其在LPS所致肺泡上皮细胞损伤修复中的应用
- 急性肺损伤(acute lung injury,ALI)是伴有严重呼吸功能障碍的一个复杂多变的过程.治疗和减轻ALI对机体的损害,降低死亡率,一直是医学界研究的热点.目前在传统的ALI治疗基础之上,对ALI的基因治疗也取...
- 刘斌剑
- 关键词：腺病毒载体分子克隆
- 文献传递
- 环胞霉素A的免疫抑制作用与血管内皮细胞氧化应激反应及毒性作用的分子生物学机理
- 环胞霉素A（cyclosporinA,CsA）是一个有效的免疫抑制药物,在治疗自身免疫性疾病和同种异体器官移植抗排斥等方面已被广泛应用并有很大发展。由于抗变性排斥效果较好,使器官移植的存活率上升到80-90%,但移植器官...
- 孙月庭刘斌剑
- 文献传递
- 临床化学检验结果的误差分析及可比性探讨
- 目的 分析临床化学检验结果误差来源，探索减少误差提高结果可比性的方法。方法 运用数学模型纠正实验误差，参照ISO17025标准为检验结果进行溯源性分析和不确定度赋值。结果 运用数学公式可以修正实验误差，检验结果带有不确定...
- 刘斌剑祁朝玲孙月庭
- 关键词：溯源性不确定性
- 脂多糖致小鼠急性肺损伤组织病理变化与角质细胞生长因子受体表达的关系被引量：1
- 2004年
- 目的 :观察急性肺损伤 (ALI)时小鼠肺组织损伤程度与角质细胞生长因子受体 (KGFR)表达水平的关系 ,为基因治疗急性肺损伤提供依据。方法 :建立脂多糖 (LPS)造成的小鼠肺损伤模型和Ⅱ型肺泡上皮细胞 (A5 49细胞 )损伤模型 ,通过病理分析、反转录聚合酶链反应 (RT PCR)和荧光定量聚合酶链反应 (FQ PCR)观察肺组织损伤程度与KGFR表达水平的关系。结果 :LPS造成轻度、中度和重度肺损伤时肺组织KGFR表达水平逐步下降 ,各种损伤程度之间KGFR表达存在显著差异 (P <0 .0 5 )。A5 49细胞的KGFR表达变化不明显 (P >0 .0 5 )。结论 :随着肺损伤程度的加重 ,肺组织KGFR表达水平逐次减低 。
- 刘斌剑王建民陈林宋瑞华赵玲宋维威
- 关键词：脂多糖小鼠急性肺损伤角质细胞受体表达
- Bek腺病毒表达载体的构建及其在哺乳类动物细胞中的表达被引量：2
- 2006年
- 目的构建Bek腺病毒表达载体并观察该载体在成纤维细胞中转基因表达FGFR2-Ⅲc的情况,为研究骨骼发育打下基础。方法利用AdEasy-1腺病毒载体系统构建Bek腺病毒表达载体;该载体感染成纤维细胞后,通过荧光定量PCR(FQ-PCR)检测Bek腺病毒表达载体转基因表达FGFR2-ⅢcmRNA情况。结果Bek腺病毒表达载体感染成纤维细胞后,成纤维细胞有绿色荧光表达,荧光定量PCR检测表明Bek腺病毒表达载体转基因表达FGFR2-ⅢcmRNA效果明显(P<0·05)。结论Bek腺病毒表达载体构建成功,能够转基因表达FGFR2-ⅢcmRNA,为研究骨骼发育和成骨机制提供了基础。
- 刘斌剑王建民陈林宋瑞华赵玲宋维威苟元彬
- 关键词：成纤维细胞生长因子受体腺病毒载体
- 角质细胞生长因子受体转基因对急性肺损伤时肺泡上皮细胞钠离子通道的影响
- 2009年
- 目的观察角质细胞生长因子受体（KGVR）腺病毒表达载体在大鼠急性肺损伤前后对肺泡Ⅱ型上皮细胞钠离子通道表达的促进作用，从而验证基因治疗急性肺损伤的效果。方法将雄性SD大鼠40只分成4组：正常对照组（n=8），致伤对照组（n=10），正常转基因组（n=10），致伤转基因组（n=12）。用脂多糖（LPS）造成急性肺损伤模型，以肺组织明显肿大病变为制模成功标准。正常转基因组和致伤转基因组均通过大鼠尾静脉注射KGFR基因的腺病毒表达载体应用液1mL，72h后致伤转基因组和致伤对照组分别通过大鼠尾静脉以5mg／kg注射LPS，正常转基因组和正常对照组则注射等量的生理盐水。过48h后，断头处死所有实验组大鼠，取肺组织进行实验。通过免疫组化和免疫电镜检测各组大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞钠离子通道的表达情况。数据采用完全随机区组设计的方差分析，行LSD-t检验，以P〈0．05为差异具有统计学意义。结果肺泡Ⅱ型上皮细胞钠离子通道表达水平（免疫组化）由高到低依次为：正常对照组（PU值=47．7±3．33），正常转基因组（PU值=46．9±5．21），致伤转基因组（PU值=29．19±4．11）和致伤对照组（PU值=5．1±2．3）；致伤转基因组的钠离子通道表达水平低于正常转基因组（t=9．134，P〈0．001）和正常对照组（t=10．601，P〈0．001），但明显高于致伤对照组（t=16．466，P〈0．001）。结论KGFR腺病毒表达载体转基因效果明显，能够在LPS致伤情况下有效促进钠离子通道的表达，缓解肺泡腔内钠水潴留，达到转基因治疗肺损伤的效果。
- 刘斌剑祁朝玲郑淑辉周木秀王建民
- 关键词：钠离子通道急性肺损伤基因治疗
