刘宇健
- 作品数:39 被引量:102H指数:6
- 供职机构:第二军医大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 地塞米松对人肝癌细胞系SMMC-7721细胞酪氨酸转氨酶活性诱导能力丧失的机制研究
- 2008年
- 目的:通过测定人肝癌SMMC 7721细胞酪氨酸转氨酶(TAT)cDNA序列,并观察其糖皮质激素受体(GR)通路是否存在异常,以探讨地塞米松(Dex)丧失诱导SMMC-7721细胞TAT活性的机制。方法:RT-PCR扩增SMMC-7721细胞全长TAT cDNA并进行测序;采用实时定量PCR观察Dex对SMMC-7721细胞TAT mRNA表达的影响,并与HepG2细胞作对照;采用电穿孔法将GR特异性报告基因GRE-tk-LUC及GRE-MMTV CAT分别瞬时转入SMMC-7721细胞中,观察Dex对荧光素酶(LUC)和氯酶素乙酰转移酶(CAT)表达的影响,并与HepG2细胞作对照。结果:SMMC-7721细胞TAT cDNA中第576位碱基存在同义突变;Dex能够诱导SMMC-7721细胞中TAT mRNA的表达,最大诱导倍数为2.22,明显低于HepG2细胞(15.1倍,P<0.01);Dex诱导了SMMC-7721细胞LUC及CAT的表达,与HepG2细胞无显著差异。结论:Dex对SMMC-7721细胞TAT mRNA诱导水平降低,可能是TAT活性不增高的主要原因。
- 李忆东刘宇健卢建
- 关键词:糖皮质激素受体转录激活
- 糖皮质激素逆转内毒素耐受及其可能机制
- 目的糖皮质激素(glucocorticoid,GC)在内毒素血症治疗过程中的运用一直有所争议,近年来的大规模临床应用证明小剂量 GC 替代治疗有助于缓解病情并减少死亡率,但机制不明,本实验利用我们已建立的内毒素耐受的巨噬...
- 朱晓燕刘宇健卢建徐仁宝
- 关键词:内毒素耐受糖皮质激素
- 文献传递
- 糖皮质激素受体β对糖皮质激素受体α转录激活功能的影响被引量:7
- 2002年
- 目的 :通过研究糖皮质激素受体 β对糖皮质激素受体α转录激活功能的影响 ,探讨糖皮质激素受体β存在的生物学意义。 方法 :将糖皮质激素受体α的报告基因CAT和糖皮质激素受体 β共转染入人骨肉瘤细胞系HOS - 86 0 3,激素处理后 ,用ELISA方法检测CAT活性 ;用定量RT -PCR方法检测糖皮质激素受体 β的稳定过度表达对糖皮质激素诱导p2 1mRNA表达的影响。结果 :糖皮质激素受体 β抑制报告基因CAT的表达 ,随着糖皮质激素受体 β转染量的增加 ,抑制效果越明显 ;糖皮质激素受体β同样可以抑制糖皮质激素对糖皮质激素受体α内源性靶基因p2 1mRNA的诱导。结论 :糖皮质激素受体 β对糖皮质激素受体α的转录激活功能有抑制作用 ,糖皮质激素受体 β可能是糖皮质激素受体α的内源性抑制因子。
- 刘宇健宋亮年陈玉霞卢建
- 关键词:肾上腺皮质激素类转染骨肉瘤糖皮质激素受体Β糖皮质激素受体Α
- 糖皮质激素受体阻断导致巨噬细胞易感化及其机制初探
- 2003年
- 朱晓燕刘宇健卢建徐仁宝
- 关键词:糖皮质激素受体巨噬细胞游离钙离子信号转导分子
- 烫伤大鼠远隔器官热休克抑制基因表达的研究被引量:2
- 1997年
- 为了研究应激是否可诱导完整高等动物远隔器官细胞的热休克反应,在已发现烫伤大鼠肝、脑有热休克蛋白诱导的基础上,本文进一步研究了正常基因表达的抑制。雄性SD大鼠背部烫伤后,于10~240min分别断头处死,然后通过斑点印迹法分析热休克抑制基因-1信使核糖核酸的变化。结果发现:其在烫伤大鼠肝、脑中迅速减少,烫伤后240min仍未恢复到对照水平;其减少与烫伤程度成比例。因而可得出如下结论:应激可以诱导完整动物远隔器官的热休克反应,并讨论了其可能的病理意义。
- 郭兴中刘宇健王易伦徐仁宝
- 关键词:应激热休克反应基因表达
- 地塞米松对人肝癌细胞系酪氨酸转氨酶mRNA表达的影响被引量:2
- 2002年
- 目的 :观察地塞米松 (Dex)对人肝癌细胞系 (SMMC- 772 1细胞 )酪氨酸转氨酶 m RNA表达的影响。 方法 :采用定量逆转录 -多聚酶链反应 (RT- PCR)检测酪氨酸转氨酶 m RNA。 结果 :Dex能够诱导 SMMC- 772 1细胞酪氨酸转氨酶 m RNA的表达 ,且具有剂量依赖性和时间依赖性特点 ,但诱导倍数偏低。 结论 :SMMC- 772
- 李忆东刘宇健卢建
- 关键词:糖皮质激素类糖皮质激素受体地塞米松MRNA
- 稳定表达糖皮质激素受体β的人骨肉瘤细胞系的建立被引量:2
- 2002年
- 目的 :建立稳定表达糖皮质激素受体β的细胞系。 方法 :构建糖皮质激素受体β的真核表达载体 ,用L ipotransfectamine法转染人骨肉瘤细胞系 HOS- 86 0 3,经 G4 18筛选后得到稳定转染细胞株 ;用极限稀释法获取亚克隆细胞株 ;用定量 RT- PCR方法鉴定糖皮质激素受体β m RNA的表达。结果与结论 :建立了稳定表达糖皮质激素受体β的细胞株 。
- 刘宇健陈玉霞宋亮年卢建
- 关键词:骨肉瘤基因转染聚合酶链反应
- KLK8基因的用途及相关产品
- 本发明涉及医药技术领域,具体为人KLK8作为靶标用于制备糖尿病心肌病心脏损伤治疗药物或者制备糖尿病心肌病心脏损伤诊断药物的用途,本发明确认糖尿病小鼠心脏中KLK8表达显著升高,并且可导致心脏内皮细胞发生间充质转化,且KL...
- 朱晓燕倪鑫杜建奎俞晴刘宇健杜淑芳黄黎阳徐丹红
- 文献传递
- 创伤患者p38MAPK信号通路的变化及其临床意义被引量:5
- 2008年
- 目的探讨不同创伤程度患者体内p38MAPK信号通路的变化及意义。方法不同创伤程度住院患者150例,根据创伤度评分(ISS)分为三组:ISS≤15分(L-ISS)组、ISS 16~25分(M-ISS组)、ISS≥25分(H-ISS)组,每组50例,同时选取30名健康献血者作为对照组。不同创伤程度患者在创伤后6h内和第1、3、5、7天分别采集外周血,对照组采集外周血一次,采用实时定量PCR(RQ-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western-blot)检测白细胞中p38MAPK的基因表达、蛋白表达及活化(磷酸化)水平变化。结果创伤6h内不同创伤程度患者血液中p38MAPK的基因表达与正常人比较均显著增加(P〈0.05),在创伤后第1天达到高峰(P〈0.01),并持续高表达至第7天(P〈0.05);在创伤后第1天不同创伤程度患者体内的p38MAPK蛋白表达和活化(磷酸化)水平也显著增强(P〈0.05);进一步的试验发现,p38MAPK的基因表达、蛋白表达和活化(磷酸化)程度都随创伤级别的增加而升高(P〈0.05)。结论创伤患者体内的p38MAPK信号通路被激活,且创伤程度与p38MAPK的表达和活化呈正相关,表明p38MAPK信号通路在创伤的病理机制中发挥重要作用。
- 王毅鑫苏文利朱文献孙仲伦陈奋金戈刘宇健李忆东
- 关键词:创伤信号通路P38MAPK
- 糖皮质激素对糖皮质激素受体α和βmRNA表达的调节作用被引量:25
- 2002年
- 目的 :研究糖皮质激素对人类糖皮质激素受体α和 βmRNA表达的调节作用。 方法 :采用定量逆转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR)检测受体mRNA。结果 :人骨肉瘤细胞系、卵巢癌细胞系及外周血白细胞中除有糖皮质激素受体αmRNA表达外 ,还有糖皮质激素受体 βmRNA的表达 ;糖皮质激素对糖皮质受体α和 βmRNA的表达均具有明显的降调作用 ,且具有剂量依赖性和时间依赖性特点。结论 :糖皮质激素受体 β在人类多种组织细胞中均有表达 。
- 刘宇健宋亮年卢建
- 关键词:糖皮质激素类骨肉瘤卵巢肿瘤受体