刘健康
- 作品数：7 被引量：26H指数：2
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- 微小染色体维持蛋白5在肝癌组织的表达及其对肝癌细胞增殖、迁移的调节作用被引量：1
- 2020年
- 目的探讨微小染色体维持蛋白5(MCM5)在肝细胞肝癌(HCC)组织中的表达和预后的关系,观察其对HCC细胞的增殖、迁移的调节作用。方法根据肿瘤基因组图谱(TCGA)和GEO数据库,分析HCC组织和癌旁组织中MCM5的差异表达,并绘制生存曲线。将MCM5低表达的HCC细胞株作为实验组(HepG2、HuH7),以转染空载体的HCC细胞株为对照组(shRNAHepG2、shRNAHuH7)。实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)、蛋白质印迹法(Western blot)技术检测MCM5在人HCC细胞株和正常肝细胞株的表达量。短发卡RNA(shRNA)干扰MCM5表达后,细胞计数试剂盒(CCK-8)实验、细胞划痕修复实验检测HCC细胞的增殖和迁移能力;流式细胞术检测HCC细胞的凋亡率。多组资料间比较采用单因素方差分析和t检验,计数资料的比较采用χ2检验。结果MCM5在HCC组织较癌旁组织表达升高5.32倍(t=4.464,P<0.05),MCM5高表达患者5年生存率(38%)较低表达患者(51%)明显下降,差异有统计学意义(t=5.337,P<0.05)。MCM5在HCC细胞株(HepG2、HuH7)的表达量(3.95±0.37、3.09±0.27)较人正常肝细胞(HL7702)的表达量(0.94±0.13)明显增高,差异有统计学意义(t=14.532、16.339,P<0.01)。24、48、72、96 h细胞增殖能力检测显示,实验组HepG2细胞(0.51±0.04、0.94±0.06、1.25±0.15、0.94±0.06)较对照组的HepG2细胞(0.68±0.06、1.21±0.09、1.95±0.12、1.21±0.09)显著下降,差异有统计学意义(t=7.328、6.997、8.779、11.338、12.067,P<0.05);实验组HuH7细胞增殖能力(0.48±0.05、0.76±0.13、1.44±0.25、1.44±0.25)较对照组的HuH7细胞(0.58±0.07、0.98±0.13、1.86±0.14、1.98±0.13)显著下降,差异有统计学意义(t=4.787、5.062、5.997、8.932,P<0.05)。实验组的HepG2细胞、HuH7细胞划痕愈合百分比[(19.14±0.98)%、(19.57±1.01)%]较对照组划痕愈合百分比[(45.29±1.35)%、(40.22±1.66)%]明显减少,差异有统计学意义(t=25.369、22.891,P<0.01)。实验组HepG2细胞、HuH7细胞凋亡率[(14.68±3.21)%、
- 刘健康田鹏付强刘传江张宏伟
- 关键词：微小染色体维持蛋白5增殖迁移
- 叉头框蛋白C1和上皮钙黏素与胃癌患者临床特征和预后的关系及对细胞生物学行为的影响被引量：2
- 2020年
- 目的探讨叉头框蛋白C1(FOXC1)、上皮钙黏素(E-cadherin)的表达与胃癌患者临床特征和预后的关系,以及对胃癌细胞生物学行为的影响及作用机制。方法免疫组化法检测97例胃癌患者胃癌组织及相应癌旁正常组织中FOXC1、E-cadherin的表达,及其与患者临床特征和预后的关系;构建稳定干扰细胞系SGC7901-shFOXC1,同时设置阴性对照SGC7901-shNC和空白对照SGC7901,采用蛋白质印迹法(Western blot)检测上述细胞系及人永生化正常胃黏膜细胞系GES-1中FOXC1和E-cadherin的相对表达量,平板克隆实验和Transwell实验分别检测各胃癌细胞系的增殖和侵袭能力。结果与癌旁正常组织相比,胃癌组织中FOXC1阳性表达率升高,E-cadherin阳性表达率降低(P﹤0.05)。TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期、分化程度为低中分化、淋巴结转移、肿瘤直径≥3 cm、基层浸润深度突破浆膜层胃癌患者胃癌组织中FOXC1蛋白阳性表达率较高、E-cadherin蛋白阳性表达率较低,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。Spearman相关分析结果显示,胃癌患者胃癌组织中FOXC1表达与E-cadherin表达呈负相关(r=-0.645,P=0.000)。预后结果显示,FOXC1阳性表达患者的5年生存率低于阴性表达患者,E-cadherin阳性表达患者的5年生存率高于阴性表达患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。空白对照SGC7901、阴性对照SGC7901-shNC细胞中FOXC1蛋白的相对表达量均高于人永生化正常胃黏膜细胞系GES-1,E-cadherin蛋白的相对表达量均低于人永生化正常胃黏膜细胞系GES-1,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。敲低FOXC1的表达后,SGC7901细胞增殖能力和侵袭能力均受影响。结论胃癌组织中FOXC1呈高表达,E-cadherin呈低表达,二者呈负相关;FOXC1通过促进胃癌细胞增殖、抑制E-cadherin表达来促进上皮-间充质转化进程,从而提高胃癌细胞的侵袭能力,最终导致胃癌的发生发展并影响患者的预后。
- 郭新宇田鹏张鹏刘毅刘健康
- 关键词：胃癌上皮钙黏素增殖
- 骨髓间充质干细胞对大鼠慢性胰腺炎中星状细胞的影响被引量：2
- 2011年
- 目的观察骨髓间充质干细胞（BMSCs）对慢性胰腺炎（CP）中星状细胞（PSC）的活化、增殖和分化的影响。方法将80只SD大鼠随机分为空白组（20只，注射无菌生理盐水）、模型组[20只，尾静脉注射二氯二丁基酯（DBTC）制作大鼠CP模型]、治疗组（20只，于CP模型制作成功后尾静脉注射体外培养的同种异体GFP-MSCs）、假治疗组（20只，于CP模型制作成功后尾静脉注射等量的无菌生理盐水）。取大鼠胰腺检测PSC活化表达的Desmin、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）水平，组织中Ⅰ、Ⅲ胶原含量及白细胞介素（IL）-10、肿瘤坏死因子（TNF）-α、转化生长因子（TGF）-β1表达水平。结果治疗组PSC表达的Desmin、GFAP、α-SMA，组织中Ⅰ（0．135±0．030）ng／g、Ⅲ胶原含量（0．029±0．008）ng／g，TGF-β1（0．020±0．006）μg／L浓度均低于假治疗组（P〈0．05），但IL-10（603．799±89．374）g/ml，TNF-α（507．45±90．13）μg／L均高于假治疗组（P〈0．05），后者与模型组之间的差异无统计学意义（P〉0．05），空白组未见明显异常。结论BMSCs可以通过对细胞因子的调控减少PSC的活化，抑制其增殖及分化，降低细胞外基质的沉积。
- 刘传江秦涛刘健康唐强王玉柱张宏伟
- 关键词：骨髓间充质干细胞慢性胰腺炎星状细胞
- 腹腔镜袖状胃切除术肥胖患者应用肺复张技术围手术期肺功能变化分析
- 2021年
- 目的:肺复张技术对腹腔镜袖状胃切除术肥胖患者围手术期肺功能的影响。方法:随机选择78例从2016年12月~2019年4月于某院接受腹腔镜袖状胃切除术治疗的肥胖患者作为研究对象,并将其按奇偶数数字抽签法随机分为参照组与探究组各39例。给予参照组患者常规性围术期护理,并在此基础上采用肺复张技术对探究组患者进行联合护理,而后就两组患者的围术期肺功能变化情况以及术后恢复情况与术后并发症发生率进行对比分析。结果:探究组患者的术后并发症总发生率(7.68%)明显低于参照组患者的术后并发症总发生率(25.65%),且相关数据差异具有统计学意义(P<0.05);此外,两者亦在围术期肺功能变化情况与术后恢复情况的相关数据中均存在统计学差异(P<0.05)。结论:在常规性围术期护理对腹腔镜袖状胃切除术肥胖患者实施肺复张护理方案,既能够加快其围术期间的肺功能改善速度,并且还可最小化术后并发症发生率,有利于营造良好的术后恢复效果,值得借鉴与推广。
- 刘健康杨亚利
- 骨髓间充质干细胞对大鼠慢性胰腺炎炎性因子的影响被引量：7
- 2011年
- 目的观察骨髓间充质干细胞（BMSCs）对大鼠慢性胰腺炎（CP）炎性因子的影响。方法将80只sD大鼠随机分为空白组（20只，注射无菌生理盐水），模型组[20只，尾静脉注射二丁基二氯化物（DBTC）制作大鼠cP模型]，假治疗组（20只，尾静脉注射DBTC制作大鼠cP模型后，输入和BMSCs等量的无菌生理盐水）和治疗组（20只，于CP模型制作成功后尾静脉注射体外培养的同种异体BMSCs）。80d后采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测各组大鼠胰腺中白细胞介素（IL）-1、IL-6、IL-8、IL-10、肿瘤坏死因子（TNF）-α、转化生长因子（TGF）-β水平。结果治疗组中IL-1（652．326±36．424）ng／L，IL-6（8．347±1．094）ng／L，IL-8（352．487±69．340）ng／L。TGF-β（0．020±0．006）μg/L，均低于假治疗组与模型组（P〈0．05），IL-10（603．799±89．374）ng／L，TNF-α（507．450±90．130）μg/L则高于假治疗组和模型组（P〈0．05）。模型组和假治疗组之间IL-1、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α、TGF-β的表达水平差异无统计学意义（P〉0．05）。结论同种异体BMSCs的输入可以降低CP中促炎因子的水平，提高抗炎因子的浓度，有助于减轻CP的炎症反应，减缓甚至阻止CP的发展。
- 刘传江秦涛刘健康唐强王玉柱张宏伟
- 关键词：骨髓间充质干细胞慢性胰腺炎炎性因子
- 结直肠癌肝转移患者射频消融术后小核仁RNA宿主基因15变化及意义被引量：1
- 2020年
- 目的探究结直肠癌肝转移患者射频消融术后小核仁RNA宿主基因15(SNHG15)变化及意义。方法采用定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测58例结直肠癌肝转移患者射频消融术治疗前后血清SNHG15 miRNA的相对表达量,分析其与结直肠癌肝转移患者预后的关系。结果射频消融术治疗前,结直肠癌肝转移患者血清SNHG15 miRNA的相对表达量为(2.86±0.67),明显高于射频消融术治疗后结直肠癌肝转移患者的(1.77±0.45),差异有统计学意义(P﹤0.01)。58例结直肠癌肝转移患者1、2和3年的生存率分别为91.38%(53/58)、68.97%(40/58)和62.07%(36/58)。经射频消融术治疗3年后,结直肠癌肝转移患者生存36例,死亡22例,分别作为生存组和死亡组。生存组患者血清SNHG15 miRNA相对表达量为(1.52±0.34),明显低于死亡组患者的(2.17±0.30),差异有统计学意义(P﹤0.01)。血清SNHG15 miRNA相对表达量诊断结直肠癌肝转移患者预后的曲线下面积(AUC)为0.924。以SNHG15 miRNA相对表达量为1.78为临界值,SNHG15 miRNA相对表达量﹥1.78的结直肠癌肝转移患者平均总生存时间为18.61个月,低于SNHG15 miRNA相对表达量≤1.78的结直肠癌肝转移患者的平均总生存时间34.10个月,差异有统计学意义(P﹤0.05)。Cox分析结果显示,血管侵犯情况和SNHG15 miRNA相对表达量与结直肠癌肝转移患者总生存时间密切相关。结论结直肠癌肝转移患者射频消融术后SNHG15 miRNA的相对表达量降低,其相对表达量与射频消融术治疗结直肠癌肝转移患者的预后密切相关。
- 郭新宇田鹏张鹏刘毅刘健康
- 关键词：结直肠癌肝转移射频消融术
- 大鼠急性胰腺炎凋亡相关微小RNA表达谱分析被引量：13
- 2011年
- 目的 分析大鼠急性胰腺炎凋亡相关微小RNA（miRNA）的表达谱.方法 将SD大鼠36只随机分为：空白对照组、急性水肿性胰腺炎组（AEP）和急性坏死性胰腺炎组（ANP）.AEP组模型采用L-精氨酸150 mg/kg腹腔注射建立,ANP组模型采用L-精氨酸2400 mg/kg腹腔注射建立;各组于造模后12 h,检测血清淀粉酶、脂肪酶含量;TUNEL法检测胰腺组织腺泡细胞的凋亡,对胰腺组织进行病理学评分,各组选择2例应用miRNA芯片技术检测miRNA的表达,筛选表达差异miRNA,进行层次聚类分析.结果 与ANP组比较,AEP组的血清淀粉酶、脂肪酶和病理学评分明显降低（P＜0.05）,胰腺腺泡细胞凋亡指数显著升高（P＜0.05）;实验组与空白对照组比较各指标差异有统计学意义（P＜0.05）.miRNA芯片分析：与空白对照组比较,ANP组和AEP组表达差异均在2倍以上;且与ANP组比较,AEP组表达差异在2倍以上,差异有统计学意义（P＜0.05）的miRNA认为是凋亡相关miRNA（AA miRNA）.表达差异AA miRNA共计有8条,其中与ANP组比较,2倍以上升高AA miRNA的共5条;2倍以上降低AA miRNA的共3条.结论 急性胰腺炎发病过程某些miRNA可能参与胰腺炎腺泡细胞凋亡过程的凋节.
- 秦涛李杰张宏伟刘传江刘健康
- 关键词：急性胰腺炎凋亡微小RNA
