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问号钩端螺旋体融合基因Lip21-LipL32真核、原核表达系统的构建: 目的:构建问号钩端螺旋体融合基因Lip21-LipL32真核及原核表达系统。方法:采用连接引物通过PCR构建融合基因Lip21-LipL32,分别与相应的真核载体pVAX1及原核载体 pET28b连接,真核重组质粒转染H...; 冯春燕郭晓奎; 文献传递

钩端螺旋体两个疫苗候选的外膜蛋白: 本发明提供了可作为候选疫苗的两个钩端螺旋体外膜蛋白，编码外膜蛋白的多核苷酸和经重组技术产生这类外膜蛋白的方法。外膜蛋白是一种有用的制备疫苗的免疫原。本发明还公开了这类蛋白及其编码序列用于制备疫苗的用途。; 郭晓奎杨宏亮朱泳璋林玮秦金红何平冯春燕赵蔚陈春燕赖卫强; 文献传递

问号钩端螺旋体融合基因Lip21-LipL32真核、原核表达系统的构建: 【目的】构建问号钩端螺旋体融合基因Lip21-LipL32真核及原核表达系统。【方法】采用连接引物通过PCR构建融合基因Lip21-LipL32,分别与相应的真核载体pVAX1及原核载体pET28b连接,真核重组质粒转染...; 冯春燕郭晓奎; 文献传递

重组钩端螺旋体病DNA疫苗pVAX1/LipL21-LipL32诱导免疫应答反应的研究(英文): 2007年; 目的选取致病性钩端螺旋体(简称钩体)中高度保守,同时是钩体外膜蛋白中含量最多的两个脂蛋白LipL32和LipL21构建成融合基因DNA疫苗pVAX1/LipL21-LipL32 ,观察在BALB/c小鼠中重组DNA疫苗诱导免疫应答反应的能力。方法采用连接引物PCR构建融合基因LipL21-LipL32 ,并将其插入真核表达载体构成重组DNA疫苗pVAX1/Li-pL21-LipL32 ,脂质体转染人胚肾细胞( HEK293细胞)后Western Blot验证重组DNA疫苗在真核细胞中的表达,并将其肌注BALB/c小鼠,用显微凝集试验( MAT)检测所产生的特异性抗体与问号钩体的凝集效价,用IL-10和TNF-β细胞因子试剂盒检测体液免疫和细胞免疫应答水平。结果 Western Blot分析显示重组DNA疫苗pVAX1/LipL21-LipL32在HEK293细胞中得到表达,小鼠动物实验结果显示重组DNA疫苗能有效地诱导机体的体液免疫和细胞免疫应答。结论成功构建钩体融合基因LipL21-LipL32重组DNA疫苗,所表达的融合蛋白能诱导特异的免疫应答反应,为进一步研究和发展新型的钩体病疫苗提供了实验基础。; 冯春燕李擎天董珂杨宏亮胡宝瑜郭晓奎; 关键词：钩端螺旋体病 LIPL21 LIPL32 DNA疫苗

解脲脲原体生物膜形成对喹诺酮类耐药能力的影响: <正>目的探讨解脲脲原体生物膜形成对喹诺酮类药物耐药性的影响。方法选用改良棋盘稀释法药物敏感性试验分析临床分离的69株解脲脲原体菌株在生物膜形成前后对喹诺酮类抗生素的药物敏感性。检测解脲脲原体的生物膜形成相关的重要功能基...; 董珂黄亚冯春燕李擎天; 文献传递

钩端螺旋体两个疫苗候选的外膜蛋白: 本发明提供了可作为候选疫苗的两个钩端螺旋体外膜蛋白，编码外膜蛋白的多核苷酸和经重组技术产生这类外膜蛋白的方法。外膜蛋白是一种有用的制备疫苗的免疫原。本发明还公开了这类蛋白及其编码序列用于制备疫苗的用途。; 郭晓奎杨宏亮朱泳璋林玮秦金红何平冯春燕赵蔚陈春燕赖卫强; 文献传递

双曲钩端螺旋体溶血素基因tlyA的克隆、表达及初步功能鉴定被引量：1: 2007年; 目的研究双曲钩端螺旋体(简称双曲钩体)是否含有溶血素基因,并鉴定其溶血活性。方法对双曲钩体LEBIa2503基因编码产物进行结构域预测、序列比对后,PCR扩增目的片断,克隆到原核表达载体pET28b(+),转化宿主细胞,并诱导表达产物进行初步功能鉴定。同时,以RT-PCR检测LEBIa2503的转录情况。另外,也对双曲钩体菌体本身有无溶血活性进行检测。结果双曲钩体LEBIa2503基因与问号钩体tlyA溶血素基因在蛋白水平上有相同的结构域,属于直系同源基因(orthologues gene)。原核表达的重组融合蛋白在羊血平板上出现β-溶血环。以RT-PCR的方法能检测到在双曲钩体中有LEBIa2503基因的转录,但双曲钩体菌体本身则检测不到溶血活性。结论未发现双曲钩体有溶血活性,但其含有溶血素基因tlyA,并且在普通培养环境下能被转录,这对进一步研究其内在机制奠定了基础,并对探索致病性问号钩体致病机制提供了一定线索。; 钟怡董珂杨杨冯春燕Picardeau M郭晓奎; 关键词：溶血素原核表达

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冯春燕