何英
- 作品数：78 被引量：389H指数：11
- 供职机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学环境科学与工程更多>>
- 我国西北地区蚊虫标本中广平病毒的检测被引量：1
- 2022年
- 目的对我国西北地区蚊虫携带病毒开展调查,并快速发现重要的蚊媒病毒。方法通过形态学方法对采集蚊虫进行分类鉴定,深度测序和宏基因组分析方法分析蚊虫携带的病毒,结合Sanger测序法补全病毒基因组全序,应用系统进化分析方法分析病毒分子遗传特征。结果2019年7月采集自陕西省的中华按蚊标本和宁夏回族自治区的三带喙库蚊标本均检测到黄病毒属广平病毒。进化分析结果显示,这两株广平病毒序列与在中国辽宁省发现的广平病毒JM17156株具有较近亲缘关系,核酸序列同源性为99.8%。结论本研究首次在我国西北地区中华按蚊、三带喙库蚊标本中检测到广平病毒。
- 李樊殷启凯胡伟军周莉薇付士红张少白张少白韩坤聂凯许晓光何英梁国栋王环宇
- 关键词：黄病毒虫媒病毒宏基因组
- 环状病毒M14 dsRNA基因组的进一步研究被引量：4
- 1990年
- M14病毒是1981年从北京郊区捕获的三带喙库蚊中分离获得。其生物学、形态学和理化特性均符合呼肠孤病毒科环状病毒的特点。聚丙烯酰胺凝胶电泳将其dsRNA基因组分离成11条区带。但最近的进一步研究发现,它是由12个片段的RNA组成。又用猴轮状病毒SA11株作为标准,测定了每个片段的分子量。 白纹伊蚊细胞C6/36纯系,由日本长畸大学热带医学研究A.Igarashi教授惠赠,并照他的方法培养传代。
- 游志勇陈涛何英王逸民
- 关键词：环状病毒基因组
- 乙型脑炎病毒TaqMan PCR检测方法的建立及初步应用被引量：25
- 2005年
- 目的利用TaqMan PCR技术,建立乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)实时荧光PCR检测方法,初步应用于蚊虫媒介的JEV监测。方法根据GenBank发表的JEV全基因组序列资料分析结果,在其NS5基因区段设计JEV特异的引物与探针;优化Mg2+浓度和引物浓度比例,并利用11株JEV和7株相关病毒株考核检测体系的保守性、特异性、灵敏性和稳定性;利用体外转录的病毒RNA和定量的病毒样品,建立相应的定量分析模型;初步应用于蚊虫媒介的监测与检测分析。结果Mg2+优化浓度为5mmolL,上下游引物浓度比例为4∶1,引物探针具有良好的保守性和特异性,灵敏度为10PFUml,稳定性分析表明,同一样品Ct值的重复检测5次,变异系数均小于5%;绘制两种标准曲线,构建了JEV基因拷贝数、病毒滴度为分析指标的定量分析模型,检测蚊虫标本结果显示,TaqMan PCR方法较病毒分离法敏感、快捷、简便。结论本研究建立了一种灵敏、特异、简便易行的JEVTaqMan PCR检测方法,为蚊虫媒介检测奠定了基础,为乙型脑炎的预防控制和脑炎相关疾病的诊断与鉴别诊断提供了一种技术手段。
- 刘卫滨付士红宋宏王环宇曹玉玺何英王俊文王力华梁国栋
- 关键词：乙型脑炎病毒TAQMANPCRPCR检测方法ENCEPHALITISMG^2+
- 盖塔病毒TaqMan RT-qPCR检测方法的建立与评价
- 2021年
- 目的建立一种灵敏且特异的实时荧光定量RT-PCR方法,用于快速检测盖塔病毒(getah virus, GETV)。方法从GenBank数据库下载GETV基因序列,使用Clustal X完成序列比对,针对高保守区段设计特异性引物和探针;以GETV核酸为标准品建立标准曲线,分别对检测反应的灵敏度、特异性和稳定性进行评价。结果本方法能特异地检测GETV,与多种虫媒病毒无交叉反应;灵敏度为1.0×10 pfu/ml,批内和批间变异系数均小于1%。从湖南、河北、福建、重庆采集的196批蚊虫中检出1批GETV阳性。结论建立了灵敏度高,特异性强的TaqMan探针实时荧光定量RT-PCR方法用于GETV筛查。
- 吴天元付士红殷启凯赵洁荣李樊何英许松涛梁国栋聂凯杨光王环宇
- 关键词：盖塔病毒TAQMAN实时荧光定量RT-PCR分子诊断
- 库蚊黄病毒在中国的分布
- 库蚊黄病毒(Culex flavivirus,CxFV)是属黄病毒科黄病毒属的蚊传虫媒病毒.CxFV能够引起C6/36细胞病变,在其他哺乳动物细胞系,如BHK、Vero均未发现细胞病变,接种乳鼠后不能引起乳鼠死亡.200...
- 梁文凯赫晓霞何英付士红王环宇
- 关键词：系统进化
- 四川省东南部地区蚊、蠓及相关虫媒病毒调查研究被引量：4
- 2018年
- 目的了解四川省的蚊、蠓以及相关虫媒病毒种类及分布。方法在自然界使用灯诱法采集吸血昆虫标本，形态学分类后分装，液氮保存备用。蚊虫、蠓虫研磨上清液接种BHK-21细胞和C6/36细胞进行病毒分离和病毒基因检测。使用BioEdit 7.0.5.3、MEGA 6.0等软件对病毒序列进行分子生物学特征分析。结果2016－2017年在四川省东南部3个县的7个自然村共采集到3属4种蚊虫17 019只，蠓虫12 700只。三带喙库蚊占蚊虫采集总数的79.4%（13 519/17 019），其次为骚扰阿蚊（11.1%，1 897/17 019），致倦库蚊占采集蚊虫标本总数的5.5%（930/17 019）；中华按蚊最少（4.0%，673/17 019）。蚊虫标本接种组织细胞后，在合江县采集的三带喙库蚊标本获得3株可以稳定传代的病毒分离株，经分子生物学实验鉴定为基因Ⅰ型流行性乙型脑炎（乙脑）病毒，在合江县采集的7批蚊虫中检测到乙脑病毒基因阳性。蠓虫标本接种细胞后未获得病毒分离物，在合江县采集的4批蠓虫标本经分子生物学检测，显示阿卡斑病毒基因阳性。结论三带喙库蚊是四川省东南部3县的优势蚊种，四川省东南部存在经蚊虫传播的乙脑病毒及以蠓虫为媒介的阿卡斑病毒。
- 宋颂付士红周兴余张佳珂李伟刘丽珺李劲松汪健林于李晓龙何英雷雯雯王环宇王斌鲁晓睛梁国栋
- 关键词：流行性乙型脑炎病毒
- 新疆南部地区2012年西尼罗病毒感染的检测与监测被引量：4
- 2019年
- 目的了解在新疆南部地区西尼罗病毒(west nile virus, WNV)感染的情况。方法于2012年在新疆南部地区采集发热患者和鸡血清标本,通过酶联免疫吸附试验(enzyme-linkedimmunosorbent assay, ELISA)及中和试验检测标本中西尼罗病毒特异性抗体。结果在新疆南部地区8个县共采集到门诊和住院患者1712份血清标本,其中WNV IgM抗体阳性和WNV中和抗体阳性标本分别为22份和48份,这其中迦师县标本中WNV IgM抗体和中和抗体阳性标本分别为21份和42份;在新疆南部4个县采集的383份鸡血清标本中仅在迦师县采集的鸡血清标本中检测到28份标本为WNV中和抗体阳性,其余县采集的鸡血清均为阴性。结论新疆南部地区2012年存在人群和家养鸡的WNV感染,迦师县是该病毒感染的主要地区。
- 付士红曹蕾吕志何英雷雯雯李樊王环宇梁国栋
- 关键词：西尼罗病毒
- 中华按蚊分离的版纳病毒全基因组序列测定与分子遗传进化分析被引量：3
- 2018年
- 目的对分离自中华按蚊的版纳病毒进行病毒全基因组核苷酸序列测定和分子遗传学分析。方法使用分子病毒学方法测定病毒全基因组12节段核苷酸序列,以生物信息学软件进行序列比对、同源性和分子遗传进化分析。结果 2012年从云南省中缅边境地区中华按蚊分离的版纳病毒(YN12234病毒株)能在C6/36细胞引起细胞病变并稳定传代,该病毒为12节段RNA病毒。根据病毒VP1蛋白(RdRp)氨基酸序列进行的分子遗传进化分析发现,YN12234病毒属于呼肠孤病毒科东南亚12节段RNA病毒属版纳病毒。对第12节段基因序列的进一步分析显示,YN12234病毒属于A2基因型版纳病毒。系统进化分析结果还显示,从中华按蚊分离的版纳病毒与此前从中华按蚊分离的版纳病毒处在不同进化分支,且不同蚊虫分离的版纳病毒并非聚类在共同的进化分支。结论从中华按蚊分离的YN12234病毒株属于含有12节段的版纳病毒,分子进化分析结果提示包括云南省分离的YN12234病毒在内的目前国内外从蚊虫分离的版纳病毒并不存在病毒与蚊虫种类之间的媒介适应性。
- 程睿付士红范娜何英雷雯雯王环宇王斌鲁晓晴梁国栋
- 关键词：版纳病毒中华按蚊
- 两种基因型流行性乙型脑炎病毒在上海市共同流行被引量：3
- 2012年
- 目的掌握上海市流行性乙型脑炎(乙脑)病毒基因型别特征。方法 2002-2005年在上海市奉贤县养猪场采集蚊虫标本,研磨处理后分离病毒,完成病毒细胞学、动物学、血清学及分子生物学鉴定。测定病毒全基因组序列,应用ATGC、ClustalX(1.83)、MegAlign、GeneDoc3.2和Mega5.0等生物学软件完成序列拼接、比对、核苷酸与氨基酸同源性分析、系统进化分析。结果共采集38347只蚊虫标本,主要是三带喙库蚊。分离到13株乙脑病毒。测定13株乙脑病毒全基因组序列,结合上海市其他年份分离的乙脑病毒及涵盖5个基因型别的其他乙脑病毒全基因组序列,通过系统进化分析发现,上海市2001、2003、2005和2007年分离的乙脑病毒属于基因Ⅰ型,2004年和2006年分离的乙脑病毒属于基因Ⅲ型。结论 2种基因型别乙脑病毒(Ⅰ、Ⅲ型)在上海市共同流行。
- 王环宇付士红何英闵继光潘晓玲梁国栋
- 关键词：流行性乙型脑炎病毒基因型系统进化分析
- Colti病毒抗原制备、保存及其在检测患者血清Colti病毒抗体中的应用被引量：11
- 2002年
- 目的 获得较高滴度和稳定的Colti病毒抗原 ,进一步开展Colti病毒感染的血清学诊断。方法 用C6 36细胞培养Colti病毒 ,于不同时间收获后进行病毒滴度测定。病毒经聚乙二醇(PEG)纯化浓缩后抗原分别保存于 - 2 0℃和 4℃备用。利用该抗原采用ELISA法检测患者血清标本的Colti病毒抗体。结果 在制备Colti病毒抗原时 ,以细胞培养 3～ 4周的病毒滴度最高 ,经PEG纯化浓缩的抗原于 - 2 0℃和 4℃条件下 ,保存 6个月 ,其抗原滴度仍保持在较高水平。特别是加入甘油的抗原无论在 - 30℃ ,还是在 4℃下 ,甚至可保存 2年。用这些抗原 ,检测疑似乙型脑炎或病毒性脑炎患者标本 114 1份 ,Colti病毒IgM抗体阳性 130例 ,阳性率为 11.4 % (130 114 1) ,特别是检测广州市儿童医院患者标本 4 1份 ,9份Colti病毒抗体阳性 ,阳性率为 2 2 .0 % ,其中 5例临床诊断为病毒性脑炎。结论 为建立检测Colti病毒抗体及诊断试剂盒提供了较稳定的抗原 ,Colti病毒可能是引起我国夏、秋季脑炎的又一重要病原。
- 陶三菊王焕琴曹玉玺杨冬荣刘琴芝徐丽宏何英陈伯权
- 关键词：COLTI病毒抗原血清学诊断
