何晶晶
- 作品数：5 被引量：12H指数：3
- 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院动物脂肪沉积与肌肉发育实验室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家生猪现代产业技术体系建设项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 过表达miR-191抑制猪ADSCs向脂肪细胞分化被引量：3
- 2013年
- 在脂肪组织发育过程中存在许多差异表达的microRNAs(miRNAs),而miR-191是从实验室前期Solexa测序结果中筛选出的差异表达miRNAs之一.本研究对不同物种miR-191的成熟及前体序列进行同源性分析,并检测其在猪不同发育阶段各组织中的表达情况,发现miR-191的成熟及前体序列在不同物种间都非常保守,通过real-time qPCR检测发现,miR-191在猪脂肪组织不同发育阶段呈高丰度差异表达,其与Solexa测序结果一致.为了更好地研究miR-191在脂肪细胞分化过程中的功能,通过基因克隆的方法,利用Ad-Easy体系,构建过表达miR-191的腺病毒载体,转染293A细胞,成功包装出重组miR-191腺病毒并能高效侵染猪脂肪基质细胞(adipose derived stromal cells,ADSCs).通过real-time qPCR检测表明,感染重组miR-191腺病毒后的ADSCs能大量表达miR-191;油红O染色可以观察到,过表达miR-191的猪ADSCs在诱导分化后与对照组相比,脂滴明显减少.进一步研究发现,miR-191过表达的猪ADSCs中,SREBP-1C(sterol regulatory element binding protein-1C)和LPL(lipoprotein lipase)的mRNA水平显著降低,脂解关键基因HSL(hormonesensitive lipase)和ATGL(adipose triglyceride lipase)mRNA水平显著升高.同时,Western印迹结果显示,过表达miR-191的猪ADSCs在诱导分化过程中,PPARγ(peroxisome proliferator-activated receptorγ)、C/EBPα(CCAAT/enhancer binding proteinα)和A-FABP(adipocyte fatty acid binding protein)的蛋白表达水平显著下调.实验表明,过表达miR-191抑制了猪ADSCs的分化过程.这为深入研究miR-191在猪ADSCs分化过程中的调控机制奠定基础.
- 刘帅仇杨董培越何晶晶程佳米琳杨公社
- 关键词：重组腺病毒
- Errα通过抑制β-Catenin促进猪前体脂肪细胞成脂分化(英文)
- 2012年
- 雌激素相关受体α(Errα)和Wnt/β-Catenin信号通路都能够调控成脂分化.研究表明Errα和wnt/β-Catenin信号通路之间存在互作,β-联蛋白(β-Catenin)是Wnt/β-Catenin信号通路的关键因子.为了研究Errα和β-Catenin在脂肪生成中的相互作用,在293A细胞中包装得到Errα腺病毒并侵染猪前体脂肪细胞.LiCl和XCT790被用于不同处理的猪前体脂肪细胞.蛋白质印迹实验发现,在成脂分化过程中,Errα表达升高,β-Catenin表达降低.显微观察绿色荧光发现,Errα腺病毒能够侵染猪前体脂肪细胞.蛋白质印迹实验显示,在猪前体脂肪细胞中,Errα腺病毒促进Errα表达,XCT790抑制Errα表达.油红O染色结果表明,β-Catenin抑制成脂分化,而Errα通过抑制β-Catenin促进成脂分化.进一步的蛋白质印迹实验表明,在猪前体脂肪细胞成脂分化过程中,LiCl能够稳定β-Catenin表达,Errα抑制β-Catenin表达.这些发现提示,Errα通过抑制β-Catenin表达来促进成脂分化.
- 牛晨光何晶晶鞠大鹏纪洪雷杨公社
- 关键词：猪前体脂肪细胞成脂分化
- 雌激素受体关联受体α调节脂肪细胞甘油三酯分解被引量：5
- 2011年
- 雌激素受体关联受体α(Estrogen-related receptorα,ERRα)是调控机体能量代谢的关键转录调控因子,也是脂肪生成的关键调控者。为研究ERRα对脂肪细胞甘油三酯分解的影响及其分子机制,分化的猪脂肪细胞在PKA(Proteinkinase A)或/和ERK(Extracellular signal-related kinase)抑制剂预处理和不处理的情况下,再用Ad-ERRα侵染或XCT790处理48 h。通过测定脂肪细胞中甘油三酯浓度和培养液中的甘油释放量分析脂肪细胞的脂解变化;Western blotting方法检测PPARγ(Peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)、perilipin A、p-perilipin A、HSL(Hormone sensitivelipase,HSL)和ATGL(Adipose triglyceride lipase,ATGL)蛋白表达。结果显示,ERRα显著促进猪脂肪细胞分化及甘油三酯积累,同时促进了甘油三酯水解;分别及同时阻断PKA和ERK通路并不影响ERRα对脂肪细胞甘油释放的促进作用;ERRα显著上调HSL、ATGL、PPARγ及perilipin A蛋白表达,但p-perilipin A水平并未发生变化。推测过量表达ERRα可能导致HSL和ATGL蛋白表达上调并促进甘油三酯水解,从而为脂肪细胞分化提供更多的游离脂肪酸(Free fat acid,FFA)作为甘油三酯合成周转的底物。
- 鞠大鹏何晶晶郑雪莉赵丽丽杨公社
- 关键词：脂肪细胞
- 猪雌激素受体关联受体α基因的克隆、表达及其对脂肪细胞脂质聚集的影响被引量：2
- 2009年
- 雌激素受体关联受体α(Estrogen-related receptor α,ERRα)是调控机体能量代谢的关键转录调控因子,其在白色脂肪组织中的作用尚不清楚。本研究旨在通过touch down-PCR方法克隆猪ERRα基因的ORF序列;通过Western blotting和细胞免疫荧光染色法分析其在猪各组织及成熟脂肪细胞中的表达模式;利用ERRα特异性抑制剂XCT790处理原代培养的猪成熟脂肪细胞,探讨其对成熟脂肪细胞甘油三酯聚集的影响。结果显示,所克隆的猪ERRα基因ORF序列长1269bp(GenBank Accession No.FJ446485,尚未公布),编码422个氨基酸,其核苷酸和氨基酸序列与其他物种高度同源;ERRα蛋白高表达于猪白色脂肪组织(White adipose tissue,WAT)、肾脏以及心脏中,在脾脏中表达量较低;细胞免疫荧光化学染色显示,ERRα蛋白广泛分布于脂肪细胞的细胞核和胞浆中;XCT790在10μmol/L浓度时显著抑制了ERRα蛋白的表达和成熟脂肪细胞中甘油三酯的聚集。本研究将为有效调控体脂沉积提供新的靶点和理论参考。
- 鞠大鹏何晶晶郑雪莉杨公社
- 关键词：基因克隆白色脂肪组织
