任改新
- 作品数:38 被引量:136H指数:6
- 供职机构:南开大学生命科学学院微生物学系更多>>
- 发文基金:天津市自然科学基金国家科技攻关计划“九五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学化学工程医药卫生更多>>
- B.t.c. cry1C全长基因的克隆及其在增产菌中的表达被引量:2
- 2004年
- 设计的一对引物 ,对苏云金芽孢杆菌科默尔亚种 (Bacillusthuringiensissubsp .colmeri)1 5A3菌株中的cry1C基因进行PCR扩增 ,得到包括结构基因 ,调节基因在内的全长为4 0kb的PCR产物。经两步克隆 ,将此基因连接至穿梭表达载体pHT31 5上 ,得到重组质粒pHT 1C。通过电转化将其导入一株增产菌蜡状芽孢杆菌 (Bacilluscereus) 95 0 9菌株 ,SDS PAGE检测到 1条 60kD左右的蛋白带 ,镜检观察到菱形晶体 ,生测结果表明 ,cry1C基因的导入使Bc95 0 9菌株获得了对甜菜夜蛾的杀虫活性。
- 陈月华李红秀王津红蔡峻任改新
- 关键词:增产菌杀虫活性
- 球形芽孢杆菌 TS-1灭蚊毒蛋白的酶联免疫吸附测定被引量:1
- 1990年
- 通过Sephadex G-200柱层析纯化得到球形芽孢杆菌Ts-1毒蛋白,其中主要是42kDa和43kDa两种毒蛋白。用此毒蛋白免疫家兔获得抗血清。利用 ELISA 双抗体夹心法比较测定了三种灭蚊球形芽孢杆菌(Bacillus sphaericus)高毒株和两种无毒株,证明 ELISA 具有很强的特异性。ELISA 测定球形芽孢杆菌 Ts-1纯化毒蛋白,最低可检值为1.56×10-5mg/ml。球形芽孢杆菌 Ts-1发酵液的最低可检度为1:16000倍稀释。ELISA 测定12和24小时发酵培养的 Ts-1样品处理液中毒蛋白的含量,分别为0.049mg/ml 和o.22mg/ml,毒蛋白含量相差4.59倍。而相应的生物测定 LC50值分别为0.71 ppm 和0.154 ppm,毒力相差4.61倍。ELISA 与生物测定方法结果吻合。
- 王健任改新尚克进
- 关键词:球形芽孢杆菌毒蛋白ELISA
- 球形芽孢杆菌对七种蚊虫的毒力测定
- 任改新
- 关键词:毒力测定
- 中国苏云金芽孢杆菌的分布与cry基因的多样性被引量:23
- 2001年
- 采集全中国 2 7个省、自治区及 4个直辖市昆虫孳生地粉尘、土壤等样品 1 0 80份 ,在其中的40 6份中分离到苏云金芽孢杆菌 965株。镜检可观察到大菱形、小菱形、方形、长方形、圆形、椭圆形、镶嵌形和不规则形等 8种主要形态的伴孢晶体 ;采用cryⅠ、cryⅡ、cryⅢ、cryⅣ和cryⅤ基因的通用引物对 2 2 1株Bt分离株进行的PCR检测结果表明 :各类基因的含量依次为cryⅠ >cryⅡ >cryⅤ>cryⅢ基因 ,分别占被检菌株的 75 6%、 67 9%、 58 4%和 1 4 5% ,没有检测到cryⅣ基因 ,共得到1 0种基因组合类型。对其中含有cryⅠ基因的菌株分别以cryIAc、cryIC和cryIE基因的特异性引物进行PCR检测 ,得到 2 0株同时含有cryIAc、cryIC、cryⅡ和cryⅤ优良基因组合的Bt分离株 ,其中菌株Bt 1 5A3对棉铃虫、甜菜夜蛾及小菜蛾均表现出高毒力 ,具有生产开发潜力。
- 王津红吴卫辉陈月华任改新
- 关键词:苏云金芽孢杆菌PCRCRY基因多样性
- 应用苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis Berliaer)防治马尾松毛虫(Dendrolimus punctatus Walk)试验
- 从1960年起到1961年止在湖南及福建地区进行了应用苏云金杆菌防治属尾松毛虫的试验,试验得出了以下的结论。试验的方法与一般药剂试验同,将喷射菌液或菌粉的幼虫和针叶放入铁纱笼中,挂于林周喷菌的松树上,或有时放于试验室内(...
- 孙錫麟任改新李运帷王志賢
- 文献传递
- 韭蛆病原菌Bt TN-189cyt基因的克隆及工程菌株的构建
- 以Genebank中收录的来自Bacillus thuringensis subsp.israelensis(Bti)的cytA基因序列为依据,设计了特异性的引物:cytA1和cytA2,对从四川成都分离的韭蛆病原菌Bt...
- 李毓冰刘春勇陈月华任改新
- 关键词:克隆工程菌株
- 文献传递
- 苏云金杆菌肯尼亚变种防治枣尺蠖研究初报被引量:3
- 1996年
- 1992~1995年,我们开展了苏云金杆菌肯尼亚变种防治枣尺蠖研究,通过室内药效测定、田间药效试验和大面示范,结果表明,使用苏云金杆菌肯尼亚变种乳剂300倍或其粉剂500倍,药效分别为90~100%和95~100%。
- 苗春生潘河山任改新梁风来赵刚
- 关键词:苏云金杆菌枣尺蠖微生物农药杀虫剂枣树
- 苏芸金杆菌防除粘虫的研究增效途径及血细胞的病态变化
- 近年来,各国对苏芸金杆菌的研究,已证实其对鳞翅目幼虫一般地具有较高的杀伤力,但通过资料的综合和试验结果的分析,也看出对某些鳞翅目幼虫的毒效不够理想,以国内大害虫之一的粘虫论,只有在使用相当高的浓度时方能奏效。根据加入辅助...
- 刘崇乐任改新傅貽玲
- 文献传递
- 球形芽孢杆菌Ts-1毒蛋白的分离纯化被引量:3
- 1990年
- 球形芽孢杆菌 Ts-1对蚊虫幼虫有高效杀灭能力,其有毒成份为一种蛋白质。纯芽孢-晶体复合物经超声波处理后,以0.05mol/L 的 NaOH 抽提毒素,经 Sephadex G-200葡聚糖凝胶柱层析纯化,用 SDS-PAGE 检验柱层析得到的杀虫活性部分,Ts-1的芽孢-晶体复合物中主要为42kD 和43kD 的两种蛋白质。经聚丙烯酰胺凝胶制备电泳分离纯化,生物活性测定表明这两种蛋白质都有杀蚊毒效,经 DEAE 纤维素柱层析进一步纯化,获得了分子量为42kD的毒蛋白。
- 于自然尚克进马明王健牛瑞芳任改新
- 关键词:球形芽孢杆菌
- 苏芸金芽孢杆菌与蜡状芽孢杆菌基因组DNA同源性及多态性的研究被引量:8
- 1999年
- 用RAPD-PCR扩增到61个标准株、生产用菌株及24个蜡状芽孢杆菌参比菌株的全DNA指纹图,通过计算多态性扩增片段的大小,利用NTSYS软件进行聚类分析,蜡状芽孢杆菌菌株并未形成独立于苏芸金芽孢杆菌的聚群,这是此近缘种DNA分子水平高度同源的新证据.61个苏芸金芽孢杆菌的聚类结果表明:其DNA指纹图与H-血清型有一定相关性.与引物0955-03相比,引物0940-12对苏芸金芽孢杆菌不同亚种及蜡状芽孢杆菌菌株具有更高的鉴别价值,大多数特异株DNA全指纹图有菌株特异性。
- 刘春勇张文成任改新
- 关键词:苏芸金芽孢杆菌蜡状芽孢杆菌多态基因组