乔红伟
- 作品数：47 被引量：180H指数：7
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学理学更多>>
- 我国实验动物微生物、寄生虫检测标准与国外检测情况的比较
- 实验动物微生物、寄生虫检测标准,是实验动物质量检测的重要指标。是科研及研究的重要保障之一。我国《实验动物微生物、寄生虫检测标准》作为国家强制性法律、法规颁布以来,对我们国家实验动物大、小鼠的质量保证起到了至关重要的作用。...
- 乔红伟魏强
- 关键词：实验动物
- 文献传递
- 牛蛙(Rana catesbeiana)皮肤cDNA文库的构建与鉴定被引量：3
- 2008年
- 以牛蛙皮肤组织为材料获得总RNA,用偶联Oligo（dT）的磁珠纯化mRNA后,利用含SfiⅠ酶切位点的CDSⅢ引物在逆转录酶的作用下合成cDNA的第1链,以含SfiⅠ酶切位点的CDSⅢ引物和SMART引物,利用LD-PCR合成双链cDNA,双链cDNA经SfiⅠ酶切,通过T4DNA连接酶连接到经过相同酶切的λTripIEx2载体,体外包装后转染E.coliXLI-Blue宿主菌,进行滴度测试和文库扩增。结果构建的牛蛙皮肤cDNA文库原始库容量为1.42×10^6PFU/mL,插入片段长度在0.5～1.5kb,重组率为89.5%,扩增后的文库滴度为1.35×10^9PFU/mL,构建的文库质量符合要求,可用于大规模的功能基因分析。
- 赵瑞利韩俊友李莲瑞乔红伟雷连成胡博谢芳刘丽凡韩文瑜
- 关键词：CDNA文库牛蛙抗菌肽
- 猪霍乱沙门菌疫苗株介导的猪瘟基因疫苗及实验免疫研究
- 以减毒胞内寄生菌作重组质粒的载体，已成为DNA疫苗的第三种免疫接种方式，为DNA疫苗的研制开辟了更新、更广阔的应用前景。 猪霍乱沙门菌弱毒株是预防仔猪副伤寒的高效、安全的疫苗株。用其作载体，将含猪瘟病...
- 乔红伟
- 关键词：猪瘟病毒免疫保护试验
- 文献传递
- 小鼠脑脊髓炎病毒标准血清制备及间接ELISA检测方法的应用被引量：1
- 2009年
- 目的制备小鼠脑脊髓炎病毒（TMEV）标准血清，建立ELISA检测方法，实现一种病毒多种检测方法的比对研究。方法用TMEV感染3周龄SPF级BALB／c小鼠，制备免疫用抗原。分别在0、7、14d以腹腔注射的方式免疫SPF级6-8周龄BALB／c小鼠，免疫血清用IFA、IEA法进行鉴定；TMEV感染BHK-21细胞，制备EHSA抗原，确定酶结合物、抗原和标准阳性血清的最佳工作浓度，建立TMEVEHSA检测方法，进行敏感性、特异性、重复性和稳定性实验。结果制备TMEV免疫血清，以IFA、IEA测定血清效价分别为1：640和1：320，与痘苗病毒、小鼠肺炎病毒、小鼠肝炎病毒、仙台病毒和呼肠孤病毒-Ⅲ型均无交叉反应；建立了ELISA检测方法，确立了各种试剂的最佳工作浓度，其中酶结合物最佳工作浓度为1：10000，抗原为2.5μg／mL，阳性参考血清为1：200；EHSA检测灵敏度为1：3200。板内特异抗原、正常抗原平均变异系数为4.67％和5.7％，板间为4.39％和7.61％。稳定性实验相对偏差均小于20％。结论本研究制备的TMEV免疫血清可作为血清学检测方法中的标准质控血清；建立的ELISA方法重复性、稳定性好，敏感性和特异性强，可用于小鼠脑脊髓炎病毒血清抗体检测。
- 谢军芳佟巍侯丽波乔红伟丛喆王卫蒋虹魏强
- 关键词：标准血清ELISA
- 新疆部分地区牛结核病PPD监测与分析被引量：6
- 2006年
- 2001年-2003年对新疆部分地区(巴州、阿克苏、博州、伊犁、昌吉、塔城和石河子)牛结核病用“提纯结核菌素皮内变态反应”进行调查,调查数据用SPSS软件统计建立模型,显示2001年-2003年七地州检测牛只分别为16 793,21 153头和43 951头,阳性率分别为0.46%,0.33%和0.57%。其中,巴州地区阳性率明显偏高。昌吉和石河子地区2001年-2002年保持一个较低的水平,2003年牛结核病的阳性率较前两年升高了1%。
- 李舵盛卓君刘进彭小玲乔红伟陈德坤
- 关键词：牛结核病
- 淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒在实验大鼠中的感染状况被引量：6
- 2010年
- 目的对实验室留存的大鼠血清样本进行淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)抗体检测,调查LCMV在我国实验大鼠中的感染情况。方法依据现行国家标准中规定的免疫荧光试验(IFA)方法对我实验室保存的172份大鼠血清样本(包括48份无级别、100份清洁级和24份SPF级大鼠血清样本)进行LCMV抗体检测。结果无级别大鼠血清样本(n=48)15份阳性,阳性率为33.25%,强阳性样本滴度可达1∶1280;SPF级及清洁级大鼠血清样本全部阴性。结论大鼠可以感染LCMV,实验动物等级标准应增加对大鼠LCMV的检测。
- 佟巍乔红伟魏强张丽芳代小伟刘先菊王艳荣刘云波
- SHIV-KB9感染猴病毒组织分布研究
- 目的研究当SHIV艾滋病恒河猴模型的血浆病毒载量处于低水平或阴性时,SHIV在宿主组织中的分布情况。方法 SHIV-KB9感染恒河猴2只,定期检测其血浆载量,选取感染18个月后病毒载量为很低水平和阴性时,经安死术后取淋巴...
- 侯俊乔红伟丛喆王卫刘秀英佟巍蒋虹涂新明魏强
- 关键词：病毒载量
- 文献传递
- 牛蛙(Rana catesbeiana)蛙皮抗菌肽基因的克隆、测序及其表达被引量：12
- 2007年
- 利用RT-PCR的方法从牛蛙皮肤组织中克隆到大小为270bp的片段RCABP,将其克隆到pGEM-T载体,测序获得1个新的碱基序列。将此基因克隆到原核表达载体pQE-80L,获得融合表达质粒pQE-80L/DHFR/ABP,在1%IPTG诱导下进行表达。SDS-PAGE检测表明,重组蛙皮抗菌肽蛋白的表达量占菌体总蛋白的24%,以包涵体形式存在。体外抑菌试验表明,所构建的质粒能在大肠杆菌中表达具有体外抑菌活性的蛙皮抗菌肽,该融合蛋白具有良好的应用前景。
- 韩俊友乔红伟赵瑞利胡博谢芳王金玲郑伟雷连成韩文瑜
- 关键词：牛蛙基因表达
- 牛蛙两个新Temporins基因的克隆及其抗菌机制的研究(英文)被引量：7
- 2009年
- Temporins是从蛙属中得到的一类羧基端酰胺化的疏水性抗菌肽,具有抗细菌、霉菌、酵母菌、原虫及病毒活性.为了研究牛蛙皮肤抗菌肽的多样性及其结构特点,根据GenBank数据库中蛙属抗菌肽基因信号肽序列设计简并引物,从牛蛙皮肤cDNA文库中克隆到两个新的temporins家族抗菌肽,命名为temporin-La(LLRHVVKILEKYLamide)和temporin-Lb(LFRHVVKIFEKYLamide).合成的temporin-La和temporin-Lb肽具有很强的抗菌活性,尤其是对革兰氏阳性细菌.溶血性测定结果表明,temporin-La浓度高至250mg/L时对兔红细胞仍无溶血活性,而temporin-Lb具有较弱的溶血活性(半数致死浓度LC50≈230μmol/L).通过透射电镜观察temporin-La和temporin-Lb处理过的金黄色葡萄球菌的细胞结构,发现它们都能直接地杀死细菌,但作用机制不一样.
- 赵瑞利韩俊友韩文瑜雷连成孙长江冯新江丽娜乔红伟蔡林君
- 关键词：抗菌肽牛蛙透射电镜
- ELISPOT方法检测SIVmac239感染猴特异性细胞免疫水平被引量：5
- 2008年
- 目的为了完善现有的SIV/恒河猴模型,掌握恒河猴被SIV感染后体内细胞免疫应答状态,为评价HIV疫苗提供方法和数据上的参考,我们测定了SIV感染猴体内病毒特异性的细胞免疫水平。方法实验前选出4只无SIV、STLV、SRV/D和B病毒感染的恒河猴,用SIVmac239病毒液静脉感染实验猴,使用RT-PCR、流氏细胞术和ELISPOT等方法,监测SIVmac239病毒在恒河猴体内复制情况、感染猴的外周免疫损伤情况和细胞免疫情况,持续测定一年。结果实验结果显示IFN-γELISPOT方法能有效的评估实验猴的细胞免疫情况,IFN-γELISPOT结果和CD4+T细胞数无相关性,与血浆病毒载量稍有相关。结论本实验明确了SIVmac239感染中国恒河猴体内CTL的基本趋势和范围,了解了外周血病毒载量、外周免疫损伤与细胞免疫状况之间的联系,完善了SIV/SAIDS模型评价指标,为使用此模型评价抗病毒药物或疫苗提供了基础条件。
- 王卫冯育芳许琰丛喆佟巍蒋虹乔红伟涂新明魏强
- 关键词：SIVIFN-Γ细胞免疫
