万敏
- 作品数:4 被引量:8H指数:2
- 供职机构:西北农林科技大学动物医学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- TSA处理供体细胞对组蛋白乙酰化和核重编程效果的影响被引量:6
- 2009年
- 克隆胚胎基因组的不完全重编程是克隆动物成功率低的主要原因。试验中以第5代牛胎儿成纤维细胞作为供体核,以牛卵母细胞作为受体胞质进行体细胞核移植,用75 nmol.L-1曲古抑菌素A(Trichostatin A,TSA)分别处理供体细胞6、12和24 h,通过核移植检测克隆胚胎发育率,并应用激光共聚焦显微镜技术和流式细胞术检测处理细胞和克隆囊胚组蛋白H3K18乙酰化水平和细胞周期。结果显示:随着TSA处理时间的延长,供体细胞组蛋白H3K18乙酰化水平不断提高;以75 nmol.L-1TSA处理供体细胞12 h的克隆胚的囊胚发育率显著高于未处理组(23.5%vs 15.7%,P<0.05);供体细胞经TSA处理的克隆囊胚组蛋白H3K18乙酰化水平与未处理组相比差异不显著(P>0.5);处理组和对照组细胞G0/G1期和S期比例间存在显著差异(P<0.05)。结论:TSA对核供体细胞的处理存在时间效应,75 nmol.L-1TSA处理12 h的牛胎儿成纤维细胞更易被卵母细胞重编程,显著提高了克隆胚的体外发育能力,初步证实TSA是通过提高供体细胞组蛋白乙酰化水平来促进供体细胞重编程的。
- 张东杨鹭王勇胜刘根胜刘利杰万敏张涌
- 关键词:核移植曲古抑菌素A重编程
- WOW培养法的研究被引量:2
- 2008年
- WOW培养法是目前培养胚胎的重要方法之一,在去透明带胚胎的培养上尤为重要。将拣卵针烧制成圆球状,在四孔板底烫制WOW,将不同时间去除透明带的牛孤雌激活胚培养于WOW中。结果显示:各组的卵裂率(78.9%、81.1%和78.9%)与对照组无显著差异(P>0.05);移入6-DMAP中之前去除组的囊胚率(31.5%)与移入培养液中之前去除组(32.4%)无显著差异(P>0.05),而且分别与对照组无差异显著(P>0.05);移入离子霉素中之前去除组未得到囊胚。移入6-DMAP中之前去除组囊胚细胞数(113.8±10.1)与移入培养液中之前去除组囊胚细胞数(112.5±8.1)和对照组均无显著差异(P>0.05)。分别5枚、15枚和30枚为一组进行培养,对胚胎的后续发育无显著影响。
- 马夜肥王勇胜万敏尹宝英华松张涌
- 关键词:孤雌激活
- 手工核移植技术在牛体细胞克隆中的应用研究
- 本试验以牛卵母细胞为实验材料,对脱羰秋水仙碱辅助牛卵母细胞去核的相关条件进行优化。在此基础之上进行了牛手工核移植(又称手工克隆)技术的相关工作,尝试无透明带核移植方法,WOWs培养体系等。目的在于建立适合本试验室条件的手...
- 万敏
- 关键词:体细胞克隆牛卵母细胞核移植重构胚囊胚发育率
- 文献传递