湖南师范大学医学院生物化学与分子生物学教研室
- 作品数：10 被引量：29H指数：3
- 相关作者：焦京更多>>
- 相关机构：中南大学湘雅医学院中南大学湘雅医学院肿瘤研究所中南大学湘雅医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省学位与研究生教育教学改革研究项目湖南省教育厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 人NPCEDRG基因启动子的克隆及CCAAT/NFY结合位点初步分析被引量：12
- 2011年
- NPCEDRG基因是采用基因定位候选克隆策略获得的一个鼻咽癌候选抑瘤基因.NPCEDRG在鼻咽癌细胞和组织中表达下调,重新恢复NPCEDRG基因在CNE2细胞系的表达,可部分逆转CNE2的恶性表型.为揭示NPCEDRG基因在鼻咽癌细胞和组织中表达下调的分子机制,联合应用生物信息学和报告基因载体系统分析方法对NPCEDRG基因启动子区进行克隆及功能分析,系统发育进化足迹分析结果表明,NPCEDRG基因5′端调控区-180～+235 bp区间在脊椎动物中高度保守,该保守区域中存在包括CCAAT/NFY、STAT1和SP1等转录因子结合位点.构建Luc和/或EGFP报告基因表达载体并检测其启动子活性,-146～-8 bp区域有较强的启动子活性,电泳迁移阻滞分析实验(EMSA)提示,CCAAT/NFY转录因子结合位点是NPCEDRG基因的转录调控元件.因此,研究确定-146～-8 bp区域是NPCEDRG基因核心启动子区域且启动子核心元件CCAAT/NFY可能参与NPCEDRG基因的转录调控.
- 侯德富关勇军关瑞欧阳咏梅余艳辉陈主初
- 关键词：核心启动子转录调控
- 医学研究生分子生物学课程模块化教学改革探索被引量：2
- 2023年
- 文章在阐述相关背景的基础上,首先从优化教学内容、创新教学模式、改革考核方式三个方面提出了医学研究生分子生物学课程模块化教学改革路径,然后对医学研究生分子生物学课程模块化教学改革进行了反思。
- 袁仕善张慧慧石艳
- 关键词：模块化教学医学研究生
- Tet调控CYP2E1基因表达细胞系的代谢能力分析被引量：1
- 2009年
- 应用Tet-On基因表达系统,调控CYP2E1基因在NIH3T3细胞中的表达水平,探讨CYP2E1在化学致癌物二甲基亚硝胺(N-nitrosodimethylamine,NDMA)代谢中的作用.先后将Tet-on基因表达系统的调控质粒pRevTet-on和反应质粒pRevTRE-2E1转染NIH3T3细胞,分别用G418和潮霉素筛选,并通过RT-PCR和Western印迹检测,成功获得了3个具有良好诱导性Tet调控的CYP2E1基因表达细胞系(Tet/3T3-2E1).应用不同浓度强力霉素(doxycycline,Dox)处理Tet/3T3-2E1细胞诱导CYP2E1表达,HPLC分析细胞对CYP2E1特异性药物探针氯唑沙腙的原位代谢能力及MTT法分析CYP2E1介导的NDMA细胞毒性作用.结果显示,Tet/3T3-2E1细胞CYP2E1的表达及其代谢能力有明显的Dox浓度依赖性,而且NDMA对Dox诱导组细胞有明显浓度依赖性细胞毒性作用,其IC50值为12.06μmol/L,无Dox诱导组未见明显的NDMA细胞毒性作用.该细胞模型的成功建立对于开展与CYP2E1相关的毒物、致癌物代谢研究,筛选抗毒物、抗癌物等具有重要价值.
- 侯德富万恂恂贺智敏陈主初
- 关键词：CYP二甲基亚硝胺强力霉素
- LBL与TBL整合教学法在研究生分子生物学教学中的应用被引量：5
- 2017年
- 分子生物学在精准医学中占有重要的地位。本文探讨LBL与TBL整合教学法在医学研究生分子生物学教学中的应用,发现LBL与TBL整合教学增强学生自主学习的能力,培养学生的团队意识、探究意识和创新思维,加深对知识的理解,并可活跃课堂的学习氛围。这为研究生教育教学提供了有益的参考。
- 袁仕善刘宁侯德富
- 关键词：分子生物学LBLTBL教学模式
- 循序渐进重塑双语教学——湖南师大药学分子生物学双语教学探索被引量：1
- 2017年
- 专业课程的双语教学是高等学校培养高素质人才,为学生走上科研道路做好基础铺垫的重要途径。然而面对双语教学课堂暴露出的一些问题,要把握好预习-听讲-探讨-发言-写作-评价-反馈各个环节,才能让教与学整个体系良性运转,教师和学生都在此过程中得到提高。
- 刘宁袁仕善侯德富
- 关键词：双语教学教学模式教学效果
- 鼻咽癌细胞系CNE2中NPCEDRG基因mRNA剪接变异体分析被引量：2
- 2011年
- NPCEDRG基因是采用基因定位候选克隆策略获得的1个鼻咽癌候选抑瘤基因.NPCEDRG在鼻咽癌细胞和组织中表达下调,重新恢复NPCEDRG基因在CNE2细胞系的表达,可部分逆转CNE2的恶性表型.本研究对CNE2细胞所表达的NPCEDRG基因mRNA剪接变异体克隆、鉴定,发现NPCEDRG基因至少有7个转录起始位点,其中NM_032316的TSS位于ATG上游-85 nt处,AF538150和AK094248的TSS位于-25 nt处;AF538150不存在第2外显子中6核苷酸序列(3'-TTGCAG-3')的缺失,其CDs为516 bp,编码1种由171个氨基酸组成的蛋白质(而非GenBank中公布的CDs为510 bp,1种由169个氨基酸组成的蛋白质).本研究成功克隆得到1种新的NPCEDRG基因的mRNA剪接变异体V2,其TSS位于-23 nt处,其CDs为297 bp,编码1种由98个氨基酸组成的蛋白质.
- 侯德富关勇军关瑞万恂恂李国庆欧阳咏梅余艳辉陈主初
- 关键词：RT-PCR
- 反义四环素转录激活子表达细胞系的构建及鉴定
- 2009年
- 目的:构建反义四环素转录激活子(reverse Tc-controlled transactivator,rtTA)表达细胞系。方法:将RevTet-On基因表达系统中调控载体pRevTet-On转染NIH3T3细胞,经G418筛选及RT-PCR鉴定。结果:获得7个rtTA不同表达水平的细胞克隆。结论:成功构建rtTA表达细胞模型,为进一步研究特定外源基因的功能提供一个理想实验平台。
- 侯德富贺智敏余艳辉陈主初
- 关键词：RT-PCR
- NFY结合位点缺失下调NPCEDRG基因启动子转录活性和效率
- 2013年
- NPCEDRG基因是一个鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)相关基因.NPCEDRG基因启动子为TATA-less启动子,其核心启动子区域位于-146～-8 bp区,该区域包含NFY、STAT1和cMYB等转录因子结合位点.前期研究结果提示,转录因子NFY可能参与NPCEDRG基因的转录调控.为明确NFY转录因子在NPCEDRG基因转录中的作用,本研究应用报告基因载体系统分析方法对NPCEDRG基因核心启动子区进行NFY结合位点(或CCAAT-box)缺失突变及其功能分析,分别构建NPCEDRG基因核心启动子区NFY结合位点缺失突变的Luc和EGFP报告基因表达载体.比较核心启动子和NFY结合位点缺失突变体报告基因载体的转录活性和效率.结果表明,在MCF7和CNE2细胞中,NFY结合位点缺失突变体的转录活性分别约为其核心启动子转录活性66.94%和75.72%,即NFY结合位点缺失致使该启动子转录效率在MCF7和CNE2细胞中分别降低了33.06%和24.28%;EGFP报告基因表达载体系统研究结果与Luc报告基因载体系统结果基本吻合.本研究再次证实,转录因子NFY通过结合NPCEDRG基因启动子的核心元件NFY结合位点参与NPCEDRG基因的转录调控,并提高其基因转录活性和效率.
- 侯德富关瑞万恂恂陈主初
- 关键词：核心启动子转录活性
- 脂多糖结合蛋白在脓毒症患者诊断和预后预测中的作用被引量：7
- 2015年
- 目的:探讨脂多糖结合蛋白(LBP)在脓毒症患者诊断和预后预测中的作用。方法:挑选ICU的患者共80名,患者分为全身炎症反应综合征(SIRS)组(阴性对照组)、脓毒症存活组和脓毒症死亡组;所有患者均于进入ICU后24 h内采集血清样本并进行APACHEⅡ评分分析;另挑选10名健康志愿者血清作为正常对照组;ELISA检测各组样本血清LBP、C反应蛋白(CRP)和降钙素原(PCT)浓度;并以APACHEⅡ评分、血清LBP、CRP和PCT浓度对脓毒症诊断和预后预测做ROC曲线,评价LBP在脓毒症患者诊断和预后预测中的作用。结果:与SIRS组相比,脓毒症组的APACHEⅡ评分、血清LBP、CRP、PCT浓度均升高(P<0.05);与脓毒症存活组相比,死亡组的APACHEⅡ评分和血清LBP浓度升高(P<0.05),而血清CRP和PCT浓度在脓毒症存活组与死亡组之间的差异无统计学意义;LBP血清浓度高于26.84 mg/L时诊断脓毒症的敏感性和特异性分别为97.1%和95.9%;LBP血清浓度高于54.16 mg/L时预测脓毒症预后的敏感性和特异性分别为85.2%和80.0%。结论:与传统的脓毒症生物标志物CRP、PCT相比,LBP在脓毒症的诊断和预测方面都具有更好的效果。
- 焦京蒋宇高敏王念杨明施肖献忠
- 关键词：脓毒症脂多糖结合蛋白C反应蛋白降钙素原
