南通大学生命科学学院细胞生物学教研室
- 作品数:1 被引量:10H指数:1
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- 杜仲对大鼠骨髓基质细胞骨桥蛋白和骨保护素表达的影响 水提液与醇提液有区别吗?被引量:10
- 2010年
- 背景:以往实验证实杜仲能促进骨髓基质细胞向成骨细胞分化,但对促进成骨分化的分子机制报道很少。目的:观察中药杜仲水/醇提取物对大鼠骨髓基质细胞骨桥蛋白和骨保护素表达的影响方法:盐杜仲2g,分别加蒸馏水或甲醇至15mL,室温振荡1h,静置过夜后,15000r/min离心10min,弃沉淀。水浸上清不经处理即得水提取物;甲醇浸上清经真空浓缩,再加水至15mL溶解剩余物后,得醇提取物水、醇提取物,用0.22μm滤膜过滤后于-20℃保存。取2月龄SD大鼠6只,体外培养至第3代SD大鼠骨髓基质细胞进行杜仲水/醇提取物诱导,诱导物分为1×10-2,1×10-3,1×10-4和1×10-54个稀释度;阴性对照组加入PBS;诱导培养6d。以免疫细胞化学法测定诱导6d的骨髓基质细胞骨桥蛋白和骨保护素表达。应用反转录-聚合酶链反应方法测定1×10-3,1×10-4稀释度诱导3d的骨髓基质细胞骨桥蛋白和骨保护素的基因表达。结果与结论:细胞免疫化学显示,杜仲水/醇提取物对大鼠骨髓基质细胞骨桥蛋白的表达均有显著的刺激作用,以1×10-4的稀释度作用最强,且醇提取物的作用大于水提取物;骨保护素的表达却无显著变化。反转录-聚合酶链反应显示,水提取物对诱导3d后大鼠骨髓基质细胞骨桥蛋白的基因表达量显著高于醇提取物,骨保护素未检测出表达。证实杜仲水/醇提取物诱导骨髓基质细胞成骨分化与刺激骨桥蛋白表达相关,与骨保护素无关;水提取物促进骨髓基质细胞骨桥蛋白表达早于醇提取物。
- 张艳红谢焕松夏树林赵春谭湘陵
- 关键词:骨髓基质细胞骨桥蛋白骨保护素