大连医科大学基础医学院生物技术系
- 作品数：14 被引量：46H指数：5
- 相关机构：上海中医药大学交叉科学研究院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省自然科学基金辽宁省“百千万人才工程”资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生理学生物学更多>>
- 褐藻多糖硫酸酯抑制乳腺癌诱导的淋巴管生成及机制研究
- 乳腺癌已经成为严重影响人类健康，尤其是女性健康的一种恶性肿瘤。而恶性肿瘤的转移是导致肿瘤患者死亡的主要原因，其转移途径分为淋巴道转移和血道转移，其中淋巴道转移为肿瘤的早期转移方式。海洋天然产物褐藻多糖硫酸酯(Fucoid...
- 高子翔马艳虹刘铭苏真朱杰代培斌邹向阳
- 关键词：褐藻多糖硫酸酯淋巴管生成乳腺癌淋巴管内皮细胞
- 中波紫外线与化学致癌物诱导下HaCaT细胞的蛋白表达应答被引量：1
- 2009年
- 对角质形成细胞HaCaT分别进行中波紫外线(UVB)照射、2,4-二硝基苯磺酸(DNBS)刺激及UVB+DNBS(UD)共同刺激,利用二维荧光差异胶内凝胶电泳(2D DIGE)、DeCyder定量分析软件和HPLC-nESI-MS/MS分析技术,对HaCaT细胞产生的差异表达蛋白进行了鉴定.有65个蛋白质点发生了明显表达差异(P<0.05),与UVB或DNBS单独处理细胞相比,有41个蛋白点表现为UVB和DNBS的正协同效应,13个蛋白点表现为负协同效应,5个蛋白点与UVB单独处理相近,6个蛋白点与DNBS单独处理相近.HPLC-nESI-MS/MS从65个差异表达蛋白质点中共鉴定出60种单一(Unique)蛋白.采用生物信息学方法对这些鉴定蛋白所涉及的分子功能、参与的生物学过程及信号通路进行了系统分析.实验得到了与紫外辐射和化学诱导损伤的直接相关蛋白,有助于研究不同环境条件下皮肤癌的形成及皮肤疾病的有效防护与治疗.
- 孙明忠刘淑清吕晓郭一萌郭春梅辛毅唐建武
- 关键词：中波紫外线
- 慢性阻塞性肺疾病的气道黏液高分泌及其靶向治疗
- 气道黏液在先天性免疫应答中发挥重要作用。但是，当气道丧失正常功能时在其近端及远端位置便会出现高黏液分泌状态和分泌物增多的现象，同时将引发相关症状，如咳嗽、咳痰、肺功能下降，气道阻塞，也成为导致慢性阻塞性肺疾病(COPD)...
- 崔力沙谌望孙刘卓朱发贝李艳霞吴大畅
- 关键词：黏液高分泌靶向治疗
- 小檗碱对肥胖小鼠脂肪组织纤维化及肠道菌群的调节作用研究被引量：12
- 2019年
- 研究小檗碱对肥胖小鼠脂肪组织纤维化及肠道菌群的调节作用。选用SPF级昆明小鼠40只,分为正常对照组、肥胖模型组、小檗碱高和低剂量组。除正常对照组外,其他组小鼠连续灌服高脂乳剂12周,建立肥胖模型,之后各组小鼠给予相应药物9周。免疫印迹法检测脂肪组织中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、转化生长因子-β1(transforming growth factor beta1,TGF-β1)和腺自酸活化蛋白激酶-α1(adenosine 5'-monophosphate-activated protein kinase-α1,AMPK-α1)的表达。肠杆菌基因间重复共有序列基因扩增和聚合酶链式反应--变性梯度凝胶电泳分析小檗碱对肥胖小鼠肠道菌群的影响。小檗碱能够降低脂肪组织中TNF-α和TGF-β1的表达,增加AMPK-α1的表达。肥胖小鼠肠道菌群失调,致病菌费克蓝姆氏菌(Facklamia iqnava)增加,毛螺科菌和乳酸杆菌减少,小檗碱给药后毛螺科菌和嗜酸乳杆菌增加,成为优势菌群。小檗碱对肥胖小鼠脂肪组织纤维化的减轻和肠道菌群的调节作用不仅与激活AMPK,抑制TNF-α和TGF-β1有关,还与调节肠道菌群失调,促进益生菌生长有关。
- 王杨孔敏宋晓瑜张嘉微李新莉
- 关键词：小檗碱肠道菌群优势菌群
- CRKⅡ对慢性粒细胞白血病K562细胞恶性行为的影响
- 2021年
- 作为信号接头蛋白CRK家族成员之一,CRKⅡ参与细胞的增殖、存活、黏附、迁移、分化,但CRKⅡ与白血病的关系及作用机制尚不清楚。采用qRT-PCR(quantitative real-timePCR)检测CRKⅡ在正常人外周血样本、非恶性白血病患者骨髓样本、慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)初发患者骨髓样本、CML完全缓解(complete remission,CR)患者骨髓样本中的表达情况;CRKⅡ小干扰序列瞬时转染K562细胞,获得CRKⅡ表达下调的K562细胞株,Western blot和qRT-PCR检测CRKⅡ干扰效率;CCK8检测CRKⅡ下调对K562细胞增殖能力的影响;Transwell小室检测CRKⅡ下调对K562细胞迁移、侵袭能力的影响;Western blot检测CRKⅡ下调对K562细胞中信号通路关键分子p130Cas、Rac1表达水平的影响。与正常人外周血样本、非恶性白血病患者骨髓样本相比,CRKⅡ在CML初发患者骨髓样本中表达水平升高,同时在4对CML初发-CR配对样本中,患者完全缓解后CRKⅡ表达水平降低;在K562细胞中CRKⅡ表达被有效沉默;CRKⅡ下调抑制K562细胞的增殖、迁移、侵袭能力。初步分子机制研究发现,CRKⅡ通过激活p130Cas/DOCK180/Rac1通路调节K562细胞的恶性行为。CRKⅡ在CML发生、发展中起着重要的作用,作为肿瘤促进剂影响CML细胞的恶性行为,可作为CML诊断、治疗的新靶点。
- 郭春梅张秋玲张芙蓉刘淑清孙明忠
- 关键词：慢性粒细胞白血病
- 双向电泳结合质谱初步分析蛇岛蝮蛇毒蛋白质组被引量：5
- 2009年
- 采用荧光染料(Cy5)标记中国辽宁蛇岛蝮(Gloydius shedaoensis shedaoensis,GSS)蛇毒(snake venom,SV,GSS-SV)蛋白质,获得了该蛇毒的双向十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(2D SDS-PAGE)图谱,经DeCyder软件分析,分辨出1000多个蛋白点,分子量范围在10～150ku间,等电点在4～7的蛋白质点占78.8%。凝胶后染色(post-staining)采用蛋白荧光染料Deep Purple,选取的5个蛋白点经胶内酶解,产生的肽段经高效液相色谱-电喷雾串联质谱(high performance liquid chromatography/HPLC-electro-spray ionization tandem mass spectrometry/ESI-MS/MS,HPLC-ESI-MS/MS)进行序列测定,质谱数据经Sequest Bioworks软件分析,为蛇毒L-氨基酸氧化酶、金属蛋白酶、类凝血酶、纤溶酶原激活物和磷脂酶A2的同源蛋白。本研究采用的荧光标记2DSDS-PAGE结合HPLC-ESI-MS/MS的技术适于高通量研究蛇毒蛋白组成。
- 马驰刘淑清宗军卫袁章利孙明忠吴玉群孙立新郑庆印
- 关键词：蛇毒双向电泳高效液相色谱电喷雾质谱
- 源于中药的胰脂肪酶抑制剂研究进展被引量：6
- 2020年
- 肥胖是高血压、高脂血症、动脉硬化、2型糖尿病以及多种癌症等代谢性疾病的重要诱因,抗肥胖药物一直是新药研发领域的热点。胰脂肪酶(又称三酰基甘油酰基水解酶)负责水解胃肠中50%~70%膳食脂肪,是防治肥胖的一个关键靶点。胰脂肪酶抑制剂可通过降低该酶的水解活性减少消化器官中膳食脂肪的分解和吸收,进而改善肥胖和高脂血症等代谢性疾病的症状。虽然目前临床上已有胰脂肪酶抑制剂(奥利司他)上市,但其长期服用后会出现显著的胃肠道不良反应。因此,有必要研发抑制作用强且安全性好的新型胰脂肪酶抑制剂。近年来,国内外大量研究发现部分中草药提取物及其化学成分能够通过抑制胰脂肪酶达到调节脂质代谢和防治肥胖的效果。本文结合近年来胰脂肪酶抑制剂研发领域的国内外研究进展,着重汇总了具有胰脂肪酶抑制效应的中药提取物及其化学成分,并对其抑制效应和抑制机制等进行了归纳总结。此外,作者还对该领域面临的挑战和未来降脂药物的研发方向进行了展望。上述信息不仅有助于药物化学家从中药化学成分中发现强效的胰脂肪酶抑制剂进而用于肥胖防治药物的研发,同时也为中草药及其制品防治肥胖及肥胖相关代谢性疾病提供了新思路和启示。
- 侯旭东胡情马丽娟于浩楠葛广波侯洁
- 关键词：胰脂肪酶肥胖中药抑制剂
- 姜黄素增强PTEN野生型三阴性乳腺癌细胞对PARP1抑制剂敏感性的研究被引量：2
- 2020年
- 目的研究姜黄素增强PTEN(磷酸酶和张力蛋白同系物)野生型三阴性乳腺癌细胞对于PARP1抑制剂奥拉帕尼(Olaparib)的敏感性及其潜在的作用机制,从而为PTEN野生型三阴性乳腺癌病人的临床治疗提供新方案。方法使用PTEN缺陷三阴性乳腺癌细胞株BT549和PTEN野生型细胞株BT549-PTEN进行实验。MTT实验检测两种细胞在奥拉帕尼作用下的存活率。蛋白质印迹实验检测PTEN缺陷型和野生型细胞中同源重组修复关键蛋白RAD51的表达。彗星实验检测姜黄素及姜黄素与奥拉帕尼联合使用后细胞DNA的损伤程度。蛋白质印迹检测姜黄素作用后RAD51变化。结果PTEN可通过增加RAD51的方式促进DNA损伤的修复。与PTEN缺陷型细胞相比,野生型细胞对于奥拉帕尼的作用较不敏感。姜黄素能够通过抑制RAD51的方式抑制PTEN介导的DNA修复,并增强PTEN野生型三阴性乳腺癌对奥拉帕尼的敏感性。结论姜黄素通过抑制PTEN介导的DNA修复使PTEN野生型乳腺癌细胞对PARP1抑制剂奥拉帕尼敏感。
- 孙偲丰王莹杨彦琴玄基泽张斌秦元华茅卫锋
- 关键词：姜黄素PTEN三阴性乳腺癌DNA修复
- 金属离子对蛇毒蛋白生物活性及结构效应的影响被引量：2
- 2009年
- 从旅顺产白眉蝮蛇(Gloydius blomhoffii brevicaudus,GBB)蛇毒中纯化得到了3种电泳和质谱纯蛋白活性组分,其酶解肽段采用高效液相色谱-电喷雾串联质谱(HPLC-nESI-MS/MS)进行序列测定,与其它同源性蛇毒蛋白氨基酸序列比对发现,3种蛋白为新的蛇毒磷脂酶A2、类凝血酶和金属蛋白酶,分别将其命名为GBB-bPLA2,GBB-TLE和GBB-MP.电感耦合等离子体发射光谱法(ICP-AES)测得每个GBB-bPLA2和GBB-MP中含有一个Ca2+;每个GBB-TLE中含有2个Zn2+.Ca2+可分别使GBB-bPLA2和GBB-MP的荧光发射波长向短波方向移动2.0和1.6nm,使二者的荧光发射强度提高14.0%和11.0%;Ca2+的存在可显著提高二者的热稳定性,使GBB-bPLA2和GBB-MP的热变性温度分别提高1.5和2.0℃.Zn2+使GBB-TLE的荧光发射强度增高4.3%,但对GBB-TLE的酯酶水解活性、荧光发射波长和热变性温度无显著影响.金属离子的存在能够不同程度地影响蛇毒蛋白结构热稳定性,但对蛇毒蛋白生物活性的作用则不同.
- 刘淑清郭春梅徐跃飞孙明忠辛毅唐建武
- 关键词：金属离子活性
- Ca^(2+)离子对PLA_2结构和功能的影响
- 2009年
- 摘要从旅顺产白眉蝮蛇(Glyodius blomhoffi Brevicaudaus,GBB)蛇毒(GBBSV)中首次纯化得到了电泳纯和质谱纯磷脂酶A2(GBB-PLA2)。采用电泳、质谱、等离子体发射光谱、紫外、荧光光谱测试技术对GBB-PLA2进行了系统表征。HPLC-ESI-MS法测得的精确分子量为13 965·07 amu,HPLC-ESI-MS/MS法鉴定GBB-PLA2为江浙蝮蛇和尖吻蝮蛇蛇毒PLA2的同源性蛋白,分别得到4个和1个同源性肽段。凝胶过滤、质谱和SDS-PAGE测试技术结果表明,GBB-PLA2以稳定的单体形式存在。电感耦合等离子体发射光谱分析法(ICP-AES)测得每1个磷脂酶A2含有1个Ca2+离子,Ca2+是PLA2活性所必需的。Ca2+的除去使PLA2活性降低90%,外加Ca2+明显加速PLA2水解底物DPPC的速度。Ca2+起稳定PLA2结构的作用,可使GBB-PLA2的热变性温度提高3℃。
- 刘淑清孙明忠赵宝昌
- 关键词：磷脂酶A2
