广东药科大学基础学院生物化学与分子生物学系
- 作品数：10 被引量：34H指数：3
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- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程生物学化学工程更多>>
- β-葡萄糖苷酶降解虎杖的初歩研究
- 虎杖中的白藜芦醇苷是一种β-糖苷,能被β-葡萄糖苷酶水解为白藜芦醇.β-葡萄糖苷 酶主要是来自于微生物中的真菌,比如木霉、曲霉等,酶活力低且温度和pH等稳定性范围较窄, 而且β-葡萄糖苷酶的售价高昂,限制了其在工业上的使...
- 张梦乐李荷
- 关键词：Β-葡萄糖苷酶虎杖白藜芦醇白藜芦醇苷
- 新型β-葡萄糖苷酶bgl2238的表达条件优化及对虎杖苷降解的初步研究
- 李荷
- 重组大肠杆菌Bgl2238的发酵优化
- 2018年
- 本研究对前期实验室从黑龙江玉米土壤中筛选并构建的β-葡萄糖苷酶Bgl2238的重组大肠杆菌（E.coliBL21（DE3）-pET32a-bgl2238）采用响应面（Box-Behnken）优化的方法进行摇瓶发酵,优化培养基组分,而培养条件即温度、pH值、接种量及装液量则采用单因素法优化。结果显示最佳培养基配比为：甘油9.32g/L、酵母提取粉12g/L、胰蛋白胨19.13g/L、NaCl8g/L、K_2HPO_4·3H_2O 19.13g/L、KH_2PO_42g/L、柠檬酸高铁胺0.2g/L和微量元素母液6mL/L。重组大肠杆菌Bgl2238最佳的发酵条件为：发酵温度37℃、起始pH8.0、3%接种量、25mL装液量、IPTG终浓度为0.25mmol/L。在250mL锥形瓶对重组子Bgl2238进行发酵,在最优化的发酵培养基成分和培养条件下,Bgl2238的酶活力可以达到2910U/L,比起始培养基中的酶活提高了61.77%。
- 王晓萌唐乐丽黄庆范新炯王春庆张梦乐李荷
- 关键词：摇瓶发酵响应面优化
- 黄芪多糖对非酒精性脂肪肝病大鼠的治疗作用被引量：19
- 2018年
- 目的研究黄芪多糖(APS)对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪肝病(NAFLD)大鼠的治疗作用。方法取36只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(8只)和疾病模型组(28只),疾病模型组大鼠给予高脂饲料喂养6周建立NAFLD大鼠模型。取其中25只NAFLD模型大鼠随机分为NAFLD模型组(7只)、辛伐他汀组(9只,6.7 mg·kg^(-1)·d-1辛伐他汀灌胃给药)和APS组(9只,700 mg·kg^(-1)·d-1 APS灌胃给药),正常对照组和NAFLD模型组大鼠给予相同体积双蒸水灌胃,各组均连续灌胃8周。比较各组大鼠的饮食量、能量摄入量、饮水量、排泄量和血清生物化学指标。采集大鼠肝脏组织计算肝脏指数,测定肝组织中总胆固醇(TC)和三酰甘油(TG)含量,并于光学显微镜下观察肝脏组织结构和细胞形态。结果 NAFLD模型组大鼠的能量摄入量高于正常对照组(P<0.05),饮食量、饮水量和排泄量均低于正常对照组(P均<0.05)。辛伐他汀组和APS组大鼠的饮食量、能量摄入量、饮水量和排泄量与NAFLD模型组相比差异均无统计学意义,且两组间差异也均无统计学意义(P均>0.05)。与NAFLD模型组相比,辛伐他汀和APS组大鼠血清TC、TG、低密度脂蛋白胆固醇和丙二醛含量均降低(P均<0.05),高密度脂蛋白胆固醇含量和总超氧化物歧化酶活性均增加(P均<0.05),且肝组织中TC和TG含量以及肝脏指数和肝细胞内脂滴数目、脂滴面积均下降(P均<0.05)。APS组大鼠血清中葡萄糖、丙氨酸转氨酶和天冬氨酸转氨酶水平均低于NAFLD模型组(P均<0.05),但辛伐他汀组与NAFLD模型组相比差异无统计学意义(P均>0.05)。结论 APS可有效调节NAFLD大鼠的血清葡萄糖、血脂和肝脏脂滴水平,其机制可能与APS的抗氧化作用有关。
- 袁前发唐思梦陈思羽杨泽民
- 关键词：非酒精性脂肪肝黄芪多糖辛伐他汀血糖脂类
- 血脂异常症脾虚证患者血清microRNA差异表达谱生物信息学分析被引量：1
- 2018年
- 目的通过对血脂异常症脾虚证患者血清microRNA(miRNA)表达谱和生物信息学分析,从miRNA水平上探讨脾虚证的发病机制和辨证分型。方法选择5例血脂异常症脾虚证患者和5名健康志愿者,通过miRNA定量PCR芯片实验,筛选出两组之间差异表达的miRNA,进行靶基因预测和功能注释。结果在血脂异常症脾虚证患者和健康志愿者的血清中发现12个差异表达miRNA,它们能将两组样本很好的区分。靶基因预测和功能注释显示,10个下调miRNA调控的178个靶基因显著富集到9个KEGG通路,主要涉及细菌和病毒等病原体入侵、脂肪酸代谢、DNA转录和修复、吞噬作用和慢性粒细胞白血病5个方面。2个上调miRNA调控的101个靶基因显著富集7个KEGG通路,主要涉及与增值和凋亡相关的信号通路、剪接体、药物代谢和肌萎缩性脊髓侧索硬化症4个方面。结论本研究发现了一些血脂异常症脾虚证患者的血清miRNA标志物,并从代谢和免疫方面为脾虚证患者的发病机制提供了miRNA证据。
- 杨泽民陈滢宇杨小蓉袁前发陈思羽何震宇洪敏
- 关键词：脾虚证血脂异常症功能注释
- 源于红树林的新型脂肪酶Lip906生物信息学分析
- 2017年
- 本研究利用生物信息学在线软件对脂肪酶Lip906的二级结构和模体信息进行预测,同时对其三级结构进行同源建模和模建结果质量评价,预测该蛋白质的活性位点信息,旨在从蛋白质序列特征和分子结构水平理解其在酯类水解过程中的作用。结果表明,模建的Lip906蛋白结构品质较高,具有7段α-螺旋和2组β-折叠结构,是一个典型的α/β类蛋白,表面呈弱负电势分布;Lip906蛋白具有5个不同模体,可能参与不同生化反应或执行不同的功能。这些研究结果对理解Lip906蛋白功能以及配基结合位点定位非常重要,也为脂肪酶Lip906的突变设计提供了理论基础。
- 陈小利张雪玲吴秀玲李志红李荷
- 关键词：同源建模活性位点
- H_2O_2诱导SH-SY5Y细胞继发性氧化应激反应的分子机制被引量：2
- 2017年
- 目的探讨过氧化氢(H_2O_2)对诱导SH-SY5Y细胞继发性氧化应激反应的分子机制。方法正常培养的SH-SY5Y细胞,分别用不同浓度H_2O_2(0、200、400、600μmol/L)处理24 h,以0μmol/L组为正常对照组。各组处理完毕后提取细胞总蛋白。Western印迹检测p-P38、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)1等蛋白的表达水平。结果与正常对照组相比,高、中、低剂量H_2O_2处理组p-P38蛋白的表达水平随H_2O_2浓度增高呈剂量依赖性增加(P<0.01);SOD1蛋白的表达水平随H_2O_2浓度增高呈剂量依赖性增加(P<0.01);而CAT蛋白的表达水平随H_2O_2浓度增加呈剂量依赖性降低(P<0.01)。结论 H_2O_2通过诱导SH-SY5Y细胞内P38的磷酸化增强,激活P38/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路,引起SOD1蛋白表达增强,CAT蛋白表达抑制,导致细胞内源性H_2O_2产生过多,而不能被及时彻底清除,从而引起神经元继发性氧化应激反应。
- 何茵如胡苗杨霞梅寒芳
- 关键词：过氧化氢氧化应激P38
- 响应面法优化漆酶基因lac1338表达漆酶的发酵条件被引量：2
- 2016年
- 为提高Escherichia coli BL21(DE3)中漆酶基因lac1338的表达水平,采用响应面法对其发酵条件进行优化.首先用Plackett-Burman法筛选出3个影响较大的重要因素,分别为温度(Q1)、诱导时间(Q3)以及诱导前菌体浓度OD600 nm(Q4).继而结合响应面分析,建立以漆酶酶活为响应值的二次回归方程模型,即Y=75.33+3.30A+9.35B+5.35C-1.69AB+0.80AC+11.50BC-25.97A^2+1.83B^2-4.66C^2,从中获得最优的发酵条件:诱导温度为31℃,诱导时间为20 h,诱导前的菌体浓度OD600 nm值为1.8.采用该发酵条件,供试菌株的漆酶比酶活达到22.8 U/mg,较优化前漆酶的表达量(10.7 U/mg)提高了2.13倍,其试验值与预测值基本相符.说明预测模型可靠性高,可应用于漆酶发酵条件的优化.
- 夏玉林冯娟李荷
- 关键词：漆酶PLACKETT-BURMAN响应面发酵条件优化
- 2型糖尿病脾虚证患者血清microRNA表达谱和生物信息学分析（英文）被引量：4
- 2017年
- 目的:通过对2型糖尿病脾虚证患者血清micro RNA(miRNA)表达谱和生物信息学分析,从miRNA水平上探讨脾虚证的发病机制和辨证分型。方法:选择5例2型糖尿病脾虚证患者和5名健康志愿者,从他们的血清标本中提取RNA,进行miRNA定量PCR芯片实验。筛选出两组之间差异表达的miRNA,利用miRSystem数据库进行靶基因预测和功能注释。结果:在2型糖尿病脾虚证患者和健康志愿者的血清中发现16个差异表达的miRNA。聚类分析显示,这16个差异表达的miRNA能够将2型糖尿病脾虚证患者和健康志愿者很好的区分。靶基因预测和功能注释显示,14个上调miRNA的调控122个靶基因显著富集到6个KEGG通路和6个GO分子功能。这些富集的KEGG通路包括与脂肪酸、氨基酸和2型糖尿病相关的营养物质代谢通路,钙离子信号通路,致病的大肠杆菌感染通路和亨廷顿氏舞蹈病通路。这些富集的GO分子功能包括羧酸、脂类、辅因子和药物结合功能,和酶激活剂和转录抑制剂活性功能。然而,2个下调miRNA调控的10个靶基因显著富集到2个KEGG通路。它们是内质网中的蛋白质加工通路和志贺氏菌病通路。结论:本研究可能为2型糖尿病脾虚证患者的临床辨证提供了一些血清miRNA标志物,同时从miRNA水平上为脾虚证患者的发病机制提供了依据。
- 杨泽民洪敏陈滢宇陈龙辉杨小蓉唐思梦袁前发何震宇陈蔚文
- 关键词：脾虚证2型糖尿病功能注释
- β-葡萄糖苷酶Bgl2238生物信息学分析被引量：6
- 2018年
- 利用生物信息学方法对β-葡萄糖苷酶Bgl2238的氨基酸序列进行分析。采用Prot Param、DNAMAN、Multicoil、SOPMA、PROSAN等软件对其理化性质、亲/疏水性、不稳定指数、PEST序列、蛋白质二级结构及蛋白质修饰位点等重要参数进行预测,并对其三级结构进行同源建模及模建结果质量的评估。结果发现：Bgl2238由745个氨基酸组成,蛋白质序列中α-螺旋占36.64%,β-延伸链占19.06%,β-转角占9.40%,无规则卷曲占34.90%,存在14段非PEST序列,具有41个不同蛋白质修饰位点。采用在线网站SWISS-MODEL建模得到了Bgl2238的三级结构,分析蛋白质可及性并分析得到Ramachandran图,检测结果说明三维结构是合理的。本研究结果为β-葡萄糖苷酶Bgl2238进一步研究水解功能及提高其酶活性奠定了理论基础。
- 黄庆唐乐丽王晓萌范新炯李荷
- 关键词：Β-葡萄糖苷酶同源建模生物信息学
