江南大学生物工程学院糖化学与生物技术教育部重点实验室
- 作品数：184 被引量：421H指数：10
- 相关作者：王晓丽冯杰王欣刘中华郭晓旭更多>>
- 相关机构：中国药科大学药物科学研究院中国热带农业科学院热带生物技术研究所西北大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学医药卫生更多>>
- GPI锚定蛋白前体C-端附着信号的疏水性决定其内质网相关蛋白质降解途径
- 2022年
- 目前,已知超过150种糖基磷脂酰肌醇锚定蛋白(glycosylphosphatidylinositol anchored protein,GPI-anchored protein)在哺乳动物细胞中表达,并参与免疫识别、细胞通讯与信号转导等多种生理过程。当蛋白质无法被GPI修饰时,前体蛋白质通过内质网相关蛋白质降解(endoplasmic reticulum associated degradation,ERAD)途径降解。然而,GPI锚定蛋白ERAD的降解机制尚不清楚。为了探究GPI锚定蛋白前体的ERAD途径的具体机制,本研究敲除人胚胎肾细胞293细胞株(HEK293)的GPI转酰胺酶复合物亚基PIGS基因,进而敲除E3泛素连接酶HRD1和GP78基因,之后随机在PIGS-KO,PIGS-HRD1-KO和PIGS-GP78-KO过表达16种GPI锚定蛋白质(以亲本PIGS-KO细胞株作为对照组),Western印迹结果证明,GPI锚定蛋白前体在细胞株PIGS-HRD1-KO中的蛋白质积累量(I_(PHK))和PIGS-GP78-KO中的蛋白质积累量(I_(PGK))体现出明显的差异性,例如LYPD2的I_(PHK)是I_(PGK)的28倍,NEGR1的I_(PHK)是I_(PGK)的0.12倍,这说明GPI锚定蛋白前体的降解主要依赖于2种ERAD途径:ERAD-L和ERAD-M。且HRD1与GP78的2种E3泛素连接酶被选择性地用于GPI锚定蛋白前体的降解。朊病毒(prion)和CD59嵌合构建体表明,GPI前体蛋白C-端GPI附着信号决定了降解途径(朊病毒I_(PHK)/I_(PGK)由突变前的0.33改变为突变后的23.42。相反的是,突变前CD59的I_(PHK)/I_(PGK)是11.45,突变后变为2.81)。接着,通过对C-端附着信号疏水性的计算,我们发现,这种选择性差异由前体蛋白质C-端GPI附着信号疏水性的不同造成。本研究初步解释了未被GPI锚修饰的GPI锚定蛋白前体在ERAD中的降解机制。
- 张楠柳艺石藤田盛久高晓冬
- 酿酒酵母孢子壁结构及其合成相关基因研究进展被引量：1
- 2021年
- 细胞壁是酵母细胞区别于哺乳动物细胞的重要特征结构。酵母细胞壁的结构组成、合成、再生等与酵母自身繁殖及环境胁迫压力密切相关。目前,酵母孢子壁的形成机理、调控过程机制及孢子壁合成相关基因的功能尚未研究清楚。本文以酿酒酵母为例,简要描述酵母孢子壁的形成过程,重点阐述孢子壁甘露糖层、葡聚糖层、壳聚糖层和二酪氨酸层的结构组成及其合成相关基因的国内外研究进展,以期为抗真菌药物的新靶点研究提供参考。
- 潘华平丁成华潘荣斌韩平畴孙悦高晓冬中西秀树
- 关键词：酿酒酵母
- 基于电子仿生学的玛咖粉鉴伪被引量：2
- 2017年
- 为鉴别玛咖粉的真伪文中运用台式能谱扫描电镜观察了玉米粉、萝卜粉、蔓菁粉和玛咖粉颗粒的微观形态,并对玛咖粉和蔓菁粉的元素组成进行了分析测试。结果表明,萝卜粉、玉米粉与玛咖粉形态差异明显,蔓菁粉与玛咖粉微观形态最相近,但表观也有区别,同样可以进行玛咖粉的真假鉴伪;由X射线能谱分析结果可知,若被测样品中N元素质量比接近(43.75±0.79)%,O元素质量比接近(29.92±0.74)%,可初步推定该样品为纯玛咖粉;否则被测样品为疑似掺蔓菁粉的假玛咖粉。同时运用电子鼻对掺有蔓菁粉的玛咖粉进行鉴别。结果表明,掺不同蔓菁比例的玛咖粉气味指纹图谱呈现一定的规律性,电子鼻能够有效鉴别掺蔓菁的玛咖粉,还可以大致确定掺假的比例区间;此外通过统计质量控制(statistical quality control,SQC)分析模型可以实现原料和产品的质量控制。
- 党艳婷李爱民苑鹏夏凯刘士伟刘亚旭赵可心周文萱段盛林温霖
- 关键词：电子鼻
- 产胶期溶氧水平对土壤杆菌ATCC31749发酵产热凝胶流变性质的影响被引量：2
- 2013年
- 热凝胶是由土壤杆菌在氮源限制条件下生产的水不溶性胞外多糖。通过在线实时调节通气量建立了恒定溶氧控制策略,并将产胶期溶氧分别恒定控制在饱和溶氧浓度DO 5%、25%、50%和75%水平。然后,考察了产胶期溶氧浓度对土壤杆菌(Agrobacterium.sp.ATCC 31749)发酵过程及热凝胶流变性质的影响。结果表明,低溶氧(DO 5%)造成热凝胶生产强度显著下降,而溶氧水平高于DO 25%后,热凝胶比生成速率基本恒定。同时,热凝胶-碱溶液的流变行为符合假塑性流体特征,随着产胶期发酵时间增加,热凝胶溶液粘度迅速升高,且非牛顿流体特征逐渐显著。相同发酵时间时,适度溶氧(DO 25%)热凝胶溶液具有最大粘度,而溶氧限制(DO 5%)和高溶氧时(DO 75%)粘度均较低。控制发酵溶氧水平可以获得具有不同流变性质的热凝胶产品。
- 李晶徐敏朱莉郑志永詹晓北
- 关键词：土壤杆菌热凝胶假塑性流体粘度
- 盐单胞菌S62 β-半乳糖苷酶合成低聚半乳糖的研究被引量：3
- 2019年
- 以盐单胞菌S62 β-半乳糖苷酶为研究对象,探究其合成低聚半乳糖效率。为了提高低聚半乳糖产率,对反应条件进行了优化,并以反应温度、pH、加酶量、底物浓度为考察对象进行正交试验,得到最优反应条件:反应温度40℃,pH 7.0,加酶量50 U/mL,底物质量浓度300 g/L。反应6 h时可获得最大低聚半乳糖产率(41.91±0.27)%,乳糖消耗率为(82.47±0.38)%。反应4～8 h内低聚半乳糖产率都维持在40%以上,此时乳糖消耗率均在80%以上,在提高乳糖利用率的同时实现了低聚半乳糖的高产,有利于降低生产成本,为低温S62 β-半乳糖苷酶工业化应用奠定了基础。
- 朱五二缪明永顾正华李由然丁重阳石贵阳
- 关键词：Β-半乳糖苷酶盐单胞菌
- 甘氨酸、脯氨酸促进高渗环境下Yarrowia lipolytica发酵甘油产赤藓糖醇被引量：6
- 2013年
- 解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)可很好地发酵甘油生产赤藓糖醇。NaCl作为渗透压调节剂提升发酵体系渗透压有利于提高赤藓糖醇产量,但高渗会抑制酵母生长,延长发酵周期,降低生产强度。该研究以甘氨酸、脯氨酸为渗透压保护剂,在高渗环境下,研究其如何提升酵母细胞耐高渗能力。结果发现,Y.lipolytica可吸收胞外甘氨酸和脯氨酸并在胞内积累以抵御高渗胁迫,并显著提升高渗环境下的菌体量,促进赤藓糖醇的高效合成。在7 L发酵罐水平,初始渗透压为4.17±0.17 osmol/kg时,发酵初始添加30 mg/L甘氨酸和40 mg/L脯氨酸,发酵时间由108 h减少到90 h,赤藓糖醇最终产量达到了93.6±4.2 g/L,生产强度为1.04±0.05 g/(L·h),产物得率为0.49±0.03 g/g,分别比未添加保护剂时增加了4.12%,25.3%和4.26%。
- 杨利博郑志永詹晓北
- 关键词：解脂耶氏酵母渗透压赤藓糖醇
- 利用糖芯片技术快速检测沙门氏菌被引量：2
- 2017年
- 为了探讨糖芯片在沙门氏菌检测上的应用,以沙门氏菌ATCC31685为主要研究对象,制作不同类型的糖芯片用于优化糖芯片检测条件;在优化条件的基础上,降低糖浓度或细菌浓度用于确定糖芯片检测限值;继而系统地研究了糖芯片在沙门氏菌和凝集素FimH拮抗剂筛选上的应用,并探究糖芯片对菌株的破坏性。由实验现象可知,沙门氏菌可与甘露糖化合物修饰的糖芯片结合,其中,以Man-1与NHS玻片所构建的糖芯片效果最优,并且两种不同的沙门氏菌(ATCC31685和ATCC9184)与糖芯片的结合能力不同,因此糖芯片可作为沙门氏菌的一种快速检测手段;在糖浓度为313 mmol/L或细菌浓度106个/mL时荧光信号接近背景值,并且糖芯片检测后对菌株无破坏性,可继续其他检测项目;此外,实验结果表明糖芯片可作为FimH蛋白拮抗剂的筛选工具。
- 张蓓蕾王晓丽王雪玉胡静尹健
- 关键词：沙门氏菌甘露糖拮抗剂
- 基于气味指纹图谱的玛咖品质快速鉴定方法被引量：6
- 2018年
- 以玛咖为研究对象,通过高效液相色谱和电子鼻分别测定24个产区36个玛咖样品中芥子油苷的总含量和气味传感器的响应值原始数据。基于玛咖样品中芥子油苷的总含量和传感器响应值的相关性分析结果,采用软独立建模分析(soft independent modeling class analogy,SIMCA)算法建立玛咖品质快速鉴定模型。结果表明:T30/1、P30/1、P30/2三根传感器与芥子油苷含量之间存在显著相关性,根据3根传感器建立的SIMCA模型可以将不同玛咖样品分为3个等级:一等品(芥子油苷含量≥10 mg/g)、二等品(5 mg/g≤芥子油苷含量<10 mg/g)、三等品(芥子油苷含量<5 mg/g)。运用电子鼻气味检测数据结合SIMCA模型可以快速鉴别玛咖的等级,还可推测出所测样品中芥子油苷的含量区间。
- 党艳婷苑鹏夏凯韩晓峰刘士伟赵可心周文萱温霖李爱民段胜林
- 关键词：玛咖芥子油苷电子鼻
- 模拟胃肠道反应器的参数建立与冷模实验研究被引量：1
- 2019年
- 体外消化和发酵实验紧密结合才能模拟完整消化道的功能,现有的模拟胃肠消化和大肠发酵的反应器结构各异且不通用,组合多个独立反应器则增加了实验的复杂程度和设备成本。集成了两类反应器的优势特征,开发了一种采用可编程逻辑控制器(PLC)的模拟胃肠道反应器(GSR),模拟了整体的胃肠道动态特征并与体内数据进行了比较。结果表明模拟胃肠道反应器既可准确模拟胃和小肠的蠕动、排空和混合等动态特征,又可提供肠道微生物的发酵环境。尾气排放和收集装置的设计实现了尾气快速排出和尾气体积的准确计量。模拟胃肠道反应器可为体外探索益生元对肠道微生物作用等研究提供帮助。
- 张文龙詹晓北陈荦郑志永朱莉李志涛高敏杰
- 关键词：胃肠道反应器PLC体外
- GABA富化处理的大米产品的成分分析与营养评价被引量：1
- 2023年
- 近年来随着人们生活水平的迅速改善,人们更加关注膳食营养健康。在本研究中,为了分析经过GABA富化装置处理前后稻谷的营养成分和功能组分变化,测定了GABA、游离氨基酸、蛋白质、还原糖、抗性淀粉和总淀粉等指标的含量。经过GABA富化处理后,精米中的还原糖含量由1.53 mg/g减少到0.341 mg/g;淀粉含量由746 mg/g减少到728 mg/g;而抗性淀粉含量由1.96%增加到2.30%;GABA含量由84.1μg/g增加到111μg/g;游离氨基酸含量由1114μg/g增加到1123μg/g;必需氨基酸含量由419μg/g增加到426μg/g。总蛋白含量几乎不变,且蛋白质组成符合理想蛋白质的要求。
- 赵祎侯金铂张雨婷王晓丽周楠迪
- 关键词：大米还原糖必需氨基酸抗性淀粉
