汕头大学医学院肿瘤分子生物学开放实验室
- 作品数：16 被引量：25H指数：3
- 相关作者：黄宁宇邱政夫黄国良更多>>
- 相关机构：中国科学技术大学生命科学学院中国科学院海洋研究所中山大学肿瘤防治中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目广东省卫生厅资助课题更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 超氧阴离子参与白藜芦醇诱导的人急性早幼粒白血病HL-60细胞凋亡被引量：1
- 2011年
- 目的:研究超氧阴离子(O2ˉ.)、H2O2、线粒体膜电位(MMP)在白藜芦醇(RSV)诱导人急性早幼粒白血病HL-60细胞凋亡中的作用。方法:以RSV(10.0、50.0、100.0μmol/L)分别作用HL-60 6、12、24h后,用流式细胞术检测细胞内O2ˉ.、H2O2及MMP水平;四氮唑蓝凝胶法检测RSV作用HL-6024h后超氧化物歧化酶(SOD)的活性;MTT法检测SOD和RSV共同作用HL-60后的细胞生存率;锥虫蓝细胞计数法检测N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)和RSV共同作用HL-60后的细胞生存率。结果:RSV可使HL-60内O2ˉ.水平升高,H2O2水平、MMP降低,SOD活性无明显变化;SOD和NAC对RSV诱导的HL-60凋亡作用无明显影响。结论:RSV诱导HL-60凋亡机制是RSV引起细胞内O2ˉ.水平升高,MMP降低,从而启动caspases凋亡途径诱发细胞凋亡。
- 常丽君何顺华吴睿祁婷婷张红伟李冠武刘峰邱政夫
- 关键词：白藜芦醇凋亡线粒体膜电位超氧阴离子
- 姜黄素抗急性白血病机制研究
- 2008年
- 目的:探讨姜黄素抗急性白血病的作用机制。方法:不同浓度(0.0,6.3,12.5和25.0μmol/L)姜黄素作用急性白血病HL60细胞后,用噻唑蓝法检测姜黄素对细胞生长的抑制作用;倒置相差显微镜观察细胞的形态变化,DAPI染色后用荧光显微镜观察细胞的形态变化,caspase 3试剂盒检测其活性,流式细胞仪分析细胞周期。结果:姜黄素对HL60细胞的生长有抑制作用,并呈时间-剂量依赖性,48 h的IC50为20.4μmol/L。25.0μmol/L姜黄素作用48 h后,相差倒置显微镜和荧光染色可见典型的细胞凋亡的形态改变。caspase 3酶活性检测发现,随着姜黄素浓度的增加,caspase 3酶活性也逐渐升高。流式细胞仪检测发现,姜黄素浓度为6.3,25.0μmol/L时,细胞阻滞在S期,而12.5μmol/L时,则在G2/M期。结论:姜黄素可诱导HL60细胞凋亡和周期阻滞,不同浓度姜黄素可使细胞分别阻滞在S和G2/M期,caspase 3参与其凋亡和细胞周期阻滞过程。
- 王双玲陈元玉何顺华刘峰李冠武
- 关键词：姜黄素凋亡
- 基于糖基化抑制和诱导内质网应激的衣霉素抗肿瘤耐药研究进展被引量：2
- 2021年
- 异常糖基化和细胞内质网应激与肿瘤的发生发展密切相关.证据表明,衣霉素通过表皮生长因子受体信号通路、蛋白激酶B/核转录因子-κB信号通路、信号转导及转录激活因子3、CD44分子等途径,抑制N-糖基化和诱导内质网应激,阻滞肿瘤发展,有可能逆转肿瘤细胞对紫杉醇、曲妥珠单抗、顺铂的耐药性,并增强多种肿瘤的治疗敏感性.衣霉素还可能诱导肿瘤细胞自噬,促进细胞凋亡.研究衣霉素的糖基化抑制和内质网应激的诱导作用,有助于揭示其抗肿瘤特性的潜在机制,为治疗难治性肿瘤提供新思路.本文就衣霉素抗肿瘤耐药的最新研究进展作一综述.
- 胡晓妍李冠武
- 关键词：衣霉素内质网应激糖基化
- 惠州地区客家人牙周病致病菌PCR分析被引量：2
- 2010年
- 目的应用聚合酶链式反应分别检测22例惠州地区客家牙周病患者及110例牙周健康人龈下菌斑中8种牙周病相关致病菌类型,分析不同的细菌类型与慢性牙周炎的相关性,为该地区牙周病的防治提供细菌学资料。方法取健康人和牙周炎患者龈下菌斑,水煮法提取DNA,采用8种常见牙周病可疑致病菌的特异引物,聚合酶链式反应(PCR)扩增16SrDNA片段来确定细菌种类。SPSS统计分析牙周炎与各种细菌相关性及与健康人组的差异显著性。结果惠州地区客家人慢性牙周病组除黄褐二氧化碳噬纤维菌(Co)外,其他细菌的检出率均显著高于健康组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论惠州地区客家人的牙周病相关致病菌同国内其他地区相比有自己的分布特点。细菌与牙周炎的发病相关,健康体检及临床牙周炎的患者可结合细菌学检查进行诊断、预防和治疗。
- 吕敏琼桂勤叶薇邓燕关映红麦瑞芝李冠武
- 关键词：牙周炎聚合酶链反应细菌分类
- 藻胆蛋白与血卟啉衍生物光敏剂的光毒性比较被引量：5
- 2005年
- 目的:比较藻胆蛋白和血卟啉衍生物光敏剂的光动力杀伤和光毒性作用,并从理论上分析吸收光谱特性和光敏作用之间的关系。方法:采用吸收光谱面积的计算方法和MTT法检测光照后培养细胞存活率。结果:3种藻胆蛋白的光敏毒性从大到小依次为藻红蛋白、藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白,均较血卟啉光敏剂有较弱的日光光敏毒性,光谱分析的理论计算数值和实验结果基本相符。结论:藻胆蛋白,尤其是别藻蓝蛋白和血卟啉光敏剂相比,有较弱的光敏毒性,适合开发成新型的光敏药物。
- 李冠武吴健谊陈爱云温博贵王广策李振刚
- 关键词：光动力治疗藻胆蛋白肿瘤血卟啉衍生物
- 免疫共沉淀结合双向电泳分离相互作用蛋白质的方法优化
- 2013年
- 目的:建立和优化有针对性的免疫共沉淀(CO-IP)与双向电泳(2DE)-质谱联合的技术来鉴定相互作用蛋白质。方法:利用特异性抗体通过CO-IP对细胞全蛋白中的目标蛋白进行富集,用不同洗脱液洗脱目标及其相互作用蛋白,并行2DE分离。结果:对CO-IP过程、洗脱液成分、上样量等关键步骤进行优化,得到满意的2DE图谱。结论:成功优化CO-IP与2DE分离技术,为通过蛋白质组学研究信号通路中重要蛋白质的相互作用提供有效方法。
- 祁婷婷何顺华严丁旻张俊李冠武邱政夫
- 关键词：蛋白相互作用免疫共沉淀双向电泳
- HDV核酶对乙型肝炎病毒抑制作用的研究
- 2007年
- 目的研究HDV核酶在细胞内对乙型肝炎病毒(HBV)复制及其抗原表达的抑制作用。方法1)以HBV前基因组mRNA为靶基因,体外筛选出HDV核酶有效作用位点,构建HDV核酶并进行体外测活;2)分别选用tRNA-Val、U6和hCMV 3种真核启动子,重组构建HDV核酶真核表达载体ptVHRz、pSURz和pcDHRz,分别用3种载体转染HepG2.2.15细胞;3)用点杂交、ELISA和实时荧光定量PCR方法分别检测核酶在细胞内的表达及对HBV的抑制作用。结果在HBV C基因区筛选到一位点,所构建的HDV核酶在体外条件下对该位点能产生有效切割。3种核酶表达载体在细胞内均能高效表达,在转染48 h后,ptVHRz和pcDHRz对HBeAg的表达产生了明显的抑制作用,而对HBsAg没有抑制作用。三者对HBV的复制均未产生明显影响。结论HDV核酶在细胞内对HBV抗原的表达能产生特异性抑制作用,但未能有效抑制HBV的复制,对其原因需进一步深入研究。
- 孟斌潘光锦刘毅鲁艳琴韩金祥温博贵
- 关键词：核酶基因疗法转染
- 白藜芦醇抑制EGF诱导人肺腺癌A549细胞侵袭被引量：1
- 2010年
- 背景与目的侵袭转移是人肺腺癌死亡的主要原因,表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)可通过活化ERK和PI3K-Akt信号通路,促进人肺腺癌A549细胞侵袭。本实验旨在研究白藜芦醇抑制EGF诱导体外A549细胞侵袭的作用,并初步探讨其机制。方法采用MTT法确定白藜芦醇对A549细胞无明显毒性的浓度范围,并以该浓度范围内的白藜芦醇作用EGF诱导的A549细胞,Transwell小室法检测其抑制细胞侵袭作用,明胶酶谱法分析细胞的MMP-2活性变化,Westernblot检测EGF信号通路相关蛋白表达。结果30μM内的白藜芦醇无明显的细胞毒性,20μM处理的受EGF诱导的A549细胞侵袭能力明显降低,MMP-2分泌减少,胞内p-ERK1/2和PI3K(0.5h-6h)含量下降。结论20μM白藜芦醇可有效抑制A549细胞侵袭,其机制可能是通过抑制ERK通路和PI3K-Akt通路中相关蛋白激活,最终降低MMP-2的分泌。
- 黄宁宇芦宏常丽君张红伟张灏李冠武
- 关键词：白藜芦醇
- 白藜芦醇对人食管癌EC109细胞的生长抑制及诱导凋亡作用被引量：4
- 2007年
- 背景与目的：探讨白藜芦醇（resveratrol,Res）抑制人食管癌EC109细胞生长、诱导凋亡的作用机制。材料与方法：不同浓度Res作用EC109细胞后,采用MTT法检测Res对人食管癌EC109细胞生长的抑制作用;Hoechst33258荧光染色和倒置相差显微镜观察EC109细胞的形态学改变;流式细胞术分析细胞周期分布和细胞凋亡。结果：Res（15.62-500μmol/L）可以抑制人食管癌EC109细胞的生长,且具有时间和剂量依赖性（r=0.918、0.996,P〈0.05、0.01）,500μmol/LRes作用72h后对细胞的生长抑制率可达87.43%。500μmol/LRes作用48h,荧光染色及相差显微镜下可见典型凋亡细胞形态学改变。细胞周期分析显示Res能诱导EC109细胞在S期停滞,抑制细胞DNA的合成并可明显诱导EC109细胞凋亡,凋亡率最高为62.3%。结论：Res可抑制人食管癌EC109细胞生长,引起细胞周期的S期阻滞,并诱导细胞凋亡。
- 孙雪平李冠武傅玉才温博贵
- 关键词：白藜芦醇食管癌细胞凋亡
- 食管癌p53基因突变的研究
- 1997年
- 应用非同位素PCR－SSCP方法分析30例食管瘤患者癌组织及相应癌旁组织p53基因第5～9外显子，结果发现8例癌组织存在p53基因突变；其中的4例为p53基因杂合性丢失（LOH）。部分癌旁组织亦检测到p53基因突变。实验结果表明，p53基因突变可能是食管癌癌变的早期遗传学损害，对食管癌的发生起重要作用。
- 邵根泽张少英任运生
- 关键词：P53基因基因突变食管肿瘤
