复旦大学药学院生物合成教研室
- 作品数：30 被引量：124H指数：7
- 相关作者：史济平文勇丁妍徐陶李增霞更多>>
- 相关机构：上海交通大学生命科学技术学院南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室同济大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项上海市科学技术委员会资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程轻工技术与工程更多>>
- 谷精草抑制α-葡萄糖苷酶活性成分研究被引量：7
- 2010年
- 研究谷精草中α-葡萄糖苷酶活性抑制成分。采用色谱技术分离鉴定了26个化合物,对所有分离得到的化合物都进行了抗α-葡萄糖苷酶活性的体外筛选试验。其中化合物决明内酯-9-O-β-D-葡萄糖苷(3)、万寿菊素(7)、1,3,6,8-四羟基-2-甲氧基口山酮(13)、万寿菊素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(19)显示出显著的抑制活性,IC50分别为106.7、8.73、56.6、80.4μM。
- 朱海燕叶冠
- 关键词：谷精草Α-葡萄糖苷酶抑制活性
- β-环糊精对甾体微生物羟化反应的影响
- 2011年
- 考察了β-环糊精(β-cyclodextrin,CD)对雄甾-4-烯-3,17-二酮(androst-4-ene-3,17-dione,AD)在水中的溶解度及微生物对其11α羟化反应的影响,结果表明β-环糊精能显著提高底物AD在发酵培养基中的溶解度,增溶效果优于有机溶剂。在底物投料浓度0.2%(w/v)时,与4%无水乙醇投料方式相比,8g/L CD能使AD转化率提高约10%,达到73.2%,并且使转化时间缩短至60h左右。在CD与AD的最佳摩尔比1:1的条件下,能使投料浓度提高至0.3%(w/v)。本研究采用ROESY对CD-AD包合物结构进行鉴定,结果表明甾体母核深入到环糊精笼形分子空腔内部,形成稳定的包合物。
- 叶丽张春燕周珮冯美卿
- 关键词：Β-环糊精金龟子绿僵菌
- 通过原生质体质粒转化提高Streptomyces actuosus诺西肽产量的研究被引量：3
- 2008年
- 研究利用大肠杆菌-链霉菌穿梭质粒pSE34,构建vhb基因的重组质粒pSEVhb,采用原生质体质粒转化法,将携带vhb的重组质粒转入诺西肽产生菌Streptomyces actuosus中,获得重组菌S.actuosus/pSEVhb。通过CO结合试验,证明VHb在重组菌中成功表达。限氧试验表明,重组菌S.ac-tuosus/pSEVhb诺西肽的的产量明显高于出发菌株。传代试验重组菌稳定,适合工业化大生产。
- 李继扬史训龙冯美卿万睿文勇刘晓会周珮
- 关键词：STREPTOMYCES
- 雄甾-4-烯-3,17-二酮11α羟化突变株Metarhizium anisopliae M28-203的代谢调控被引量：2
- 2011年
- 目的从营养代谢调控和转化条件控制两个方面入手提高雄甾-4-烯-3,17-二酮（androst-4-ene-3,17-dione,AD）11α羟化突变株Metarhizium anisopliaeM28-203转化效率。方法通过正交试验确定发酵培养基配方,对影响转化的一系列因素如：pH、发酵时间、通气量、底物投料量及溶解性、细胞通透性进行控制,考察以上因素对羟化反应的影响,确定最佳转化条件。结果该突变株培养基最佳配方为葡萄糖30 g/L、玉米浆20 g/L、蚕蛹粉5 g/L、硫酸铵2.5 g/L、磷酸氢二钾1 g/L、硫酸镁0.5 g/L和硫酸亚铁0.02 g/L。在pH 6.0~6.5、菌龄48~60 h2、50 mL摇瓶装液量为30和40 mL、转化时间72 h时能取得最佳转化效果。在底物投料量为2 mg/mL时,采用4%无水乙醇溶解底物或加入0.75 mg/mL Tween 80均有利于羟化反应,在以上优化条件下转化率分别达到62.5%和66.8%。结论突变株Metarhizium anisopliaeM28-203能有效地在AD上引入11α羟基,为工业生产依普利酮及其他甾体药物提供关键中间体。
- 叶丽周珮冯美卿
- 关键词：生物转化羟化反应代谢调控
- 液相色谱-质谱联用测定血液中茶碱浓度被引量：2
- 2009年
- 目的建立液相色谱-串联质谱（LC-MS／MS）快速灵敏分析血液中茶碱的定性定量方法。方法将0．1mL血液加入0．9mL乙腈沉淀蛋白后，直接取上清液5皿进样。LC-MS／MS采用ESI（＋）模式，应用多反应监测（MRS）方法检测。结果本方法的液相分离良好，峰形优异，整个液相循环在3min内完成。采用0．1mL血液，茶碱和咖啡因在20-1000μg·L^-1时呈良好的线性关系，最低检测限（LDD）均为10μg·L^-1。结论所建立的方法简便、快速、特异性强、灵敏度高，可同时分析茶碱的代谢物咖啡因，足以满足临床毒物分析和法庭毒物分析的需要。
- 李继扬向平
- 关键词：LC-MS/MS血液茶碱咖啡因
- 重组人载脂蛋白A-Ⅰ在毕赤酵母(Pichia pastoris)中的高表达被引量：3
- 2004年
- 高密度脂蛋白 (High densityLipoprotein ,HDL)是血浆中重要的脂蛋白 ,其主要成分为载脂蛋白AⅠ(ApoliproteinAⅠ ,ApoAⅠ为了大量制备该蛋白 ,首先尝试利用Pichiapastoris表达系统高效表达ApoAⅠ。通过PCR扩增获得天然含人载脂蛋白ApoAⅠ的基因片段 ,将其插入到P .pastoris分泌型载体pPIC9K上 ,BglⅡ酶切线性化后电转化P .pastorisGS115 ,将获得的 10 0 0多个转化子依次在含不同G4 1 8浓度的YPD平板筛选高抗性转化子 ,得到的2 2个高抗性转化子经甲醇诱导 ,SDS PAGE检测得到 6株高表达菌。然后对其中的高表达菌株AP16的培养及诱导条件进行了优化 ,结果显示 :接种后培养 2 4～ 2 8h ,转入诱导阶段 ,培养基pH值在 7～ 7 5 ,菌体密度OD6 0 0 =80左右 ,以 1%甲醇诱导 96h最有利于ApoAⅠ的表达 ,表达水平达 16 0mg L。 14L发酵罐结果显示表达水平与摇瓶相当 ,均高于其它表达系统 。
- 冯美卿蔡钦生宋大新钟江吴满平周珮
- 关键词：毕赤酵母
- D-氨基酸氧化酶在巴斯德毕赤酵母中的表达研究被引量：2
- 2004年
- 用分子生物学方法获得了D-氨基酸氧化酶(DAAO)的表达质粒(pPIC3.5k-DAAO),用其电转化巴斯德毕赤酵母GS115获得重组菌,经筛选获得高表达菌株PD27,并对其高密度培养和诱导条件进行了优化。PD27工程菌经250ml摇瓶发酵得到的DAAO活力达到2500～2600IU/L,在14L发酵罐中的表达水平优于其它表达系统。
- 冯美卿史训龙于建袁中一周珮
- 关键词：D-氨基酸氧化酶巴斯德毕赤酵母
- 源于珍稀濒危植物新天然活性成分的发现
- <正>研究和统计表明珍稀濒危植物代谢产生的天然产物结构多样性及其成药性远高于一般植物的平均水平。珍稀濒危植物宿主及其内生菌的次生代谢产物是发现具有新颖结构和独特作用机制的创新药物的重要来源,在国际上正引起高度重视。目前,...
- 熊娟胡长玲安多朋王立军麻光磊唐宇武喜营孟维珈杨国勋叶丽李继扬胡金锋
- 文献传递
- 热带假丝酵母产辅酶Q10发酵条件的研究被引量：2
- 2009年
- 目的以热带假丝酵母作为辅酶Q10的生产菌,研究不同的发酵条件对辅酶Q10产量的影响,以获得比较高的辅酶Q10产量。方法用酒精提取,用紫外分光光度法检测。结果葡萄糖是较好的碳源,大豆蛋白胨是较好的氮源,磷酸盐不同的比例对细胞生长及辅酶Q10合成的影响较显著,添加硫酸锰对辅酶Q10的合成有一定的促进作用。发酵初始pH8.0,接种量为4.0%,250mL三角瓶装液量为40mL,发酵时间为72h,葡萄糖4.0%,大豆蛋白胨5.0%,辅酶Q10产量达到70μg.mL-1。结论热带假丝酵母作为高产辅酶Q10菌种具有较好的实用性以及进一步提高产量的潜力和广阔的应用前景。
- 李继扬丁妍周珮
- 关键词：辅酶Q10发酵热带假丝酵母
- rHuGM-CSF体内、外的抗流感病毒实验研究
- 目的研究重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rHuGM-CSF)体内、外的抗流感病毒活性。方法体外实验以 MDCK 细胞为模型,采用 MTT 法检测药物对模型细胞的毒性浓度;以人抗凝静脉血中分离的外周血单个核细胞作为
- 黄海力弘周珮
- 关键词：流感病毒抗病毒作用
- 文献传递
