复旦大学基础医学院病原生物学系
- 作品数：73 被引量：155H指数：5
- 相关作者：庄义军刘红王小飞李雪萍邓宜红更多>>
- 相关机构：青岛农业大学动物医学院复旦大学上海医学院临床医学系浙江中医药大学医学技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>
- 导读与评议(2017年第6期)
- 2017年
- 精准医疗概念的提出开启了一个医学新时代,其实质包括精准诊断和精准治疗。张文宏课题组围绕结核病治疗中的精准医疗进行了阐述,涉及结核病的精准诊断,包括结核病的临床诊断及结核分枝杆菌的检测（分子检测及耐药检测技术等）、特殊人群的药理学参数与药物代谢相关的分子标记、针对病原体生命周期分子靶点的直接作用药物研发、通过正向调控或负向调控药物的使用实现宿主导向抗结核精准治疗.
- 瞿涤
- 关键词：导读结核分枝杆菌分子检测药物代谢结核病分子标记
- 鼠冠状病毒核衣壳蛋白的抗体制备与抗原决定簇分析被引量：3
- 2017年
- 核衣壳(nucleocapsid,N)蛋白有稳定病毒基因组、调控病毒复制及细胞状态的特殊作用。鼠肝炎病毒(murine hepatitis virus,MHV)为乙型冠状病毒属的原型病毒,是研究冠状病毒N蛋白功能的经典模型。本研究用去污剂处理鼠冠状病毒粒子暴露N蛋白,另用原核表达纯化的重组N蛋白分别免疫小鼠,制备多克隆及单克隆抗体。酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和蛋白免疫印迹分析结果显示两类抗体均具有高灵敏度和特异度,与甲型冠状病毒猪传染性胃肠炎病毒(porcine transmissible gastroenteritis virus,TGEV)的N蛋白无交叉反应。原核表达缺失突变的N蛋白分析结果显示,多克隆抗体与单克隆抗体2E6识别的鼠冠状病毒N蛋白抗原决定簇完全一致,位于N端结构域(N-terminal domain,NTD)C端与SR之间的58个氨基酸残基内。此外,基于单克隆抗体2E6的ELISA及免疫荧光法能检测到感染细胞中和培养上清液中的N蛋白组分,且其含量与病毒复制的滴度一致。这些结果表明,鼠冠状病毒复制过程中粒子与细胞中的N蛋白可能维持相似的结构,使NTD与SR之间的部分氨基酸残基一直暴露在表面,从而形成了优势抗原决定簇。
- 郭佳慧文荣王玉燕张浩旸刘红徐娅佳叶荣
- 关键词：核衣壳蛋白抗体抗原决定簇
- 肠道菌群失衡与非酒精性脂肪性肝病之间的关系被引量：24
- 2017年
- 近年来，随着生活水平的提高，非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）发病率逐渐上升，普通人群发病率为15％-30％，肥胖患者发病率达50％～90％。关于NAFLD的致病机制，“二次打击”学说已得到广泛认可。随着研究深入，人们发现肠道菌群失调可通过增加机体能量吸收、破坏肠黏膜屏障、产生大量毒性代谢产物等方式促进NAFLD的进展。这为揭示NAFLD的发病机制、探索有效治疗方法提供了新切入点。据此，就肠道菌群失调在NAFLD发生、发展过程中的作用做一简要概述。
- 马明剑吴健
- 关键词：脂肪肝肠道菌群失调能量代谢肠黏膜通透性
- 肠球菌属生物膜表型和基因型相关性分析被引量：4
- 2020年
- 目的了解肠球菌属生物膜形成能力及其毒力基因携带率,分析生物膜的形成能力与毒力基因间的相关性。方法收集复旦大学附属华山医院2015-2017年临床分离自无菌体液的肠球菌属细菌,使用结晶紫染色法测定肠球菌的生物膜形成能力并进行形成能力的强弱分级,采用PCR方法筛查7种常见的肠球菌毒力基因以及Fsr群体感应系统基因(fsrA、fsrB、fsrC)。结果共收集了112株肠球菌菌株,其中粪肠球菌52株,屎肠球菌60株;两者生物膜形成的阳性率分别为63.46%和13.33%,差异具有统计学意义(P<0.001)。52株粪肠球菌毒力基因携带率分别为:esp 40.38%、gelE 69.23%、sprE 73.08%、asa157.69%、cylA 46.15%、cylB 48.08%、cylM 50.00%、fsrA 40.38%、fsrB 42.31%、fsrC 80.77%,携带esp、asa1、cylA、cylB、cylM和fsrB基因的菌株更易形成生物膜。60株屎肠球菌毒力基因携带率分别为:esp 65.00%、gelE 10.00%。结论粪肠球菌比屎肠球菌更容易形成生物膜;多种毒力基因与生物膜形成相关,提示生物膜的形成并不是由单一基因调控,而是由多个基因多系统调控。
- 丁丽吴旸李培林东昉
- 关键词：肠球菌生物膜毒力基因
- 上海社区老年人抑郁与认知状况的相关性研究被引量：4
- 2021年
- 目的研究社区居家养老老年人抑郁状况及其与认知障碍的关系。方法本研究于2020年4月9日-6月15日间,选取842例上海某社区健康体检老年人为研究对象,用老年抑郁量表(GDS)评估其抑郁状态,用简易智力状态检查量表(MMSE)评估其认知功能。结果分析发现,抑郁组的MMSE得分下降(P=0.005),表明抑郁与认知功能障碍之间存在相关性。进一步分析MMSE量表中各个分项的情况,发现对认知功能影响较大的三个方项分别是延迟回忆、视空间知觉和书写能力,抑郁组和正常组在MMSE量表中上述三个方面的得分差异率分别为30%、21%和16%。结论在社区居家养老老年人健康体检中常规设置心理健康量表检查,有利于早期发现认知功能障碍患者,可为必要的早期健康教育和指导提供依据。
- 顾红琴刘涛管成功荣星喻王雅萍施美芳邹政赵超
- 关键词：老年抑郁症量表
- 导读与评议(2017年第5期)
- 2017年
- 正常人肠道内寄居着种类繁多的微生物,称为正常菌群。正常菌群间互相制约或依存,形成种类和数量相对平衡的状态。然而,在一定条件下如机体抵抗力下降或长期应用广谱抗生素,可因某些细菌大量繁殖,导致肠道菌群失调。测序、蛋白质组和转录组分析等组学研究技术的发展,进一步推动了肠道菌群的研究,人们开始关注和重视肠道菌群对宿主健康及疾病的影响。
- 瞿涤
- 关键词：大脑结构正常菌群脑功能肺炎克雷伯菌广谱抗生素禽流感病毒
- 肠道菌群与相关疾病被引量：5
- 2017年
- 近年来肠道菌群的研究发展迅速,肠道菌群对宿主消化、代谢和免疫功能的影响逐渐被人们所熟知并重视。大量研究提示,肠道菌群的改变可能引发代谢、肝脏和肠道等方面的多种相关疾病。因此,研究肠道菌群对宿主健康及疾病的影响尤为重要,也能为预防和治疗肠道菌群相关疾病提供建议。
- 曹蕾吴健
- 关键词：肠道菌群代谢性疾病酒精性肝病非酒精性脂肪性肝病炎症性肠病
- 丙型肝炎病毒感染过程中其NS3/4A蛋白酶切割线粒体抗病毒信号蛋白的动态过程
- 2017年
- 已知丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)可通过其蛋白酶NS3/4A切割线粒体抗病毒信号蛋白(mitochondrial antiviral signaling protein,MAVS)来逃逸天然免疫识别,但尚不清楚其切割动力学及切割在抑制干扰素中的作用。本研究旨在细胞模型中探讨HCV感染过程中病毒复制建立及病毒NS3/4A切割MAVS的动态过程,探究NS3/4A切割MAVS对病毒逃逸宿主天然免疫建立感染的贡献。首先构建基于绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的MAVS切割报告系统(GFP-NLS-MAVS-TM462),用HCV Jc1-Gluc感染Huh7.5/GFP-NLS-MAVS-TM462细胞。结果显示,病毒复制早期MAVS切割效率较低;NS3/4A高效切割MAVS发生于HCV复制晚期,且其切割效率与NS3蛋白水平相关。利用带有GFP ypet的HCV报告病毒Jc1-378-1感染Huh7.5/RFP-NLS-MAVS-TM462细胞,在单细胞水平观察HCV感染阳性细胞中MAVS被切割情况,发现HCV复制细胞中仅部分细胞MAVS被切割。进一步研究发现,不同基因型NS3/4A切割MAVS的效率仅与NS3表达水平相关。以上结果提示,HCV蛋白酶NS3/4A切割MAVS依赖NS3/4A蛋白在病毒复制过程中的累积,对在病毒复制早期逃逸宿主天然免疫建立感染可能无显著贡献。
- 许军杜晓婷张扬袁正宏易志刚
- 地铁车站耐药葡萄球菌检测
- 本课题以地铁车站为研究对象,调查耐药葡萄球菌在公共交通系统中的传播情况,对比医院及公园葡萄球菌的检测情况,评估与研究上海地铁车站耐药葡萄球菌的生物特性.结果显示地铁空气中细菌平均对2.64种抗生素耐药,并且58.0％的菌...
- 周峰王玉燕
- 关键词：葡萄球菌耐药菌株生物特性
- 文献传递
- 刚地弓形虫棒状体蛋白ROP16对小鼠脑神经细胞凋亡的影响被引量：5
- 2017年
- 目的构建带有Flag标签的刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)棒状体蛋白16(ROP16)的重组慢病毒表达质粒,并检测ROP16蛋白在神经细胞中的表达及其对小鼠脑神经细胞凋亡的影响。方法PCR扩增带Flag标签的ROP16基因,克隆至慢病毒载体,构建重组质粒p CDH-cop GFP-ROP16-Flag,转化至大肠埃希菌(Escherichia coli)DH5α感受态细胞,采用PCR、双酶切及测序验证。将重组质粒转染至人胚胎肾上皮细胞(293T细胞)中进行慢病毒包装,以p CDH-CMV-cop GFP空质粒对照组,荧光显微镜下观察绿色荧光表达情况,并计算慢病毒滴度。将包装后的慢病毒感染人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y),采用蛋白质印迹(Western blotting)检测ROP16蛋白的表达情况。应用立体定位注射技术将慢病毒浓缩液注射至小鼠前额叶皮层M1区,2周后取小鼠脑组织,制备冰冻切片,TUNEL染色后,荧光显微镜下观察小鼠脑神经细胞凋亡情况。结果重组慢病毒表达质粒p CDH-cop GFP-ROP16-Flag经PCR和双酶切后均获得大小为2 200 bp的条带,与预期值相符;测序结果与刚地弓形虫RH株ROP16基因(Gen Bank登录号为GQ249093.1)序列比对完全一致。包装后的慢病毒在荧光显微镜下可见绿色荧光,滴度约为2E+8 TU/ml。Western blotting分析结果显示,在相对分子质量(Mr)120 000处有特异条带,重组慢病毒表达质粒能够在SH-SY5Y细胞内表达ROP16蛋白。感染慢病毒的小鼠脑组织冰冻切片经TUNEL染色后,荧光显微镜下可见实验组凋亡的细胞明显多于空质粒对照组。结论构建的慢病毒表达质粒p CDH-cop GFP-ROP16-Flag可在神经细胞内表达ROP16蛋白,并可导致小鼠脑神经细胞凋亡。
- 高德俊常爽单秀梅范巍巍毛佐华
- 关键词：刚地弓形虫脑神经细胞凋亡
