天津科技大学生物工程学院工业发酵微生物教育部重点实验室
- 作品数:235 被引量:1,023H指数:15
- 相关作者:李胜元郭刚吴国营巴兆粉何逵夫更多>>
- 相关机构:福州大学生物科学与工程学院福州大学生物科学与工程学院福建省海洋酶工程重点实验室塔里木大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程生物学化学工程医药卫生更多>>
- 枯草芽胞杆菌基因组删减对异源酶表达影响的研究进展被引量:2
- 2021年
- 枯草芽胞杆菌作为一种遗传背景清晰、基因编辑成熟的革兰氏阳性菌,是多种重要工业酶的生产宿主。随着转录组、蛋白质组、代谢组等多组学测序和分析技术的发展,通过合理设计简化枯草芽胞杆菌基因组,减少细胞内冗余的调控和代谢网络,使得细胞更精简且便于控制,展现出了枯草芽胞杆菌作为异源酶表达宿主细胞的应用潜力。本文简要综述了枯草芽胞杆菌基因组删减的研究进展,归纳了必需基因的确定方法,重点介绍了枯草芽胞杆菌通过删减基因组提升异源酶表达的研究进展及删减策略,充分展示了枯草芽胞杆菌基因组删减在构建异源酶表达底盘细胞中的重要作用。
- 张金方李昕悦徐小健陈雪佳牛馨任绍东李玉路福平
- 关键词:枯草芽胞杆菌必需基因
- 腈基水解酶在3-羟基丙酸合成中的应用
- <正>3-羟基丙酸(3-hydroxypropionic acid,3-HP)是一种重要的生物基材料,用于合成生物可降解热塑性聚酯(PHA)等工业产品及1,3-丙二醇等化工产品。2004年8月,美国能源部报告将3-HP列...
- 于珊珊姚培圆袁京冯进辉王敏吴洽庆朱敦明
- 文献传递
- LEU1基因缺失对酿酒酵母高级醇生成量的影响被引量:10
- 2015年
- LEU1基因编码异丙基苹果酸合成酶,为了研究该基因对酿酒酵母高级醇生成量的影响,以酿酒酵母AY15单倍体A8为出发菌株,通过构建重组质粒p UC-LABK获得LA-Kan MX-LB重组盒,并利用醋酸锂转化法和同源重组技术,筛选出LEU1基因缺失的突变株A-L9。将突变株和亲本菌株分别进行酒精发酵实验,发酵结束后进行发酵性能和高级醇生成量的测定。两种发酵条件下的实验结果表明,与亲本菌株相比,突变株的正丙醇生成量分别提高了0.18倍和0.47倍,异丁醇的生成量分别提高了0.52倍和1.58倍,而异戊醇的生成量则分别降低了0.29倍和0.51倍。
- 石钰陈叶福肖冬光
- 关键词:微生物酿酒酵母高级醇
- 氟化天然产物生物合成的研究进展被引量:1
- 2021年
- 氟元素是一种具有特殊性质的卤素,含氟有机物可广泛应用于生物有机化学、药物化学和生物材料科学等领域。尽管C-F键的合成方法有所创新,但将氟元素掺入到结构复杂的生物活性分子中的方法较少,因此选择性的氟化仍极具挑战性。本文从自然界中氟化天然产物及氟化酶的发现、氟化天然产物的合成通路、氟化天然产物合成机制的意义、氟化酶的进化及氟化物的合成、氟化酶和氟化物的应用等方面进行综述,希望可以为氟化物的生物法合成领域提供信息参考,推进氟化物生物法合成的工业化进程。
- 任思羽程新宽张宇辉庄建文马龙
- 关键词:生物合成
- BAT基因改造对酿酒酵母高级醇生成量的影响被引量:14
- 2016年
- 酿酒酵母BAT基因编码支链氨基酸转氨酶,其中BAT1和BAT2基因分别编码线粒体和细胞质氨基酸转氨酶,位于细胞不同的位置导致二者的生理功能有所差异,BAT1基因在线粒体中倾向催化α-酮酸合成氨基酸,细胞质中的BAT2基因将氨基酸转化为α-酮酸,通过敲除BAT2以减少α-酮酸合成,过表达BAT1以增加α-酮酸消耗达到降低酿酒酵母高级醇的合成的目的。本研究以酿酒酵母AY15单倍体α5为出发菌株,结合融合PCR技术构建重组质粒p UC-BABPB1K,获得BA-PGK-BAT1-BB重组盒,并利用醋酸锂转化法和同源重组技术筛选出缺失BAT2基因同时过表达BAT1基因的突变株B-8,将其和亲本菌株α5、BAT2基因缺失菌株α5ΔBAT2进行酒精发酵实验,发酵结束后进行发酵性能和高级醇的测定。实验结果表明,与亲本菌株相比,异丁醇降低了25%,异戊醇降低了15%,活性戊醇降低了30%;与α5ΔBAT2菌株相比,异丁醇提高了0.5倍,异戊醇增加了0.1倍,活性戊醇增加了0.3倍。
- 刘芳志张翠英李维刘学强肖冬光
- 关键词:酿酒酵母高级醇融合PCR
- 水溶性纤维素在乳品中的应用及检测方法建立被引量:1
- 2013年
- 在乳制品中添加10 g/L^30 g/L低能量、无糖的特殊碳水化合物-水溶性纤维素,部分地替代糖和脂肪,满足人体对膳食纤维的需求;采用高效液相色谱示差折光检测,以水作流动相,进样量20μL,在流速0.5 mL/min下,直接测定乳制品中的可溶性膳食纤维含量。结果表明:6次平行实验的精密度和稳定性相对标准偏差分别为1.3%和0.74%,回收率在95%~106.3%之间。该方法简单、准确、快捷,适合于乳制品中水溶性膳食纤维含量的测定。
- 王春霞昝文汀刘昊川梅凡朱占涛高云飞张朝正李胜元
- 关键词:聚葡萄糖可溶性膳食纤维高效液相色谱
- 贝莱斯芽孢杆菌抑尖孢镰刀菌脂肽类物质的鉴定被引量:13
- 2021年
- 为探究贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)P9对于尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)具有拮抗作用的主要活性成分,采用酸沉淀法和有机溶剂沉淀法提取菌贝莱斯芽孢杆菌P9发酵液中的脂肽类抗生素粗提物,研究粗提物对尖孢镰刀菌的抑菌活性。利用多功能制备液相仪对其组分进行分离,确定具有抑菌活性的组分,并利用高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱联用(HPLC-Q-TOF-MS)仪对具有抑菌活性的组分进行鉴定。结果表明,脂肽类抗生素粗提物对尖孢镰刀菌有良好的抑菌作用,且酸沉淀法得到的粗提物抑菌活性较高,从中共分离到7种组分(编号为1^(#)~7^(#)),其中4种组分具有抑菌作用,经鉴定,组分2^(#)为C_(15)SurfactinA或C_(16)SurfactinB或C_(15)SurfactinC,组分4^(#)、6^(#)、7^(#)分别为C_(15)BacillomycinD、C_(14)BacillomycinD、C_(16)BacillomycinD。
- 郭蔓张朝正赵华
- 关键词:尖孢镰刀菌
- 芽胞形成相关基因缺失对解淀粉芽胞杆菌生物量及胞外酶表达的影响被引量:2
- 2021年
- 解淀粉芽胞杆菌作为公认的安全生产宿主菌(GRAS),在高效表达异源蛋白方面具有巨大的发展潜力和应用前景。本研究以解淀粉芽胞杆菌TCCC111018为出发菌株,通过敲除芽胞形成相关基因(spo0A,sigF和sigE),构建了一系列突变菌株(BAΔspo0A,BAΔsigF,BAΔsigE),并对突变株生物量和胞外酶表达量进行分析比较。结果表明,与出发菌株BAΔupp相比,菌株BAΔspo0A的生物量及胞外酶表达量显著降低,BAΔsigE无明显变化,而菌株BAΔsigF的生产性能有显著提升,菌体生长的稳定期延长约6 h,产酶时间提前,耐酸性α-淀粉酶与碱性蛋白酶酶活分别提高了25.2%和21.3%,该菌株的成功构建为工业酶生产宿主提供了新的选择,也为异源酶的高效生产提出了一种新的策略。
- 李昕悦张金方徐小健路福平李玉
- 关键词:生物量耐酸性Α-淀粉酶碱性蛋白酶
- 大肠杆菌sdaA、sdaB,pgpB基因的敲除及其对磷脂酰丝氨酸合成的影响
- 2013年
- 利用Red同源重组技术敲除大肠杆菌sdaA、sdaB和pgpB基因,阻断大肠杆菌磷脂酰丝氨酸合成途径中的底物L-丝氨酸和磷酸乙醇酸的部分分解代谢,以达到提高磷脂酰丝氨酸在菌体内含量的目的。将出发菌株和重组菌株进行摇瓶发酵,发酵1 000 min后,采用高效液相色谱法分析磷脂酰丝氨酸的产量。试验结果表明sdaA、sdaB、pgpB基因敲除后,磷脂酰丝氨酸在菌体总磷脂中的含量提高了一倍多,说明通过基因工程手段改变大肠杆菌中磷脂酰丝氨酸合成的部分代谢途径,初步获得磷脂酰丝氨酸产量提高的菌株,具有较好的应用前景。
- 佟新伟杨泓喆李玉路福平
- 关键词:大肠杆菌基因敲除磷脂酰丝氨酸RED重组系统
- 酿酒酵母枸杞发酵物抗氧化性能研究被引量:5
- 2017年
- 以编号为TJKD01~TJKD21的酿酒酵母和宁夏枸杞为原料,以多糖为主要指标,筛选获得了一株能够提高多糖含量的酿酒酵母。检测发酵前后主要成分多糖、多酚、黄酮、类胡萝卜素的含量变化,并用DPPH自由基清除法、邻二氮菲-Fe^(2+)氧化法和邻苯三酚自氧化法考察枸杞发酵物的抗氧化性能变化。试验结果表明,编号为TJKD08的酿酒酵母发酵可以提高多糖和多酚含量。发酵后多糖和多酚含量分别提高了27.6%和77.8%。发酵后DPPH自由基IC_(50)由0.78 g/L变为0.43 g/L,羟自由基IC_(50)由14.1 g/L变为8.2 g/L,超氧阴离子自由基IC_(50)由7.7 g/L变为5.4 g/L,抗氧化能力得到提高。
- 宋明辉桑娜乔长晟
- 关键词:枸杞发酵抗氧化性能