华南农业大学兽医学院农业部兽用疫苗创制重点实验室
- 作品数：60 被引量：186H指数：8
- 相关作者：李静怡陈筱薇王文华李娇梁艺瑜更多>>
- 相关机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室南方医科大学检验与生物技术学院更多>>
- 发文基金：国家肉鸡产业技术体系建设专项广东省科技计划工业攻关项目公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 惠阳胡须鸡禽白血病病原学调查及受体基因遗传多态性分析
- 为了解广东省地方品系鸡——惠阳胡须鸡禽白血病(AL)的感染情况以及病毒受体基因遗传多态性,本研究从广东省7个惠阳胡须鸡养殖场共采集抗凝血1728份,经处理后同时接种DF-1细胞和CEF细胞进行病毒分离,共分离出了48个E...
- 陈杨一骏张杰严立福赵子君陈建曹伟胜
- 关键词：禽白血病病原学受体基因遗传多态性
- 种禽场A亚群禽白血病病原学调查及分离株遗传进化分析
- 为了解广东地区种禽场A 亚群禽白血病病毒(ALV-A)流行情况,本研究从A、B、C、D 4 个种禽场共采集1561 份血浆样品,接种DF-1 细胞7d 后,取上清进行p27 抗原ELISA 检测,共检出71 份阳性样品,...
- 冯敏谭利强代曼曼郝建勇秦建如黄小容廖明曹伟胜
- 关键词：种禽场全基因序列
- Ⅱ群禽腺病毒pⅢa基因的原核表达及抗原性分析
- 2013年
- 为了研究Ⅱ型禽腺病毒pⅢa基因的抗原性,试验根据Ⅱ型禽腺病毒火鸡出血性肠炎病毒(HEV)VAS株的全基因序列(GenBank序列号为AY849321.1)设计了1对引物,采用PCR扩增出pⅢa的完整基因,将其连接到质粒表达载体pET-32a(+),获得的阳性克隆命名为pET-32a-pⅢa,再将pET-32a-pⅢa转化至E.coil BL21(DE3),经37℃、1.0 mmol/L IPTG诱导表达5 h,应用SDS-PAGE分析超声裂解后的上清液和沉淀。结果表明:目的蛋白以可溶性蛋白形式存在,蛋白分子质量约为76 ku,目的蛋白具有较好的抗原活性。
- 刘雪美秦建如赵海燕李育豪曹伟胜
- 关键词：原核表达抗原性分析
- P13K/AKT信号转导通路在ALV-J感染中作用的初步研究
- 为探讨ALV-J在宿主细胞中复制与P13K/AKT信号转导通路的关系，将血管瘤病变型ALV-J毒株HN06和骨髓瘤病变型ALV-J毒株NX0101分别感染DF-1细胞，通过WESTERN BLOT和REAL-TIMEPC...
- 关键词：J亚群禽白血病病毒P13K/AKT
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- J亚群禽白血病病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立被引量：8
- 2013年
- 本研究利用J亚群禽白血病病毒(subgroup J avian leukosis virus,ALV-J)gp85单因子血清纯化后的抗体成功建立了检测ALV-J抗原的双抗体夹心ELISA方法(DAS-ELISA)。结果表明,该方法具有良好的特异性、重复性和稳定性,对ALV-J抗原的最小检出量为0.165μg/mL。用该法对48份临床血浆样品进行检测,结果与PCR方法的符合率达到85.2%。
- 廖亚琳梁艺瑜王秀珑冯敏谭利强曹伟胜
- 关键词：双抗体夹心ELISA
- 不同样品对黄羽种鸡禽白血病病毒净化检测效果的影响被引量：7
- 2015年
- 【目的】评估黄羽种鸡禽白血病的净化工作,比较源于同一鸡群不同样品对禽白血病病毒（ALV）检测结果的影响.【方法】采用ALV抗原ELISA方法对广东一黄羽种鸡场采集的2 691枚种蛋进行检测,根据检测结果采集其中70份不同S/P区间所对应的母鸡抗凝血,分离血浆后分别同时接种于CEF和DF-1细胞,用病毒分离方法进行检测,并用PCR方法进行亚群鉴定.【结果和结论】从送检种蛋蛋清共检出ALV p27阳性样品243份,阳性率为9.03%（243/2 691）;蛋清不同ELISA S/P区间所对应的病毒分离情况分别为：蛋清ELISA S/P≥2.0的鸡只其血样CEF和DF-1细胞病毒分离率均为100%;1.5≤S/P〈2.0的鸡只病毒分离率均为88.9%;1.0≤S/P〈1.5的鸡只病毒分离率均为85.7%;0.2≤S/P〈1.0的鸡只病毒分离率分别为60%-75%（CEF）和40%-50%（DF-1）;0.1≤S/P〈0.2的鸡只病毒分离率为62.5%（CEF）和50%（DF-1）;S/P〈0.1的鸡只分别为27.2%（CEF）和9.1%（DF-1）的病毒分离率.PCR结果显示,所有7份CEF＋DF-1-的CEF培养物中有6份为内源性ALV-E.研究表明,在蛋清ELISA检测时,S/P越高的阳性蛋清样品其对应母鸡越可能是外源性ALV病毒血症阳性;有一定比例S/P较低的阳性蛋清样品是由对应母鸡体内的内源性ALV排毒所致;而净化初期少数蛋清S/P为阴性的蛋清,其对应母鸡仍可能检出外源性ALV,说明在黄羽种鸡外源性ALV净化方案中单独使用1次蛋清ELISA检测可能会给禽白血病的净化检测造成一定的“误诊”和“漏检”.
- 郝建勇秦建如邱倩倩袁丽霞饶明章廖明曹伟胜
- 关键词：黄羽种鸡禽白血病病毒病毒检测
- 两株H6N2亚型鸡源禽流感病毒的分离鉴定被引量：2
- 2012年
- 本研究利用血凝抑制试验(HI)、反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)、基因测序等方法,对广东省某活禽交易市场进行流行病学调查时获得的两株非H5、H9亚型禽流感病毒65株和C7株进行了亚型鉴定。结果表明这两株病毒均具有血凝活性,且能被抗H6亚型禽流感病毒标准阳性血清特异性抑制。用针对禽流感病毒的M基因、H6亚型禽流感病毒HA基因、N2亚型禽流感病毒NA基因特异性鉴定引物对65株和C7株进行RT-PCR扩增,分别获得特异性目的片段。测序及BLAST分析表明两株分离株与H6N2亚型禽流感广东分离株的HA基因和NA基因核苷酸序列相似性均高达95%以上。将该两分离株鉴定为H6N2亚型禽流感病毒,并命名为A/Chicken/Guangdong/65/2009、A/Chicken/Guangdong/C7/2009。
- 贾宝琴焦培荣韦良孟单芬袁润余徐成刚廖明
- 关键词：禽流感病毒
- 地方鸡种K亚群禽白血病病毒的分离及遗传鉴定
- 引言禽白血病是由禽白血病病毒(Avian leukosis virus,ALV)引起的一种传染性肿瘤病。外源性ALV尤其是J亚群ALV(ALV-J)的流行,已给我国养禽业造成了严重的经济损失。ALV不仅亚群多,而且变异大...
- 郝建勇秦建如邱倩倩廖明曹伟胜
- 蛋清样品用于禽白血病病毒分离的效果评估被引量：10
- 2014年
- 为评估蛋清样品在禽白血病病毒(ALV)分离中的作用,从广东某地方鸡种群采集种蛋1673个,经ALV p27抗原ELISA检测,将阳性蛋清分为5个不同S/P值区间(A≥2.0,1.5≤B<2.0,1.0≤C<1.5,0.5≤D<1.0,0.2≤E<0.5)并设立对照区间(F<0.2),分别同时接种DF-1细胞和CEF细胞进行病毒分离,通过PCR方法对其中20份DF-1细胞培养物p27抗原阳性样品进行亚群鉴定。从送检种蛋蛋清共检出ALVp27阳性样品107份,阳性率为6.4%(107/1673);不同S/P值区间蛋清病毒分离情况分别为:A区间CEF和DF-1细胞病毒分离率均为100%(27/27);B区间为80%(16/20,CEF)和75%(15/20,DF-1细胞);C区间为55.6%(10/18,CEF)和33.3%(6/18,DF-1细胞);D区间为36.4%(8/22,CEF)和9.1%(2/22,DF-1细胞);E区间为5%(1/20,CEF)和0%(0/20,DF-1细胞);对照组F区间为8.3%(1/12,CEF)和0%(0/12,DF-1细胞)。PCR结果显示,20份样品中均有ALV-J感染,其中6份为ALV A&J共感染。结果表明从蛋清样品可以分离出外源性和内源性ALV;从ALVp27抗原ELISA高S/P值的蛋清易分离出外源性ALV;低S/P值的阳性蛋清样品很可能是由内源性ALV引起,这给临床上禽白血病的净化检测造成一定的"误诊";该地方鸡种群不仅存在至少两个亚群外源性ALV,也有内源性ALV。
- 郝建勇徐海娈秦建如邱倩倩廖明曹伟胜
- 关键词：禽白血病蛋清病毒分离
- 浅析禽用活毒疫苗污染外源病毒问题被引量：2
- 2016年
- 疫苗的预防接种是目前有效控制家禽疫病的重要手段之一。然而被污染的疫苗不仅不能控制疾病,反而会加速疾病的传播。在许多地方,现在仍然有一些疾病通过污染的疫苗进行传播。由于疫苗生产原材料如组织、细胞基质、血清和胰蛋白酶等来源于动物,因此疫苗产品存在外源病毒污染的风险。通过分析过去禽用活毒疫苗污染外源病毒的事件,发现禽用活毒疫苗中污染禽白血病病毒、网状内皮组织增生症病毒和鸡传染性贫血病毒较为多见。本文就禽用活毒疫苗污染外源病毒产生的危害、历史与现状及疫苗外源病毒检测技术的优点和局限性等进行了综述,并提出了减少禽用活毒苗外源病毒污染的建议措施。
- 饶明章袁丽霞赵子君张杰陈建陈杨一骏邱倩倩曹伟胜
- 关键词：活毒疫苗外源病毒污染
