南京大学医学院江苏省医学分子技术重点实验室
- 作品数：39 被引量：111H指数：6
- 相关作者：陈佳萍魏继武夏海燕李天凤孙晶更多>>
- 相关机构：南京医科大学鼓楼临床医学院南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学生物技术重点实验室南京师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金南京市医学科技发展项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学轻工技术与工程更多>>
- 先天性心脏病患者CHD7基因突变的研究被引量：1
- 2008年
- 目的筛查先天性心脏病（congenital heart disease，CHD）患者CHD7（chromodomain helicase DNA-binding protein gene）基因的胚系突变，探讨其在先心病发生中的作用。方法采集67例临床确诊的CHD患儿、100名正常对照的外周静脉血，提取白细胞基因组DNA，PCR扩增C1-h97基因，变性高效液相色谱分析技术对PCR产物进行突变筛选，出现异常峰型的扩增片段进行DNA测序，明确突变位点和类型，并进一步结合病例对照和生物信息学分析探讨变异的功能意义。结果67例先心病患者中共检出7种单碱基的替换，位于CHD7的不同内含子。其中，IVS11＋127A〉G和IVS12＋21T〉G的等位基因频率均为0．0075，为罕见变异；而Ⅳs2＋34G〉A、IVS4＋39G〉A、IVS12—5T〉C和IVS16＋51C〉A等位基因频率为0．2635、0．2156、0．1505、0．3636，属于单核苷酸多态性；IVS12—5T〉C在CHD组的检出频率显著低于正常对照组（5．42％VS9．57％，P〈0．05）；而IVS14—35C〉G则仅见于CHD患儿。生物信息学分析显示，IVS12—5T〉C替换具有增强外显子剪切的效应。结论CHD7基因单核苷酸多态性变异IVS12—5T〉C对CHD的发生可能具有保护作用，而CHD7基因的突变并不是构成散发性先天性心脏病的主要原因。
- 齐秋锋易龙杨驰陈慧梅沈力莫绪明胡娅莉王亚平
- 关键词：先天性心脏病变性高效液相色谱突变
- 脂肪组织棕色化与动脉粥样硬化的关系研究进展被引量：1
- 2023年
- 脂肪组织棕色化会影响动脉粥样硬化的进展。本综述首先介绍环境温度改变对动脉粥样硬化的影响,接着介绍多种方法诱导脂肪组织棕色化对动脉粥样硬化的影响,最后介绍铁代谢在脂肪组织棕色化中的作用以及通过铁代谢调节脂肪组织棕色化治疗动脉粥样硬化的新思路,总结了脂肪组织棕色化与动脉粥样硬化的关系研究进展。
- 张猛赵洪婷姚永忠
- 关键词：动脉粥样硬化铁代谢异常
- Heph基因与Cp基因在小鼠海马中扮演着不同的角色
- 海马是人类记忆和学习的重要功能区域,它的铁代谢平衡受到精密的调控,但是学界对其中的详细机理仍知之甚少.Hephaestin (Hp)和Ceruloplasmin (Cp)是海马中两种重要的多铜亚铁氧化酶,其功能是协助Fe...
- 郑嘉烁邢方刘国豪陈惠君
- 微囊藻毒素-LR污染饮水的健康风险及其机制被引量：2
- 2013年
- 水体富营养化导致藻类繁殖和水华暴发从而使得藻类释放大量藻毒素,已经演变成为严重的公共卫生问题之一。微囊藻毒素通过饮水严重危害动物和人类的健康安全,最主要的靶器官是肝脏,从而造成肝细胞功能缺陷,比如黄疸和磷酸化活性改变。这些毒性效应主要表现为对磷酸酶的抑制和蛋白磷酸酶活性的调节。综上,微囊藻毒素会造成组织结构损伤、凋亡,即使在低浓度下,也会影响细胞周期,导致肿瘤发生。
- 李天凤曹裕唐松林葛晓龙陈慧梅徐力致王亚平
- 关键词：微囊藻毒素肝脏毒性生殖毒性蛋白磷酸酶
- cnksr2基因干扰腺病毒的构建及鉴定
- 2013年
- 构建小鼠cnksr2基因干扰腺病毒质粒载体并加以鉴定.根据小鼠cnksr2基因序列设计cnksr2干扰序列引物,定向克隆至穿梭载体pshuttle-H1的BglⅡ和HindⅢ位点,PmeⅠ酶切线性化的pShuttle-H1-Sicnksr2干扰质粒,并与腺病毒载体(pAdEasy-1质粒)共同转化E.coli BJ5183感受态细菌,产生重组腺病毒载体.用PacⅠ酶切线性化的回收质粒,转染293A细胞,包装腺病毒颗粒,在倒置显微镜下观察细胞病理性变化(Cell pathological effect,CPE),用TCID50法测定病毒颗粒的浓度,并初步观察病毒感染PC12细胞对目的基因的干扰效率.经酶切鉴定、测序证实成功构建小鼠cnksr2基因干扰腺病毒载体.包装的腺病毒浓缩悬液滴度为3.98×107PFU/mL.cnksr2在大鼠及小鼠中具有保守性,该病毒能在大鼠来源的PC12细胞中成功表达,并且对cnksr2基因干扰效率达50%以上.结论:成功构建了小鼠cnksr2基因的干扰腺病毒载体.
- 梁金沈宁徐康李朝军薛斌
- 关键词：腺病毒
- 小鼠frataxin抗体的制备及应用
- 2013年
- 弗里德赖希共济失调(Friedreich ataxia,FRDA)是一种常染色体隐性遗传性疾病,由frataxin(FXN)第一个内含子中GAA重复扩增导致其表达量减少所致。FXN是一种线粒体蛋白,可以调节细胞中铁的代谢,参与铁硫簇和血红素的合成,去除氧化应激等。前期研究发现FRDA病人受累组织有特异性表达的FXN亚型蛋白。为了检测小鼠不同组织中Fxn亚型蛋白的表达,首先要获得具有高度特异性和灵敏性的小鼠Fxn抗体。利用PCR技术扩增小鼠Fxn基因,通过酶切、连接、转化等常规分子克隆方法构建重组原核表达质粒pET24(+)-mFxn,经转化大肠杆菌BL21(DE3),表达可溶性含有his6标记的融合蛋白。该蛋白不含Fxn氨基端77个氨基酸的信号肽,含有130个氨基酸,理论分子量为14.38 kDa。表达的蛋白经Ni-NTA柱和连续梯度离心纯化,获得目的蛋白作为抗原;免疫新西兰大白兔制备抗血清并用硫酸铵沉淀初步纯化得到多克隆抗体。经Western blotting和免疫荧光分析测试,所获得的抗体能够特异性识别细胞内源Fxn,也可应用于组织的免疫沉淀和免疫荧光。这是首次报道利用鼠源Fxn作为免疫原制备的具有高度特异性和灵敏性的Fxn抗体,为深入研究小鼠frataxin亚型蛋白的存在和功能奠定了基础。
- 郝双影许芳霞李宽钰
- 关键词：FRATAXIN蛋白表达纯化多克隆抗体
- Hephaestin基因敲除可以导致小鼠脑铁过载
- 铁在中枢神经系统中的沉积可以引发多种神经退行性疾病，目前，学界对铁在中枢神经系统中沉积的原因及机理仍不十分清楚。铁从细胞内通过膜铁转运蛋白以亚铁为基质向细胞外转运二价铁，这种有毒的二价铁离子可以迅速的被亚铁氧化酶氧化成无...
- 姜瑞伟花超姜波郑嘉烁胡慧莹陈惠君
- 几种亚铁氧化酶与铁代谢调节的关系
- 铁作为一种必需微量元素,是血红蛋白和许多酶类的重要成份,在机体正常功能中发挥重要作用,铁缺乏或过载都会引发疾病。由于机体流失铁的数量十分有限,机体维持铁的稳态主要依靠以肝脏巨噬系统为主的铁循环利用和肠黏膜上皮对铁吸收和转...
- 刘顺利万一柯史笑周小小陈惠君
- 肥胖与青少年多囊卵巢综合征被引量：18
- 2009年
- 多囊卵巢综合征(PCOS)是育龄妇女常见生殖内分泌疾病。近年发现,随着儿童肥胖患病率增加,青少年PCOS发病率也逐年提高。肥胖可通过增加外周循环胰岛素水平影响PCOS发病机制,PCOS患者高雄激素血症也会增加内脏脂肪沉积。肥胖会增加与PCOS相关的代谢和心血管方面的并发症的患病风险,如胰岛素抵抗(IR)、高脂血症、高血压以及临床症状不明显的动脉粥样硬化等。早期识别青春期PCOS,有利于及时纠正、阻断其内分泌紊乱,防止近期及远期并发症发生。
- 孙晶王勇吴效科
- 关键词：多囊卵巢综合征青少年肥胖胰岛素抵抗代谢综合征
- 靶向宿主代谢重编程的溶瘤病毒调控策略被引量：1
- 2023年
- 溶瘤病毒是一类天然的或经过基因编辑后能特异性在肿瘤细胞中复制、发挥抗肿瘤效应的病毒。溶瘤病毒的抗肿瘤效应主要通过以下两个方面实现:a.直接的溶瘤效应,例如诱导肿瘤细胞发生凋亡、促使细胞裂解等;b.溶瘤病毒作为一种激活免疫的药物,通过诱导机体产生强烈的抗肿瘤免疫,达到清除肿瘤的目的。溶瘤病毒疗法作为免疫疗法的一个重要分支,因其具有肿瘤特异性,便于基因改造等优点,成为该领域的研究热点。截至目前,处在临床实验招募和完成阶段的溶瘤病毒疗法虽然已达100多例,但已批准上市的产品仅有4款。溶瘤疗法应用于肿瘤治疗领域还面临着诸多挑战。因此,系统性回顾溶瘤病毒的改造策略,深入了解溶瘤病毒的生物学过程显得尤为必要。病毒依赖于宿主完成复制、增殖过程,其生物学过程与宿主的代谢状态密切相关。肿瘤的标志性特征为代谢重编程,即肿瘤细胞重新构建代谢网络以满足指数生长和增殖的需求并防止氧化应激的过程。通常包括糖酵解的增强和谷氨酰胺分解,以及线粒体功能和氧化还原稳态的变化。通过靶向宿主代谢重编程增强溶瘤病毒的复制、溶瘤能力是当前极具前景的方向。本文综述溶瘤病毒的临床应用现状及与代谢相关的调控机制,为进一步开发新型溶瘤病毒以及联用方式提供新的思路。
- 孔令凯吴俊华
- 关键词：溶瘤病毒免疫疗法基因改造
