重庆医科大学脂糖代谢性疾病重庆市重点实验室
- 作品数：69 被引量：101H指数：5
- 相关作者：李青陈曜徐彩卢蕾杜琳敏更多>>
- 相关机构：重庆医科大学附属第二医院第二临床学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金重庆市教育委员会科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- TNF-α对HepG2细胞LXRα介导的胆固醇外流的影响及其分子机制被引量：6
- 2013年
- 目的:观察肿瘤坏死因子α(TNF-α)对肝X受体α(LXRα)启动子活性及其下游ATP结合盒转运蛋白(ABCA1和ABCG1)表达的影响,从而探讨TNF-α加速HepG2细胞内胆固醇积聚的分子机制。方法:构建LXRα基因的启动子表达载体,观察炎症因子TNF-α对LXRα启动子活性的影响,进一步将HepG2细胞分为对照组(control)、TNF-α组(20μg/L)、高脂组(LDL,100 mg/L)及联合处理组(TNF-α20μg/L+LDL 100 mg/L)。采用实时定量PCR和Western blotting检测LXRfα、ABCA1和ABCG1的mRNA及蛋白的表达。[3H]标记胆固醇,液体闪烁计数法检测胆固醇外流量。油红O染色和定量比色法分析细胞内胆固醇的含量。结果:成功构建LXRα启动子的萤火虫萤光素酶报告质粒,证明了该启动子有明显活性,TNF-α能明显抑制LXRα启动子的活性。进一步检测发现,和对照组相比,TNF-α下调了LXRα、ABCA1和ABCG1 mRNA与蛋白表达。高脂组胆固醇外流量增加,而TNF-α组胆固醇外流量明显降低。油红O染色显示,TNF-α使细胞内脂质染色明显增加。结论:TNF-α可通过抑制LXRα启动子活性从而抑制HepG2细胞内胆固醇外流导致肝细胞内脂质异常积聚。
- 仝莎陈曜赵蕾黄爱龙阮雄中陈压西
- 关键词：HEPG2细胞肿瘤坏死因子肝X受体Α胆固醇外流
- 炎症状态下阿托伐他汀对HepG2细胞氧化应激和脂质积聚的影响被引量：2
- 2017年
- 目的研究阿托伐他汀在炎症状态下对人肝癌细胞株Hep G2细胞氧化应激和脂质积聚的影响。方法将普通Hep G2细胞分为为3组:正常组、模型组[用100 ng·m L^(-1)肿瘤坏死因子(TNF-α)处理]及实验组(用100 ng·m L^(-1)TNF-α+10μmol·L^(-1)阿托伐他汀处理),3组同时负荷100μg·m L^(-1)低密度脂蛋白(LDL),处理时间24 h。用油红O染色测定细胞内脂质含量;以荧光定量聚合酶链式反应和免疫印迹法分别检测Hep G2细胞脂肪酸合酶(FAS)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)和固醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)的基因和SREBP1蛋白表达;以二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针染色检测Hep G2细胞内活性氧化产物(ROS)的含量;以比色法检测Hep G2细胞过氧化氢(H2O2)和丙二醛(MDA)的含量。结果正常组与模型组SREBP1蛋白灰度值分别为1.01±0.001,1.61±0.34,这2组的SREBP1 mRNA水平分别为1.01±0.16,3.61±0.39,这2组的FAS的mRNA水平分别是1.03±0.32,1.99±0.36,这2组的ACC的mRNA水平分别是0.95±0.29,2.37±0.52。与正常组相比,模型组的细胞FAS、ACC、SREBP1的基因和SREBP1的蛋白表达明显增加,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与模型组相比,实验组的Hep G2FAS、ACC、SREBP1的基因和SREBP1的蛋白灰度值分别是2.95±0.92,3.99±1.16,2.85±0.91,2.94±0.65,实验组的Hep G2 FAS、ACC、SREBP1的基因和SREBP1的蛋白表达明显增加,差异均有统计学意义(均P<0.05)。表明在炎症状态下,阿托伐他汀进一步加重了Hep G2细胞内脂质的沉积。正常组、模型组与实验组的细胞ROS含量(以荧光强度代表)分别为1.00±0.20,1.77±0.25,3.20±0.53;正常组、模型组与实验组的H2O2含量分别为(2.30±0.31),(4.32±0.77),(5.31±0.75)nmol·mg^(-1);这2组的MDA含量分别为(0.78±0.22),(1.86±0.23),(3.43±1.15)nmol·mg^(-1),与正常组比较,模型组差异均有统计学意义(均P<0.05);与模型组比较,实验组差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论在炎症状态下,�
- 肖亚运吴为周晓倩陈压西阮雄中赵蕾
- 关键词：阿托伐他汀人肝癌细胞株
- 炎症对脂肪酸负荷的肾细胞FAT/CD36表达的影响被引量：5
- 2012年
- 目的:观察炎症是否干扰脂肪酸负荷的肾细胞[人系膜细胞(HMCs)和肾小管上皮细胞HK-2]脂肪酸转运蛋白(FAT/CD36)的表达。方法:分别给予不同浓度软脂酸(0 mmol/L、0.02 mmol/L、0.04 mmol/L、0.08 mmol/L、0.16 mmol/L、0.32 mmol/L)处理HMCs和HK-2细胞24 h。采用实时定量PCR和Western blotting方法检测细胞FAT/CD36的mRNA及蛋白的表达。进一步选取0.04 mmol/L软脂酸联合炎症因子(25μg/L TNF-α或20μg/L IL-6)处理肾细胞24 h后,观察炎症因子对肾细胞FAT/CD36 mRNA及蛋白表达的影响;油红O染色及酶比色法检测细胞甘油三酯(TG)水平;ELISA检测细胞游离脂肪酸(FFA)含量。结果:软脂酸呈浓度依赖性上调HMCs和HK-2细胞FAT/CD36 mRNA和蛋白表达。炎症因子明显刺激脂肪酸负荷的肾细胞FAT/CD36mRNA和蛋白表达进一步增加。油红O染色及胞内TG和FFA含量测定显示炎症因子促进肾细胞脂质积聚。结论:炎症上调脂肪酸负荷的肾细胞FAT/CD36表达,加重胞内脂质积聚。
- 万克强廖俊蕾赵蕾李青陈压西阮雄中
- 关键词：系膜细胞HK-2细胞炎症
- 瘦素上调GRP78的表达在肺癌细胞迁移中的作用被引量：2
- 2020年
- 目的探讨瘦素对肺癌细胞迁移能力的影响及其可能机制。方法利用GEPIA网站,分析来自TCGA数据库的肺癌患者相关数据,寻求瘦素与葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78,GRP78)表达水平和肺癌患者总生存率的相关性;采用划痕实验检测瘦素及GRP78靶向抑制剂HA15对肺癌细胞株A549与H460迁移能力的影响;免疫荧光检测瘦素对肺癌细胞内GRP78表达的影响。最后在PI3K靶向抑制剂Ly294002,mTOR靶向抑制剂雷帕霉素单独处理或与瘦素联合使用后,Western blot检测瘦素对PI3K/mTOR/STAT3信号通路及GRP78表达的影响。结果生存分析显示瘦素或GRP78高表达均与肺癌患者总生存率下降相关(P<0.05);划痕实验显示瘦素可促进肺癌细胞A549与H460迁移(P<0.05),免疫荧光显示瘦素在A549与H460细胞中上调GRP78的表达(P<0.01)。Western blot检测结果显示瘦素可以通过PI3K/mTOR/STAT3信号通路在A549细胞内上调GRP78的表达,而划痕实验显示抑制GRP78可以减弱瘦素的促迁移作用。结论瘦素能够通过PI3K/mTOR/STAT3信号通路上调GRP78的表达来促进肺癌细胞迁移。
- 吴优其乐蔺晓菁吴晶晶练雪梅
- 关键词：瘦素肺癌葡萄糖调节蛋白78迁移
- 导读
- 2017年
- 病毒性肝炎是一个影响全世界人们身体健康的重要公共卫生问题。全球约有3．5亿乙型肝炎（HBV）慢性感染者，1．5亿丙型肝炎（HCV）慢性感染者。我国是病毒性肝炎的高流行区，HBV慢性感染者约有1．2亿。
- 唐霓陈压西
- 关键词：病毒性肝炎导读公共卫生问题感染者丙型肝炎高流行区
- 肾脏细胞CD36在炎症因子诱导的脂肪酸摄取及脂质沉积中的作用被引量：2
- 2019年
- 慢性炎症和脂质代谢紊乱是慢性肾病的重要特征,炎症因子影响肾脏细胞脂质代谢的作用机制尚不清楚,该研究旨在探讨炎症因子是否通过上调脂肪酸转运酶CD36的表达促进肾脏细胞脂肪酸摄取及脂质沉积。通过给予HMCs及HK2细胞肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白介素6(interleukin-6,IL-6)刺激处理24 h,应用qRT-PCR检测CD36的表达量,酶法检测HK2细胞内的甘油三酯(triglycercide,TG)水平。构建CD36过表达的细胞模型,使用荧光标记脂肪酸,观测细胞对外源性脂肪酸的摄取速率。然后利用小RNA干扰技术,构建CD36低表达的细胞模型,检测CD36低表达时细胞脂肪酸摄取速率及胞内甘油三酯、游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)含量,葡萄糖调节蛋白78(GRP78)及内质网跨膜激酶(IRE1)的m RNA表达量。结果显示,炎性因子TNF-α和IL-6促进HMCs及HK2细胞TG的累积增加,并刺激细胞CD36的表达;CD36过表达促进HMCs及HK2细胞对FFA的摄取。当CD36表达被干扰后,炎性因子诱导的肾脏细胞TG及FFA的累积增加、FFA的摄取速率、细胞内GRP78、IRE-1的m RNA表达量及ROS含量均受到了抑制。该项研究表明,在HMCs及HK2细胞中,炎症因子可能通过促进CD36表达,导致细胞对FFA摄取增多,进而引起细胞脂质积聚;干预CD36能够改善炎性因子引起的脂质积聚、内质网应激以及细胞损伤,提示CD36可作为慢性肾脏疾病的潜在治疗靶点。
- 韦莉吴婷婷陈压西杨萍
- 关键词：炎症肾脏细胞脂质沉积
- 血管平滑肌细胞特异性SCAP敲除导致小鼠心血管发育异常
- 目的:固醇调节元件结合蛋白(SREBPs)裂解激活蛋白(SCAP)又称为胆固醇敏感器,是调控低密度脂蛋白受体(LDLr)及脂质内源性合成限速酶羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGCoAR)表达的上游重要分子,在维持细胞内...
- 渠海洋曹真男胡琳李青赵蕾陈压西阮雄中
- CD36对炎症因子TNF-α和IL-6诱发HepG2细胞胞内脂质聚集的影响被引量：4
- 2018年
- 目的探讨炎症因子是否通过上调脂肪酸转运导致HepG2细胞脂质积聚及脂毒性。方法分别给予HepG2细胞肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α组:0. 04 mmol/L软脂酸+25 ng/mL TNF-α)和白介素-6 (interleukin-6,IL-6组:0. 04 mmol/L软脂酸+20 ng/mL IL-6)刺激处理24 h,酶法检测HepG2细胞内的甘油三酯(triglycercide,TG)水平,ELISA检测细胞内游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)含量。利用荧光标记的软脂酸,动态监测细胞对外源性脂肪酸的摄取速率。然后利用小RNA干扰技术,构建低表达脂肪酸转运酶(cluster of differentiation,CD36)的HepG2细胞(CD36 KD HepG2)和对照细胞(NC HepG2)模型,检测CD36低表达时细胞对脂肪酸的摄取速率变化,并检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)及过氧化氢(hydrogen peroxide,H_2O_2)的含量。结果炎症因子能够刺激HepG2细胞TG及FFA的累积,其中TNF-α处理组及IL-6处理组的FFA含量及TG含量都明显增加(P <0. 05),并且能够引起HepG2细胞对脂肪酸的摄取增加(P <0. 05)。抑制HepG2细胞中CD36表达,可以减轻胞内脂质积聚(P <0. 05),削弱炎症状态下HepG2细胞对脂肪酸的摄取(P <0. 05),并且能够显著降低细胞内ROS及H_2O_2含量(P <0. 05)。结论在肝脏细胞中,抑制CD36的表达能够减少炎症因子TNF-α和IL-6引起的脂肪酸摄取增加,减轻脂质积聚,改善细胞脂毒性;提示CD36可作为脂肪肝等代谢性疾病的潜在治疗靶点。
- 韦莉吴俊赵蕾陈压西杨萍
- 关键词：HEPG2细胞炎症CD36
- 血管平滑肌SCAP过表达抑制自噬促进脂质积聚的机制研究被引量：1
- 2022年
- 目的探讨固醇调节元件结合蛋白裂解活化蛋白(sterol regulatory element binding proteins cleavage activating protein,SCAP)对血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)泡沫化的影响及其分子机制。方法构建LV-SCAP与LV-Control血管平滑肌细胞系,免疫印迹法检测SCAP及其下游相关蛋白nSREBP2表达水平;油红O染色观察负荷LDL胆固醇后脂滴积聚,酶标仪检测细胞总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglycerides,TG)水平;单丹磺酰尸胺(monodansyl cadaverine,MDC)染色检测自噬小泡聚集;Western blot检测自噬相关蛋白LC3b、P62与AMPK-mTOR通路表达;mTOR抑制剂雷帕霉素处理LV-SCAP过表达细胞株,Western blot与油红O染色验证处理后效果。结果与LV-Control组相比,LV-SCAP组nSREBP2表达明显上调(P<0.05),经LDL胆固醇负荷后产生的脂滴增多,TC、TG水平明显增高(P<0.05);LV-SCAP组细胞内自噬小泡聚集减少,自噬相关蛋白LC3b下调,P62上调,p-AMPK/AMPK水平降低,p-mTOR/mTOR水平升高(P<0.05)。Rapa处理结果显示LC3b表达增加,P62水平降低(P<0.05),油红O染色脂滴沉积减少(P<0.05)。结论SCAP可能通过影响AMPK-mTOR信号通路抑制血管平滑肌细胞的自噬过程,促进其泡沫化,进而参与血管动脉粥样硬化的发生发展。
- 饶雨涵李丹阳侯晓俐姚盈程苏玉陈压西阮雄中
- 关键词：SCAP自噬
- 脂肪酸转运酶CD36通过影响细胞Ca2+水平而调节HBV复制
- 目的 乙型肝炎病毒(HBV)是一种重要的代谢病毒，宿主营养及代谢状态可影响HBV病毒复制、合成及感染能力.脂肪酸转运酶(CD36)是营养代谢过程的重要膜糖蛋白分子，在长链脂肪酸的跨膜转运及代谢性炎症的发生中起着重要作用....
- 黄健赵蕾杨萍阮雄中唐霓陈压西
- 关键词：病毒复制钙离子
