锦州医科大学畜牧兽医学院
- 作品数:376 被引量:983H指数:12
- 相关机构:吉林农业大学动物科学技术学院东北农业大学动物医学学院辽宁工业大学管理学院更多>>
- 发文基金:辽宁省自然科学基金国家自然科学基金辽宁省科学技术计划项目更多>>
- 相关领域:农业科学文化科学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- TaqMan荧光定量PCR检测滑液囊支原体方法的建立及其感染鸡血液内载量测定
- 2024年
- 【背景】滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)是禽类的常见病原,严重危害家禽养殖业的发展。MS易与其他病原混合感染,给临床诊断造成困难,因此亟须建立一种快速、准确、灵敏的检测方法对疑似患病禽进行快速诊断,以降低经济损失。【目的】建立一种检测MS的TaqMan荧光定量PCR方法,测定MS在感染鸡血液内的载量变化,为临床检测MS感染提供技术支持。【方法】参考GenBank中登录的MS基因保守区域序列设计特异性引物和探针,以温度梯度qPCR法确定最适退火温度,用矩阵法优化其引物和探针加入量,通过提取MS 0801基因组作为模板构建标准曲线,并进行特异性、灵敏度、重复性试验,建立一种检测MS的TaqMan荧光定量PCR方法。使用建立的方法检测滴鼻攻毒和足垫攻毒后MS在感染鸡血液内的载量变化。【结果】建立的TaqMan荧光定量PCR方法最佳退火温度为55℃,引物和探针(10 mol/L)加入量分别为0.8 mL和0.4 mL;扩增曲线具有良好的线性关系,R^(2)>0.99;特异性强,仅对MS有特异性反应,对其他病原均无扩增反应;敏感性高,最低检测限为25 copies/μL;重复性好,批间试验和批内试验变异系数均小于2%。通过TaqMan荧光定量PCR检测MS在感染鸡血液内的动态变化,发现两个攻毒组MS含量的峰值和总体波动无明显差异,但足垫攻毒的MS在血液中的增殖要快于滴鼻攻毒。【结论】本实验建立了一种能够快速检测MS的TaqMan荧光定量PCR方法,并用于检测MS在感染鸡血液内的动态变化,为临床上检测MS感染提供了技术支撑,为疫苗免疫评价方法提供了新的思路。
- 朱悦祁晶晶武梦思张广冻丁思羽陈玥彤高崧于圣青
- 关键词:滑液囊支原体
- 饲养密度对叠层笼养白羽肉鸡生长性能、血液生化指标以及经济效益的影响被引量:5
- 2022年
- 旨在研究饲养密度对叠层笼养AA+白羽肉鸡后期生长性能、血液生化指标及经济效益的影响。试验采用完全随机设计,选取22日龄健康的AA+白羽肉鸡162只,随机分为3组,每组3个重复,分别为低饲养密度组(LSD组,16只/m^(2))、中饲养密度组(MSD组,18只/m^(2))和高饲养密度组(HSD组,20只/m^(2)),试验期21 d。结果:LSD组42日龄体重和平均日增重(ADG)均极显著高于HSD组(P<0.01),显著高于MSD组(P<0.05);LSD组平均日采食量(ADFI)显著高于HSD组(P<0.05);LSD组和MSD组料重比(F/G)极显著低于HSD组(P<0.01);不同饲养密度对白羽肉鸡血清抗体和血液生化指标无显著影响(P>0.05);LSD组和MSD组平均每只鸡的利润极显著高于HSD组(P<0.01);MSD组平均每个重复利润极显著高于HSD组(P<0.01),LSD组显著高于HSD组(P<0.05),LSD组和MSD组间无显著性差异(P>0.05);LSD组和MSD组欧洲效益指数显著高于HSD组(P<0.05),表明鸡饲养管理综合成绩越好,盈利能力越强。综上,饲养密度影响叠层笼养肉鸡生长性能和经济效益,当饲养密度为16只/m^(2)时白羽肉鸡可以获得较好的生长性能和经济效益。
- 邹强强王铁良孟维爽刘纪元李德生
- 关键词:白羽肉鸡饲养密度血液生化指标
- 饲粮精饲料水平对生长期德州驴生长、屠宰性能及器官指数的影响被引量:12
- 2017年
- 试验旨在研究以豆秸为粗料饲喂条件下,探讨饲粮精料水平对生长驴生产性能、屠宰性能及器官指数的影响。选择60头体质量、年龄及胎次相近的7~8月龄德州驴公驴,随机分为3个处理组,每组20头。处理Ⅰ组按体质量1.00%饲喂精料;处理Ⅱ组按体质量1.25%饲喂精料;处理Ⅲ组按体质量1.50%饲喂精料,各处理组粗饲料均饲喂豆秸。试验期为160 d。结果表明:同处理Ⅰ组相比,处理Ⅱ组和处理Ⅲ组可显著提高平均日增质量(P<0.05);处理Ⅱ组经济效益最佳;处理Ⅲ组可极显著降低净皮率和提高屠宰率(P<0.01),处理Ⅱ组与处理I组间差异不显著(P>0.05);处理Ⅲ组可显著提高肉骨比和净肉率(P<0.05),处理Ⅱ组与处理I组间差异不显著(P>0.05);处理Ⅱ组和处理Ⅲ组可提高肝指数和盲肠指数。试验条件下,从生产性能、经济指标、屠宰性能及器官指数来看,生长驴合适的饲粮精料水平为1.25%。
- 李文强陈曦曲洪磊陈远庆马秋刚史东辉
- 关键词:精料水平屠宰性能器官指数
- 豆腐酸浆中干酪乳杆菌的分离、鉴定及作为豆腐凝固剂的应用被引量:23
- 2017年
- 通过平板涂布法和高效液相色谱法,以p H和产乳酸量为指标,从自然发酵酸浆中分离筛选出一株乳酸菌YQ336,对其进行菌株形态观察、菌落形态观察、生理生化鉴定以及16S rDNA序列分析,结果表明,该乳酸菌属于乳杆菌属的干酪乳杆菌。将分离出的干酪乳杆菌YQ336接种于豆腐黄浆水中纯种发酵制成豆腐凝固剂点制豆腐,与自然发酵酸浆点制的豆腐进行比较,发现两者的感官评分差异不显著(p>0.05),说明干酪乳杆菌YQ336可以作为新型豆腐凝固剂开发并使用。
- 叶青许云贺张莉力
- 关键词:黄浆水干酪乳杆菌高效液相色谱豆腐凝固剂
- 大枣多糖对鸡淋巴细胞免疫功能影响的研究被引量:5
- 2022年
- 试验研究大枣多糖对鸡免疫功能的影响。选取150只、118日龄的乌鸡,随机分为5组,每组3个重复,每个重复10只鸡。产蛋期间,KOBA组乌鸡饲喂不添加药物的配合饲料,ZXMZ组乌鸡饲喂添加0.2 g/kg盐酸左旋咪唑的配合饲料,DZDT1组、DZDT2组和DZDT3组乌鸡饲喂分别饲喂添加1、2和4 g/kg大枣多糖的配合饲料。结果显示:与KOBA组相比,DZDT1组、DZDT2组和DZDT3组乌鸡血清的新城疫病毒(NDV)抗体效价和免疫球蛋白M(IgM)含量均极显著升高(P<0.01);DZDT2组乌鸡血清的干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-2(IL-2)的分泌量、免疫球蛋白A(IgA)和免疫球蛋白G(IgG)含量极显著升高(P<0.01)。与KOBA组相比,DZDT1组、DZDT2组和DZDT3组乌鸡脾的脾指数、脾淋巴细胞刺激指数和脾淋巴细胞坏死因子-α(TNF-α)的分泌量均极显著升高(P<0.01);DZDT2组的白细胞介素-4(IL-4)分泌量极显著提高(P<0.01)。研究表明,配合饲料中添加大枣多糖能够提高蛋鸡的免疫功能,试验条件下,DZDT2组效果相对最佳。
- 叶美怡高明子刘佳邹慧刘迪杜香凝李敬双
- 关键词:大枣多糖乌鸡免疫功能
- 弓形虫微线体蛋白MIC9的原核表达及免疫反应性分析被引量:1
- 2021年
- 为深入了解弓形虫微线体蛋白9(MIC9)基因功能,以弓形虫RH株总基因组为模板PCR扩增MIC9基因片段,并构建MIC9的原核表达载体,采用Western blot对其免疫反应性进行鉴定分析。结果显示:扩增出大小为903 bp的MIC9基因片段,与预期结果一致;成功构建了pMD-18T-MIC9克隆质粒和pGEX-4T-1-MIC9原核表达载体,经过双酶切及测序鉴定正确,且能够在大肠杆菌中成功表达,表达蛋白的分子量为59 kDa;经免疫反应性鉴定,MIC9重组蛋白能够被弓形虫全虫抗体特异性识别,证明重组蛋白MIC9具有一定的免疫反应性。研究结果为弓形虫MIC9基因免疫功能的后续研究提供了参考。
- 张梓轩黄武琴郑百利于金玲史丽华李冰刘孝刚
- 关键词:弓形虫原核表达免疫反应性
- N-氨甲酰谷氨酸对肉羊生产性能及血浆抗氧化能力的影响被引量:3
- 2021年
- 试验旨在研究日粮中添加不同水平N-氨甲酰谷氨酸(NCG)对肉羊生产性能、肉品质、血浆抗氧化能力的影响。选取32只体况健康、体重相近的4月龄断奶夏寒杂交羊,随机平均分为4组,每组8个重复,每个重复1只羊。4组分别为对照组(基础日粮)、处理组Ⅰ(基础日粮+0.08%NCG)、处理组Ⅱ(基础日粮+0.12%NCG)、处理组Ⅲ(基础日粮+0.16%NCG)。试验期60 d。结果显示,0.12%水平的NCG可以显著降低肉羊血清中丙二醛(MDA)的含量(P<0.05),显著降低羊肉滴水损失率(P<0.05)。试验表明,日粮添加NCG可改善肉羊生长性能,提高机体抗氧化能力。
- 马巍王烁张洁慧张岩钟晋涛王春强
- 关键词:肉羊肉品质抗氧化能力
- 鸡传染性支气管炎病毒分离鉴定及S1基因遗传演化分析被引量:7
- 2021年
- 为调查辽宁地区鸡传染性支气管炎病毒(IBV)的流行及遗传演化情况,从辽宁某鸡场疑似鸡传染性支气管炎病料中分离得到1株病毒,经分子生物学检测、鸡胚矮小化试验、新城疫病毒血凝特性干扰试验和动物回归试验,确定该毒株为IBV,并命名为CH/LN/2019。扩增该毒株S1基因并进行序列分析发现,分离株S1基因全长1 620 nt,编码540个氨基酸,S1蛋白裂解位点为HRRRR,属于基因Ⅰ型(QX型)毒株;同源性比对发现,分离株与基因Ⅰ型代表毒株QXIBV株的核苷酸和氨基酸序列同源性最高,分别为95.6%和94.8%;与国内常规型疫苗H52、H120和Ma5毒株的同源性较低,核苷酸和氨基酸序列同源性仅为77.2%~76.9%和75.4%~76.2%。本试验为辽宁地区鸡传染性支气管炎的流行病学调查及免疫防控提供了参考。
- 曹祁峰任显东李阁锦李冰
- 关键词:传染性支气管炎病毒S1基因遗传进化
- 鸡滑液支原体磷酸甘油酸激酶的克隆表达及酶学活性测定被引量:5
- 2021年
- 磷酸甘油酸激酶(PGK)是生物进行糖酵解的关键酶,目前未见关于鸡滑液支原体(MS)PGK的相关研究报道。本实验采用Overlap PCR方法对MS的pgk基因进行点突变扩增,然后连接至pET-28a(+)表达载体并在大肠杆菌BL21中表达,纯化获得重组MSPGK(rMSPGK)蛋白,然后对纯化后的rMSPGK蛋白的酶学活性进行测定,包括温度、pH及不同底物对酶活的影响,并计算其酶比活力、米氏常数及最大反应速率。结果显示:最终获得了纯化的rMSPGK蛋白,其相对分子质量约为45 kDa;酶学活性测定显示,rMSPGK蛋白的酶比活力为100.70 IU/mg,最适酶促温度为37℃,最适pH为7.5;双倒数法求得rMSPGK蛋白相对于3-PGA的最大反应速率Vmax为370.37μmol/(L?min),米氏常数Km值为3.88 mmol/L;相对于ATP的最大反应速率Vmax为357.14μmol/(L?min),Km值为0.25 mmol/L。综上,本实验成功地表达了MS的PGK蛋白,并获得了酶活力较高的rMSPGK蛋白,为进一步研究鸡滑液支原体代谢和致病机制奠定了基础。
- 尚原冰祁晶晶王宇李浩然刘晓涵王少辉李涛田明星于圣青周铁忠
- 关键词:原核表达酶学活性
- 虚拟仿真实验在炭疽实验室诊断及皮毛检疫实验中的应用
- 2023年
- 目的:探讨“炭疽实验室诊断及皮毛检疫虚拟仿真实验”在兽医防疫与检验学实验教学中的效果。方法:分别采用虚拟仿真实验平台和传统实验平台进行教学,比较两组学生的实验操作成绩,并对实验组学生进行问卷调查。结果:实验组成绩高于对照组(P<0.05),学生对本虚拟仿真实验的认可度较高。结论:本虚拟仿真实验平台提高了教学效果,值得进一步推广使用。
- 唐峰唐雨顺刘永华王书全刘秀萍寇叙
- 关键词:虚拟仿真实验