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浙江农林大学动物科技学院: 作品数：531 被引量：1,329H指数：13; 相关作者：鲁庆彬胡军祥章文明王淑红王佩伦更多>>; 相关机构：浙江大学动物科学学院丽水学院生态学院南京农业大学动物医学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金浙江省自然科学基金公益性行业(农业)科研专项更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>

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利用PicoGreen作为检测探针建立基于核酸适配体识别的玉米赤霉烯酮快速检测方法被引量：2: 2018年; 玉米赤霉烯酮(ZEN)是一种能对动物和人类产生毒性的真菌毒素。研发灵敏而准确的玉米赤霉烯酮快速检测技术对于保障食品动物安全至关重要。该研究以PicoGree荧光染料为检测探针,利用其仅与dsDNA结合后才发出荧光的特性(激发波长:480nm,发射波长:520nm),当ZEN不存在时,适配体能够与其互补链结合而形成dsDNA,导致荧光强度增强;当ZEN存在时,适配体与ZEN结合而不能形成dsDNA,导致荧光强度减弱。建立了一种基于核酸适配体识别的ZEN快速检测方法。灵敏度试验表明:该方法的最低检测限为0.1μg/L(0.1ppb),线性范围为0.1~1μg/L(0.1~1ppb)。检测时间可以控制在40min内。特异性试验结果表明:ZEN核酸适配体与桔青毒素(CTN)、赭曲霉毒素A(OTA)、黄曲霉毒素B_1(AFB_1)和伏马毒素B_1(FB_1)等真菌毒素不会出现交叉反应。本研究与传统的基于抗体识别的ELISA快检方法进行比较,Kappa值为0.805,表明二者一致性相当。由于核酸适配体价廉,检测时间短,因此本文开发的ZEN检测方法较常用的ELISA方法更具有推广和应用价值。; 金庆日苗灵燕田广燕方维焕宋厚辉; 关键词：玉米赤霉烯酮适配体 PICOGREEN

天目溪中华秋沙鸭伴生的鸟类多样性研究: 2020年; 2018年10月至翌年2月,在进行天目溪中华秋沙鸭监测的同时,开展了其伴生鸟类的调查研究。共记录到伴生鸟类46种,分属9目26科。其中,国家二级重点保护野生动物有4种,占总种数的8.70%。从时间上看,物种多样性指数最高在11月(2.77),而生境多样性指数最高在1月(1.37),据此推测候鸟种类的绝对数量可能影响物种多样性,而候鸟种类的相对数量可能影响生境多样性。从空间上看,阔叶林中鸟类丰富度指数各月均最高(平均2.54±0.59),且波动较小;湿地中鸟类丰富度指数各月为第二高(平均1.72±0.82),且波动极大。这说明,阔叶林受时间因素影响很小,而湿地受时间因素影响很大,这归因于候鸟的迁徙行为。因此,阔叶林保护有助于生物群落组成稳定,而湿地保护有助于提高迁徙鸟类的多样性,两者均有利于提高中华秋沙鸭栖息生境的质量。; 梅爱君厉亮高欣鲁庆斌徐卫南; 关键词：物种多样性生境多样性丰富度指数迁徙鸟类

多西紫杉醇的免疫佐剂作用研究: 多西紫杉醇是一种基于紫杉醇的半合成抗癌药,紫杉醇从太平洋紫杉中提取而来。为研究多西紫杉醇通过粘膜免疫途径对H1N1流感病毒裂解疫苗和肌内免疫对HPV16L2E6E7蛋白的佐剂活性,实验一将40只雌性(6-8周龄)Balb...; 苏小艳陈俭王云皓马艳粉胡松华; 关键词：多西紫杉醇免疫佐剂药理作用流感病毒裂解疫苗融合蛋白疫苗; 文献传递

猪圆环病毒2型巢式PCR检测方法的建立与初步应用被引量：3: 2015年; 猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)给养猪业造成了重大的经济损失,建立经济、快速的检测方法尤为重要。本研究旨在利用巢式PCR技术,建立高灵敏度PCV2检测平台,以加强对猪圆环病毒病的防控。根据PCV2 ORF2基因保守区,设计内、外2对巢式PCR引物,通过优化PCR反应条件,建立巢式PCR检测方法,并对猪场临床样本进行检测。结果显示,本研究建立的巢式PCR检测方法灵敏度高、重复性强,最低检出量为10拷贝/μL,检出率达97.3%。本研究建立的巢式PCR检测方法为快速、高效地检测PCV2以及为猪圆环病毒病的防控提供有力手段。; 于静陈彦永何小江代兵赵阿勇王晓杜宋厚辉; 关键词：猪圆环病毒2型巢式PCR

T3SS1和T3SS2影响副溶血弧菌生物学特性及细胞致病性的比较被引量：9: 2018年; 【目的】探究两套Ⅲ型分泌系统T3SS1和T3SS2影响副溶血弧菌生物学特性及细胞致病性的差异和相关性。【方法】以T3SS1和T3SS2主要结构基因vcrD1和vcrD2为研究对象,利用同源重组技术分别构建单基因和双基因缺失株ΔvcrD1、ΔvcrD2、ΔvcrD1-vcrD2,以及互补株CΔvcrD1和CΔvcrD2;分析各菌株的生长特性、生物被膜形成能力、运动性的差异;比较各菌株对细胞毒性以及对细胞炎性因子转录水平的影响。【结果】与野生株相比,各缺失株的生长速度无显著差异。缺失株ΔvcrD1生物被膜形成能力、运动性和细胞毒性均极显著下降;缺失株ΔvcrD2主要表现为细胞炎性因子IL-1β和IL-6转录水平的显著上调,同时对细胞毒性作用下降。双基因缺失株ΔvcrD1-vcrD2在缺失株ΔvcrD1的基础上,生物被膜形成能力、运动性、细胞毒性均进一步显著下降,但在细胞炎性因子的转录水平上,则与ΔvcrD1一致,与野生株相比均无显著差异。【结论】T3SS1和T3SS2对副溶血弧菌生物学特性和细胞致病性的影响存在差异。T3SS1主要影响细菌的生物被膜形成、运动性及细胞毒性作用;T3SS2不影响生物被膜形成、运动性等生物学特性,参与细菌对细胞炎性反应中的负调控作用,同时具有一定的细胞毒性作用。T3SS1有助于副溶血弧菌在环境中的生存,而T3SS2可有利于细菌在宿主体内免疫逃避的过程。T3SS1和T3SS2对副溶血弧菌生物学特性和细胞致病性的影响可能存在一定的相关作用,具体机制有待进一步研究。; 白雪瑞王权凌娇万莹陈永军方维焕孙卫东蒋蔚; 关键词：副溶血弧菌基因缺失株生物学特性

基于高通量测序的丁酸梭菌对肉鸡盲肠菌群结构的影响被引量：19: 2017年; 采用高通量测序技术分析饲料中添加丁酸梭菌对肉鸡盲肠菌群结构的影响。选用300羽1日龄肉鸡随机分成2组,每组6个重复,每个重复25羽鸡,分别饲喂基础日粮和基础日粮+丁酸梭菌3×10~7cfu·kg^(-1)的试验日粮。在42日龄阶段称量体质量后每个重复取3羽公鸡用于采集盲肠内容物,提取其基因组DNA,用特异性引物扩增细菌16S rRNA基因V3-V4区,采用基于Illumina Miseq测序平台对细菌16S rRNA基因进行测序分析。结果表明,添加丁酸梭菌可以显著地降低肉鸡的料肉比(P<0.05)。肉鸡盲肠中细菌主要是硬壁菌门、拟杆菌门、变形菌门和软壁菌门;在门的水平上,丁酸梭菌处理具有降低硬壁菌门丰度、增加拟杆菌门丰度的趋势。在属的水平上,瘤胃菌属(Ruminococcaceae_uncultured)、粪栖杆菌属(Faecalibacterium)、别样杆菌属(Alistipes)、毛螺菌属(Lachnospiraceae_incertae_sedis)是肉鸡盲肠中的主要优势菌属;丁酸梭菌处理使肉鸡盲肠中粪栖杆菌(Faecalibacterium)、别样杆菌(Alistipes)、类杆菌属(Bacteroides)、Phascolarctobacterium和丁酸梭菌(Butyricicoccus)相对丰度显著升高(P<0.05),毛螺菌属(包括Lachnospiraceae_incertae_sedis和Lachnospiraceae_unclassified)、理研菌属(Rikenella)、链球菌(Streptococcus)和Blautia属相对丰度显著降低(P<0.05),其中丰度显著升高菌群为主要的短链脂肪酸生成菌。由此表明,日粮中添加丁酸梭菌可降低肉鸡的料肉比,增加盲肠中产短链脂肪酸菌群的丰度。; 肖英平杨彩梅代兵李开锋陈镜刚杨华; 关键词：丁酸梭菌高通量测序肉鸡菌群结构

拟穴青蟹羧肽酶B基因在先天性抗病免疫中的作用机理: 羧肽酶B(Carboxypeptidase B,CPB)是竣肽酶的一种,它是含锌的外分泌蛋白,能切多肽羧基末端的赖氨酸或精氨酸。但还没有在虾蟹类甲壳动物中研究羧肽酶B的作用及作用机理。本研究克隆了一条在拟穴青蟹(Scyl...; 钱希逸朱斐; 关键词：拟穴青蟹羧肽酶B 基因表达先天性免疫; 文献传递

丝素蛋白在组织工程修复的研究进展被引量：2: 2022年; 随着生物医学材料相关技术的不断发展,丝素蛋白的应用潜力逐渐凸显,已成为一种新型生物医学材料。丝素蛋白具有良好的生物相容性、生物降解性和低免疫原性,广泛应用于生物医学领域,成为组织工程的理想材料。文章以丝素蛋白为核心,对丝素蛋白运用于皮肤创面愈合、神经连接、血管再生、人造骨骼及人工软骨组织等领域的修复效果进展进行综述,介绍了丝素蛋白的分子结构和特点、丝素蛋白在不同领域的应用以及丝素蛋白在体外和体内的作用。此外,文章还对丝素蛋白在生物医学领域的应用进展进行了讨论和总结,对丝素蛋白材料目前发展的局限性和未来的发展趋势进行了展望。; 施心雨李艾元李诚宣智宏岳万福; 关键词：丝素蛋白生物材料

猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因的克隆和原核表达被引量：5: 2013年; 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)可引起各种年龄猪的呼吸系统和母猪繁殖机能障碍,导致猪场损失严重,其中GP5蛋白在PRRSV病毒侵入、致病及免疫保护中发挥重要作用。提取猪繁殖与呼吸综合征病毒基因组RNA,反转录合成cDNA,PCR扩增获得GP5基因,片段大小为600bp。将GP5基因亚克隆到原核表达载体pGEX-6P-1上,菌落PCR和限制性内切酶双酶切鉴定,重组质粒PGEX-6P-1-GP5构建成功,重组质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析重组蛋白的表达,Western blot分析重组蛋白的反应原性。结果表明,重组融合蛋白His-GP5分子质量约为41ku,主要以包涵体的形式存在,表达量占菌体总蛋白的35%以上,纯化后的重组蛋白占总蛋白的75%以上;并且该重组蛋白能与猪的阳性血清反应,说明其具有较好的免疫原性。研究结果为基因工程疫苗的研发和GP5的抗体制备奠定了基础。; 袁庄川王鲁彦梅匀安张敏王晓杜; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 GP5基因原核表达纯化

含氰甙类饲料安全性研究进展: 2016年; 氰甙是饲料中一种毒性很强的化合物,严重威胁动物的生命。对含氰甙类饲料的分布、毒理作用、检测方法、脱毒方法及其应用进行综述,为含氰甙类饲料的资源化利用提供理论依据。; 曾俊棋岳万福; 关键词：脱毒饲料

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