广东医科大学实验动物中心
- 作品数：32 被引量：56H指数：5
- 相关机构：南方医科大学实验动物中心黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院南方医科大学珠江医院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金湛江市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学农业科学更多>>
- 应用CRISPR/Cas9技术建立敲除AIFM1基因的稳定肺癌细胞株
- 2023年
- 目的利用CRISPR/Cas9技术在肺癌细胞系A549和NCI-H3255中敲除凋亡诱导因子1(AIFM1)基因,并通过筛选,获得稳定的细胞株。方法利用在线数据库GEPIA、CPTAC、Prognosis和SangerBox分析AIF在肺癌的表达和功能。以AIFM1基因为靶点,设计向导RNA(sgRNA)并利用CRISPR RGEN Tools分析其脱靶效率,CRISPR/Cas9技术敲除肺癌细胞的AIFM1基因和倍比稀释法筛选稳定的单克隆细胞株。采用Western blot检测细胞AIF表达水平。结果TCGA和GTEx数据集结果显示,AIF蛋白在肺癌组织阳性表达率比正常组织高,差异有统计学意义(P<0.05);单因素cox和多因素cox分析发现,pT分期和pN分期是独立危险因素(P<0.05);CPTAC数据库显示,与正常阶段相比,AIF蛋白在肺癌的不同分级分期阶段的表达增加(P<0.05)。AIFM1基因在TCA循环、亨廷顿氏症疾病、氨基酸-核苷酸-糖的代谢和氧化性磷酸化通路中富集显著,差异有统计学意义(|NES|>1,P<0.05);3条sgRNA的序列脱靶效率均为0;与野生型肺癌细胞株相比,用CRISPR/Cas9基因编辑技术修饰的肺癌细胞未检测到表达AIF蛋白,且筛选的杀死A549和NCI-H3255的嘌呤霉素浓度分别为0.60~0.80μg/mL和0.60μg/mL。结论AIF在肺癌中表达上调。利用CRISPR/Cas9技术成功建立AIFM1基因敲除的肺癌细胞株,这将为研究AIF在肺癌发生发展机制提供合适的研究材料。
- 汤喜连李宁余华军陈小谊黄小琴贾玉芳涂名进何柳燕伍俊张海涛
- 关键词：基因敲除肺癌
- “医学实验动物学”课程思政的教学改革初探
- 2024年
- 课程思政是新时期高校人才培养和思想政治教育的新方向。为进一步研究“医学实验动物学”课程思政教学改革的新思路、新方法,基于“医学实验动物学”课程特点,阐述了课程思政融入“医学实验动物学”教学的必要性和意义,通过课程思政和“医学实验动物学”课程目标体系的搭建及二者相融的课程样例的呈现,以期对“医学实验动物学”课程思政教学改革进行初步探索,加强课程思政与“医学实验动物学”教学的有机结合,为进一步开展“医学实验动物学”课程思政教学改革奠定基础。
- 冷扬李晓玲
- 关键词：医学实验动物学教学改革
- 植物多糖对肠道健康保护作用的研究进展被引量：2
- 2021年
- 植物多糖是一类生物活性物质,具有一定保健作用。近年来,人们关于植物多糖对肠道健康的作用开展了广泛的研究。植物多糖可通过改善肠道组织形态、维护肠道屏障完整性、增强免疫反应以及调节肠道菌群等,使得肠道内部环境处于良好状态。通过查阅近几年的文献,该文就植物多糖对肠道健康的保护作用与机制进行综述,为推进植物多糖的研究和应用提供理论支持。
- 陈一淑苏小华
- 关键词：植物多糖肠道健康
- 湛江市硇洲马尾藻多肽的制备及活性探讨被引量：1
- 2019年
- 目的从马尾藻中提取活性多肽,并研究其在抗菌和抑制血栓形成方面的活性。方法 SephdexG-50凝胶层析柱和高效液相色谱柱分离纯化多肽组份;Molish实验检测提取的多肽含糖量;用比浊法检测不同剂量的马尾藻多肽(0、10、20、40、60、80μg/mL)对大肠埃希菌(D1314)和金黄色葡萄球菌(s.agr^+、RN4220)生长的影响;将大鼠随机分为生理盐水组、马尾藻多肽(100、200、400μg/mL)、肝素1 600U/mL组,分别给予相应药物,电刺激大鼠颈动脉形成血栓,观察大鼠颈动脉血栓形成的情况。结果可从马尾藻匀浆上清液中获得2个收集峰,主要多肽集中在B收集峰;高效液相色谱法分析B收集峰由6个组份组成;Molish实验显示多肽组份不含多糖类物质;比浊法显示多肽组份能抑制大肠埃希菌的生长,而对金黄色葡萄球菌不敏感;且通过电刺激大鼠颈动脉血栓形成,发现该多肽具有抑制血栓形成的作用。结论成功从马尾藻中提取活性多肽组份,该多肽组份具有抑制大肠埃希菌生长和血栓形成的作用。
- 林碧云黄慧吴尚龚正陈宝玲曾钰玲张海涛余华军
- 关键词：马尾藻多肽细菌血栓
- 教学用兔的饲养管理与防疫工作
- 2020年
- 加强兔子规范的饲养管理,做好防疫工作,提高兔子存活率,保证教学工作正常开展。
- 陈一淑余华军欧华俊
- 关键词：饲养管理动物福利
- 拟微绿球藻发酵肽的抗衰老作用研究
- 2024年
- 探讨了拟微绿球藻发酵肽(FNPs)的提取、组成分析及其对果蝇体内抗衰老效果。与非发酵组相比,FNPs的多肽含量增加约100条,肽中的抗氧化位点显著增加。FNPs的最大吸收强度在258 nm处,且具有剂量依赖关系。在果蝇实验中,经口干预后,5μg/mL FNPs可使自然衰老的黑腹果蝇的平均寿命延长约13天。同时观察到,在70~90日龄时,0.5,5和10μg/mL的FNPs均可缓解因年龄引起的MDA、SOD和CAT等氧化应激指标的恶化,并将其提高到阳性组水平。结果表明,FNPs是潜在的缓解自然衰老引起的健康问题的生物活性成分,其资源丰富且易于获得,在作为新型抗氧化成分进行功能性食品开发或营养保健膳食制剂将有很好的应用前景。
- 杨婷李华文许训郭红辉邹堂斌夏恩琴
- 关键词：生物活性肽抗衰老黑腹果蝇
- 巴马小型猪糖尿病前期血脂和血液流变学变化分析
- 2019年
- 为研究巴马小型猪糖尿病前期对血脂和血液流变学的影响,对正常巴马小型猪和糖尿病前期小型猪的血脂和血流变学指标进行了检测,并进行糖耐量实验。结果表明,血脂四项检测中血总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇糖尿病前期组均高于正常对照组(P<0.05)。血液流变学指标检测中活化部分凝血酶原时间出现延长(P<0.05)。其他检测指标无明显差异。实验显示,巴马小型猪糖尿病前期已出现血脂紊乱和部分血流变学指标的改变。因此糖尿病前期患者在控制血糖的同时,应控制血脂,降低血黏度,以预防或减少糖尿病的发生。
- 苏小华那顺巴雅尔邓俊成吕明
- 关键词：巴马小型猪糖尿病前期血脂
- 巴马小型猪高血糖家系的选育
- 目的:采用巴马小型猪作为实验对象,通过N-乙基-N-亚硝基脲(ENU)诱变剂筛选建立大型哺乳动物基因突变模型和人类疾病动物模型.
方法:对巴马公猪阴囊部位注射85mg/kg剂量体重的ENU,利用ENU的作用对其...
- 苏小华邓俊成田雨光那顺巴雅尔吕明江霞顾为望
- 关键词：基因突变
- 基于网络药理学预测紫苏子-杏仁药对治疗支气管哮喘的作用机制被引量：9
- 2021年
- 目的基于网络药理学探讨紫苏子-杏仁药对治疗支气管哮喘的作用机制。方法基于中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP)收集紫苏子-杏仁药对的有效活性成分及其靶点信息。通过Genecards数据库获取哮喘相关基因,并与经STRING数据库转换的紫苏子-杏仁药对的靶基因进行匹配,得到紫苏子-杏仁药对治疗哮喘的候选作用靶点。利用STRING数据库和Cytoscape软件构建药物-有效活性成分-作用靶点网络和蛋白互作网络图,并利用DAVID数据库对预测靶点进行GO富集分析和KEGG通路富集分析。结果筛选得到紫苏子中有效活性成分14个、杏仁中有效活性成分15个,关键有效活性成分包括雌酮、木犀草素、β-谷固醇等。去重后得到两者共有靶点179个,关键靶点包括TP53、AKT1、JUN、CDKN1A、VEGFA等。GO富集分析结果包括GO-BP(生物过程)、GO-MF(分子功能)和GO-CC(细胞组分)分析。KEGG通路富集分析得到7条与哮喘显著相关通路。结论紫苏子-杏仁药对主要通过PI3K-Akt、TNF、P53等信号通路发挥治疗哮喘作用。
- 黄芳芳吴锐剑李晓玲林浩雯邱琴林柏忻黄宇戈罗连响
- 关键词：紫苏子杏仁网络药理学支气管哮喘
- AIF的K89琥珀酰化抗体制备及与AIF的互作蛋白研究
- 2023年
- 目的:本课题组前期发现凋亡诱导因子(apoptosis-inducing factor,AIF)蛋白在非吸烟女性肺腺癌患者中存在第89位赖氨酸残基琥珀酰化修饰水平增高。本课题组拟制备识别AIF第89位赖氨酸残基琥珀酰化修饰的抗体,用于检测AIF在该位点琥珀酰化修饰。方法:利用在线数据库对AIF蛋白的理化性质、跨膜结构、信号肽、蛋白结构及琥珀酰化位点进行生物信息分析。根据AIF氨基酸序列合成包括89位赖氨酸残基(K89)位点的三条多肽,其中两条含AIF K89的多肽赖氨酸残基进行了琥珀酰化修饰。用三条合成的多肽偶联KLH,然后分别免疫家兔,制备特异识别AIF K89位琥珀酰化修饰的抗体。用ELISA、Dot blot、Western blotting和免疫组化对抗体效价和特异性进行检测。结合胶内酶解和高分辨生物质谱技术分析与AIF相互结合的蛋白。结果:生物信息学分析结果显示,AIF K89琥珀酰化修饰促使AIF 79~99氨基酸残基形成的α-螺旋结构发生变化:由一个较长的α-螺旋变成两个间隔短的较短的α-螺旋。合成的两条琥珀酰化修饰多肽和一条非琥珀酰化的多肽免疫家兔均成功获得相应的抗体;ELISA检测免疫血清抗体效价,分别是1∶486 k、1∶162 k和1∶18 k。制备的识别AIF K89琥珀酰化修饰的抗体识别AIF K89琥珀酰化修饰性多肽的效价是识别非琥珀酰化多肽的效价的27倍;抗体Dot blot检测,该抗体识别AIF K89琥珀酰化修饰性多肽的杂交信号强度是识别非琥珀酰化多肽的效价的20倍;Western bloting结果显示AIF琥珀酰化抗体能特异性识别AIF K89琥珀酰化修饰位点。质谱鉴定与AIF结合的蛋白有XIAP/BIRC4、EIF3G和PRELID1等。结论:生物信息分析提示AIF K89琥珀酰化修饰影响AIF蛋白的结构。制备的AIF K89琥珀酰化抗体能特异性识别AIF K89琥珀酰化修饰,为进一步研究AIF琥珀酰化的机制提供了基础。
- 汤喜连李宁余华军何柳燕黄倩倩陈融融陈丽丽伍俊张海涛
- 关键词：AIF琥珀酰化肺腺癌抗体制备
