东北林业大学盐碱地生物资源环境研究中心
- 作品数：265 被引量：1,650H指数：21
- 相关作者：李立新赵潇男韩宝达申哲张海龙更多>>
- 相关机构：哈尔滨商业大学食品工程学院哈尔滨师范大学生命科学与技术学院中国科学院东北地理与农业生态研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 玉米叶绿体蛋白质组学研究进展
- 2013年
- 亚细胞蛋白质组学研究为深入解析植物蛋白质定位和功能提供了重要信息。玉米是重要的粮食作物,也是研究C4植物光合作用的良好模式植物。综述了近年来玉米叶绿体发育与逆境应答过程中蛋白质组的变化特征。
- 宋保华赵琪戴绍军
- 关键词：玉米叶绿体蛋白质组
- 微量样品中喜树碱含量的高效液相色谱测定被引量：2
- 2012年
- 为了测定微量喜树(Camptotheca acuminata Decne)样品中的喜树碱含量,建立了HPLC—荧光检测测定方法(采用Luna C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈∶水(体积比4∶6)为流动相,流速1.0 mL.min-1,荧光检测器激发波长380 nm,发射波长553 nm)。结果表明:喜树碱质量浓度在20～800μg.L-1范围内,与峰面积呈现良好的线性关系,r=0.999 6,平均加样回收率为98.41%,峰面积的相对标准偏差1.88%。这一方法仅需2 mg干质量植物样品即可实现对喜树碱含量的测定,且操作简单、重复性好、结果精确可靠,为微量植物材料中喜树碱含量的测定提供了有效方法。
- 王轶吴莹王洋阎秀峰
- 关键词：喜树喜树碱高效液相色谱法荧光检测
- 盐芥miR396的表达分析、前体克隆及靶基因预测被引量：2
- 2014年
- 利用实时定量PCR的方法分析了tsa-mi R396在盐芥不同组织的表达情况及盐、冷胁迫下的表达量变化,结果显示tsami R396在盐芥的不同组织均有表达,且在盐芥幼苗受盐、冷胁迫处理2 h后其表达量明显上升,随后呈波动性变化。利用在线软件ps RNATarget预测到25个tsa-mi R396的靶基因并进行功能分类。成功克隆tsa-mi R396前体,并利用Mfold在线软件分析该前体能够折叠形成茎环结构。
- 宫晓琳熊雪梅吴莹王洋
- 关键词：盐芥MIRNA实时定量PCR靶基因前体
- 被子植物生殖细胞与精细胞的分离方法被引量：4
- 2014年
- 开花植物精细胞的发育经历一个独特的后减数分裂过程,在此过程中每个花粉母细胞减数分裂的产物——小孢子经不对称有丝分裂产生1个大的营养细胞和1个小的生殖细胞,随后生殖细胞经过正常的有丝分裂产生2个精细胞。近几年,随着高通量组学技术的不断完善,利用组学技术比较分析生殖细胞和精细胞的分子特征、揭示决定精细胞命运与功能以及受精识别的重要分子已成为植物生殖生物学备受关注的课题。开展此项研究的关键是建立能获得大量高纯度的生殖细胞与精细胞分离纯化技术。该文综述了被子植物生殖细胞和精细胞分离方法的主要研究进展,分析了关键方法的特点和要点以及不同方法之间的差异和共性,以期为相关领域的研究人员提供借鉴。
- 鲁云龙魏丽勤戴绍军王台
- 关键词：生殖细胞精细胞密度梯度离心分离纯化
- 拟南芥半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因AtCYS6克隆及功能分析
- 2020年
- 为了研究拟南芥半胱氨酸蛋白酶抑制剂AtCYS6基因在植物生长发育过程中的作用与功能,从拟南芥中克隆了半胱氨酸蛋白酶抑制剂AtCYS6基因,并对该基因进行生物信息学分析,亚细胞定位分析,蛋白质诱导、表达、纯化及功能研究。结果表明,AtCYS6蛋白等电点为5.85,化学式为C1179H1848N322O348S6,共含有3703个原子数,为亲水性蛋白;AtCYS6与十字花科的荠菜、荠蓝的同源性较高,同源性分别为81.1%,80.3%,同水稻、玉米和大豆的同源性较低,同源性分别为55.5%,54.3%,56.6%,且在氨基酸序列中间具有高度保守的Q-V-G(Gln-Val-Gly)序列;同时进化树分析显示AtCYS6与同属于十字花科的荠菜、荠蓝的亲缘性较近,同水稻、玉米、高粱、谷子等禾本科植物的亲缘性较远;亚细胞定位结果显示其定位于细胞质,与预测结果相符合;蛋白质诱导、表达和纯化得到大小约为52 ku的融合蛋白,其中AtCYS6蛋白质的分子量约为26 ku,与预测值相符合;Western Blot分析显示,诱导表达的融合蛋白正确翻译表达,且没有出现结构上的断裂或者降解的情况;蛋白酶活性分析表明,AtCYS6对木瓜蛋白酶具有抑制作用。研究结果可以为下一步在植物体内研究该基因的相关机理作用提供基础。
- 郭坤元郭坤元
- 关键词：拟南芥半胱氨酸蛋白酶抑制剂亚细胞定位原核表达
- 水稻cAPXa基因在烟草中的表达及其抗盐性研究
- 究采用RT-PCR方法克隆得到水稻细胞质抗坏血酸过氧化物酶(cAPXa)基因全长cDNA(基因登录号：D45423)。将该基因构建二元植物表达载体pBI121-APXa。用农杆菌EHA105侵染介导烟草叶盘转化法转基因,...
- 管清杰罗秋香柳参奎
- 关键词：水稻育种转基因水稻基因表达
- 细胞内膜泡运输中拴系因子的功能被引量：2
- 2012年
- 膜泡运输是不同细胞器间进行物质传递的基本方式,分为4个重要步骤:囊泡的出芽、转运、拴系和融合。在此过程中,有许多相关因子参与调控,如包被蛋白、Rab蛋白、拴系因子、SM蛋白和SNARE等。拴系因子在运输囊泡和靶位膜发生接触的最初阶段起重要调控作用,多数拴系因子形成大的多亚基复合体发挥功能。目前,关于拴系因子的功能已经有了一定的了解,在此,我们对酵母、哺乳动物以及植物细胞中的已知拴系因子的特点和功能进行了概述。
- 贾美慧屠宝玉韩宝达李立新
- 关键词：膜泡运输
- 小球藻亲环蛋白A的酶活性及过表达拟南芥抗盐性分析被引量：1
- 2017年
- 在前期研究中分离到噬碳酸盐小球藻(Chlorella sp.X1)的亲环蛋白基因CsCyp1A(登录号:KY207381),编码CsCyp1A蛋白是否具有肽酰脯氨酰顺反异构酶(PPIase)活性功能是进一步研究它参与小球藻耐盐生物学过程的基础。通过His标签的p QE-30-CsCyp1A原核蛋白表达载体,经IPTG诱导它的E.coli M15菌株表达融合蛋白,Nitra-柱纯化后获得纯化的30 kDa左右的His-CsCyp1A融合蛋白质,Western杂交检测到His CsCyp1A蛋白的杂交信号。酶活性分析显示,HisCsCyp1A融合蛋白中生色基团的产生速度明显快于对照,表明CsCyp1A蛋白可以催化底物N-succinyl-Xaa-Pro-Phe-p-nitroanilide中Xaa-Pro肽键的顺反折叠,说明纯化的CsCyp1A蛋白具有PPIase活性。典型的亲环蛋白家族成员具有肽酰脯氨酰顺反异构酶(PPIase)活性,参与折叠和转运、信号转导、免疫调节、细胞凋亡等生物学过程。真空渗入法侵染转化的拟南芥在35S启动子驱动下超表达CsCyp1A基因,耐盐性研究表明它提高了过表达株系对NaCl胁迫的耐性,揭示小球藻CsCyp1A基因的抗盐性功能,它将成为抗逆育种的基因资源。本研究也为探索小球藻亲环蛋白A的抗盐碱胁迫生物学作用和分子育种奠定了基础。
- 廖栩何明良张素艳马海燕王旭辉罗秋香管清杰
- 关键词：盐碱地
- 盐渍土壤人工林土壤呼吸日动态及影响因素被引量：5
- 2016年
- 以肇东实验林场轻度盐渍土壤落叶松人工林、水曲柳人工林、杨树人工林、樟子松人工林为研究对象，采用LI-6400土壤呼吸自动测量系统测定了盐渍土壤不同类型人工林土壤呼吸速率的日动态，并同时测定了观测点的土壤温度和湿度。结果表明：盐渍土壤不同类型人工林土壤呼吸速率差异显著，土壤呼吸速率白天呼吸速率均高于夜晚呼吸速率，一天中11：00—13：00呼吸速率出现最高值，19：00—21：00呼吸速率出现最低值，土壤呼吸速率与土壤温度的关系适合指数模型（R^2为0．71—0．87），土壤呼吸速率与土壤湿度呈显著的二次曲线关系（R^2为0．77～0．87）。
- 杜倩梁素钰刘铁男牛文婧李琳
- 关键词：土壤温度土壤湿度
- 拟南芥核酸酶基因AtCaN2克隆及功能分析
- 2020年
- 为了研究拟南芥核酸酶AtCaN2基因在植物生长发育过程中的作用与功能,从拟南芥中克隆了核酸酶AtCaN2基因,并对该基因进行生物信息学分析,亚细胞定位分析,蛋白质诱导、表达、纯化及功能研究。结果表明,AtCaN2蛋白等电点为8.45,化学式为C1116H1788N310O335S3,共含有3552个原子数,为亲水性蛋白;AtCaN2与十字花科亚麻荠的同源性较高,同源性为87.89%,与谷子、高粱和玉米的同源性较低,同源性分别是56.42%,57.35%,56.47%,且在氨基酸序列中间具有高度保守的D-X-D序列;同时进化树分析显示AtCaN2与十字花科亚麻荠的亲缘性最近,与谷子、玉米等禾本科植物的亲缘性比较远,这些结果同氨基酸序列比对的结果一致;亚细胞定位结果显示其定位于细胞质,与预测结果相符;蛋白质诱导和纯化得到大小约为35 ku的His-AtCaN2融合蛋白;Western Blot分析显示,诱导表达的融合蛋白正确翻译表达,且没有出现结构上的断裂或者降解的情况;小量诱导和大量诱导均有点突变后的His-AtCaN2(M)融合蛋白表达,且纯化后得到了点突变His-AtCaN2(M)较单一的条带;蛋白酶活性分析表明,His-AtCaN2融合蛋白对核酸底物具有降解能力,表现出较高的活性,而His-AtCaN2(M)点突变融合蛋白对核酸底物没有降解能力,底物基本上未降解。研究结果可以为下一步在植物体内研究AtCaN2基因的相关机理作用提供基础。
- 郭坤元郭坤元
- 关键词：拟南芥核酸酶亚细胞定位原核表达酶活性
