北京济普霖生物技术有限公司
- 作品数：45 被引量：47H指数：4
- 相关作者：王建武李京宋嘉哲何祖勇王美利更多>>
- 相关机构：中国农业大学无锡科捷诺生物科技有限责任公司北京奶牛中心更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生环境科学与工程更多>>
- 转基因和再克隆对克隆胚胎细胞凋亡的影响被引量：3
- 2009年
- 细胞凋亡在着床前胚胎发育过程中发挥着重要作用,胚胎凋亡检测能为获得高质量的体细胞克隆胚胎提供有益信息,进而有助于提高克隆效率.用原位末端标记法对牛的转基因克隆和转基因再克隆囊胚进行了细胞凋亡检测,再克隆囊胚是利用转基因克隆牛的体细胞作为供体细胞进行体细胞核移植后获得的第二代克隆胚胎.结果表明转基因克隆胚胎的囊胚发育率显著低于非转基因克隆胚胎的囊胚发育率,而转基因克隆囊胚的细胞凋亡指数显著高于非转基因克隆胚胎的细胞凋亡指数.此外,转基因再克隆胚胎的囊胚发育率和胚胎细胞凋亡指数与非转基因克隆胚胎的囊胚发育率和胚胎细胞凋亡指数相比差异性不显著.结果表明早期的转基因克隆胚胎发育能力的减弱可能是由于供体细胞的基因转染和药物筛选过程导致的,而再克隆对其早期胚胎的发育能力没有负面影响.
- 孙国杰李荣戴蕴平王海平王莉莉刘颖丁方荣卫恒习李宁
- 关键词：凋亡
- 高产仔转猪FSH-BAC基因小鼠模型研究
- 引言促卵泡激素(Follicle-Stimulating Hormone,FSH)是动物垂体前叶嗜碱性细胞合成和分泌的一种糖蛋白激素,它是下丘脑-垂体-性腺轴中的主要激素之一。分子质量为30 kDa,由α和β两个亚单位以...
- 毕明君童佳郑敏王美丽李宁
- 关键词：产仔数
- 文献传递
- 一种快速鉴定胚胎期小鼠性别的方法
- 本发明提供了一种快速鉴定胚胎期小鼠性别的方法，其包括如下步骤：取胚胎期14.5～16天的胎鼠，置于体视镜下，观察胎鼠第4、5对乳腺，乳腺原基呈现为白色圆点的为雄性；乳腺原基呈现为与皮肤界限模糊的圆晕的为雌性。经PCR验证...
- 宋嘉哲李宁
- “自我剪切”2A肽介导的Δ-12和ω-3脂肪酸脱氢酶以及过氧化氢酶在转基因小鼠肌肉表达研究
- 2012年
- 哺乳动物因为缺乏Δ-12和ω-3脂肪酸脱氢酶,不能自身合成必需的多不饱和脂肪酸.目前,通过转基因技术在哺乳动物体内表达ω-3脂肪酸脱氢酶,能将长链的n-6多不饱和脂肪酸转化成n-3多不饱和脂肪酸,造成体内长链的n-6多不饱和脂肪酸含量显著减低.本研究通过自我剪切2A肽介导Δ-12和ω-3脂肪酸脱氢酶(FAT-2和FAT-1)以及人过氧化氢酶(human catalase,hCAT)在小鼠的肌肉同时表达.结果表明,转基因小鼠肌肉中长链n-3多不饱和脂肪酸含量提高2.6倍,长链n-6多不饱和脂肪酸含量没有显著变化,而n-6/n-3比例显著降低(P<0.01).同时蛋白质印迹检测到人过氧化氢酶hCAT在小鼠的肌肉组织中表达,且过氧化氢酶活性比野生型小鼠显著提高(P<0.01).
- 方锐彭云乾郑敏孟庆勇
- 关键词：多不饱和脂肪酸过氧化氢酶
- 一种经修饰的雄性哺乳动物体细胞系及其制备方法与应用
- 本发明公开了一种经修饰的雄性哺乳动物体细胞系及其制备方法与应用。本发明所提供的经修饰的雄性哺乳动物体细胞系，它的Y染色体整合有标记蛋白基因；所述标记蛋白基因为荧光蛋白基因、β-半乳糖苷酶基因、荧光素酶基因或β-葡萄糖醛酸...
- 戴蕴平李宁
- 文献传递
- 利用体细胞核移植技术生产表达增强绿色荧光蛋白(EGFP)的转人溶菌酶基因(HLY)的猪克隆胚胎被引量：6
- 2008年
- 由于生理特性和器官大小的原因,猪在人类疾病模型和器官移植方面具有很大的应用潜力.正因如此,猪基因结构的修饰对农业生产和人类医学两方面都意义重大.研究用脂质体介导的方法转染了猪胎儿成纤维细胞,所用结构为双标的人溶菌酶质粒(pBC1-HLY-GFP-NEO).分别对包含两个品种(五指山猪、长白猪)的5个细胞系(sw7,sw8,slw3,slw6和slw9)进行了转染.经过14d,1000μg/mL浓度G418药物的筛选处理,sw7,sw8,slw3和slw6等4个细胞系的95以上细胞都表达绿色荧光蛋白,而细胞系slw9的转染效率只有49.3.用转染效率高的3个细胞系作为核供体构建猪克隆胚胎,通过电刺激方法进行融合和激活,然后在PZM3中体外培养.48h后,重构胚的平均卵裂率为76.7;经过7d培养后观察,有18.5的胚胎发育到囊胚阶段,其中93.3的囊胚在荧光显微镜下能够发出绿色荧光,但囊胚之间的荧光强度存在差异.研究结果表明,通过脂质体介导的方法可以获得高转染效率的转基因猪胎儿成纤维细胞系,但细胞系之间的转染效率不同;用转基因猪胎儿成纤维细胞构建的重构胚,能够成功发育到囊胚阶段,而且大多数为表达绿色荧光蛋白的阳性胚胎.
- 李秋艳卫恒习郭英李燕赵蕊于政权汤波张磊戴蕴平李宁
- 关键词：EGFP核移植胎儿成纤维细胞
- 制备富含多不饱和脂肪酸的转基因家畜的方法
- 本发明公开了一种制备富含多不饱和脂肪酸的转基因家畜的方法。该方法是将序列表中序列1和序列2的DNA分子导入哺乳动物体细胞中，获得的表达Δ-12脂肪酸脱氢酶和ω-3脂肪酸脱氢酶的转基因细胞；以所述的转基因细胞为核移植供体细...
- 汤波孔平李宁
- 文献传递
- 一种提高重组蛋白分泌效率的方法
- 本发明提供了一种提高重组蛋白分泌效率的方法，它是将小鼠转录因子Engrailed2的同源异型结构域中的分泌序列SS融合到重组蛋白的N端，所述分泌序列SS的氨基酸序列为：Ala Gln Glu Leu Ser Leu As...
- 何祖勇汤波李宁
- 文献传递
- 一种从转基因牛乳中纯化重组人乳铁蛋白的方法
- 本发明提供了一种从转基因牛乳中纯化重组人乳铁蛋白的方法，该方法首先制得去除乳脂和酪蛋白的乳清，然后用阳离子交换色谱进行纯化，并用0.4－1M NaCl、20mM Na<Sub>3</Sub>PO<Sub>4</Sub>梯...
- 李宁汤波杨鹏华王建武
- 文献传递
- 化学激活和季节对克隆猪出生率的影响被引量：5
- 2009年
- 为了解化学激活对克隆猪出生效率的影响,研究了体外成熟的猪卵母细胞被激活恢复减数分裂到克隆猪出生的整个过程.首先研究了电激活(Ele),Ele+CHX+CB和Ele+6-DMAP3种激活方法对猪卵母细胞孤雌激活(parthenogenetic,PA)和核移植(nucleartransfer,NT)重构胚体外发育的影响.比较了Ele或Ele+CHX+CB激活方法对克隆猪出生效率的影响.实验中单独列出了PA胚的扩张囊胚率或NT优质囊胚率来代表囊胚的质量.结果表明:化学联合激活提高了PA的囊胚率和扩张囊胚率,但对PA胚的卵裂率和囊胚细胞数没有显著影响(P>0.05).Ele+6-DMAP对PA胚的囊胚率和扩张囊胚率有显著提高(P<0.05),但对NT胚的囊胚率和优质囊胚率没有提高甚至降低了NT胚的发育.Ele+CHX+CB虽然提高了NT胚的囊胚率(P<0.05),但对优质囊胚率没有影响.Ele+CHX+CB激活方法使克隆猪出生率有所提高但不显著.本文还研究了季节对猪孤雌发育和克隆猪出生率的影响.结果表明,春季收集的猪卵母细胞使用3种激活方法卵母细胞的孤雌囊胚率均高于冬季收集的猪卵母细胞的囊胚率.春季和冬季进行移植,克隆猪出生率没有区别.综上,在PA中获得的结果与NT胚中获得的结果不一定完全匹配,说明孤雌激活和重构胚的激活机制还是有区别的.化学联合激活虽然能提高囊胚率,但它的作用相当于降低囊胚形成的门槛,却不是从本质上改变囊胚发育能力,因此不能显著提高克隆猪出生效率.春季收集的卵母细胞在体外培养中的发育能力好于冬季收集的卵母细胞,但季节对克隆猪出生率没有显著影响.
- 马育芳卫恒习李燕李秋艳方锐赵蕊张坤薛恺娄颜坤戴蕴平连林生李宁
- 关键词：孤雌激活化学激活体细胞核移植克隆猪
