石河子大学生命科学学院农业生物技术中心重点实验室 作品数:175 被引量:588 H指数:10 相关作者: 崔郑龙 顾超 裴娟 程晨 贾俊忠 更多>> 相关机构: 中国热带农业科学院热带生物技术研究所 北京大学生命科学学院 中国农业科学院棉花研究所农业部棉花遗传改良重点开放实验室 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家科技重大专项 兵团博士基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 轻工技术与工程 更多>>
植物乙酰辅酶A羧化酶β亚基accD在因研究进展 被引量:3 2008年 综述了乙酰辅酶A羧化酶及其催化域羧基转移酶(Carboxyltransferase,CT)的β亚基(β-CT)的分布和生理功能、β-CT编码基因accD的分子生物学特征及乙酰辅酶A羧化酶在脂肪酸代谢工程中的应用研究进展。 崔燕 祝建波 张煜星关键词:乙酰辅酶A羧化酶 薄荷组织培养及抗除草剂基因的遗传转化 2018年 薄荷(Mentha haplocalyx Briq.)是一类用途广泛的中药材,是世界三大香料之一,也是我国重要的经济作物。以薄荷茎段为外植体,建立高效的薄荷离体培养植株再生体系,确定草甘膦筛选的选择压,并将带除草剂标记的植物表达载体p BI121-Ubi-epsps通过农杆菌介导转化薄荷,用PCR和RT-PCR法对转化薄荷进行分子鉴定。结果表明,薄荷对除草剂草甘膦的最适筛选浓度为10 mg/L,通过分子鉴定确定转基因薄荷已获得。试验结果对后期杂种优势的利用、种质资源的保存以及植物新品种的培育奠定基础,具有重要的理论与实践意义。 梁文洁 张丽 郭新勇 王爱英 向本春 祝建波关键词:薄荷 除草剂 4种食品防腐剂在铁皮石斛开放式组织培养中的抑菌效果 被引量:5 2017年 就4种食品防腐剂对铁皮石斛幼苗和原球茎在开放式组织培养中的抑菌效果进行试验。结果表明:尼泊金复合酯和肉桂酸钾具有较好的抑菌效果,0.12 g/L的尼泊金复合酯和0.09 g/L的肉桂酸钾可有效抑制培养基污染;尼泊金复合酯和肉桂酸钾对原球茎的分化具有抑制作用,浓度越高作用越明显;尼泊金复合酯和肉桂酸钾的复配质量比为2∶3且总浓度为0.07 g/L时,抑菌效果最佳,且对幼苗生长无显著影响。 杨丽霞 杨丽 李永梅 祝建波 冯玉杰关键词:食品防腐剂 抑菌效果 铁皮石斛 Prokaryotic Expression of Pseudomonas Aeruginosa Lipase Gene 被引量:7 2008年 [Objective] The aim of this study was to investigate the prokaryotic expression of pseudomonas aeruginosa Lipase gene.[Method]Lipase gene was amplified by PCR from the genome DNA of pseudomonas aeruginosa,and its nucleotide sequence was determined.The prokaryotic expression vector of Lipase gene was constructed by the gene recombination technique.The protein expression was induced for 4 hours by IPTG with the final concentration of 1.0 mmol/L,and then SDS-PAGE electrophoresis was analyzed.[Result]The sequence of mature peptides in Lipase gene cloned from pseudomonas aeruginosa had a 99.36% homology with that of pseudomonas aeruginosa lipase submitted in NCBI,so the prokaryotic expression vector of Lipase gene pET32a-Lip was successfully constructed.Furthermore,the results of SDS-PAGE electrophoresis showed that the target gene was expressed highly and effectively.[Conclusion]The cloned pseudomonas aeruginosa lipase with its signal peptide could be normally expressed in E.coli and also used for further study. 张煜星 武寒雪 祝建波 刘焕 周鹏关键词:PSEUDOMONAS AERUGINOSA LIPASE PROKARYOTIC EXPRESSION HARDY基因植物表达载体的构建及在番茄中的遗传转化 被引量:8 2009年 HARDY(HRD)是AP2/ERF-like家族转录因子的一员,已有的研究表明它的过量表达可以增强水稻的抗旱性、提高水稻的水分利用效率。为了研究它是否在其他的农作物中具有普遍的适用性,本试验从拟南芥中克隆了HRD基因,成功构建了HRD基因的高效植物表达载体pBIN-HRD。采用农杆菌介导法转化番茄(亚心87-5),经PCR、RT-PCR分析表明,阳性的转HRD基因植株已获得表达。 赵红英 祝建波 王爱英 沈海涛 张煜星关键词:HRD 转录因子 番茄 水分利用率 大叶落地生根STM基因植物表达载体构建及烟草转化 被引量:3 2012年 为了研究大叶落地生根中(Kalanchoe daigremontiana)的KdSTM基因对侧芽的形成具有一定的促进作用。采用RT-PCR技术以大叶落地生根叶片边缘的小植株的总cDNA为模板,克隆得到KdSTM基因。KdSTM开放阅读框750 bp,编码249个氨基酸残基。为进一步研究该基因是否具有促进植物芽再生的作用,构建了p35S::KdSTM植物过表达载体,利用农杆菌介导将植物表达载体侵染烟草,转化植株经分子鉴定.成功获得转基因烟草植株。通过对转基因烟草试管苗和野生型试管苗的表型观察,发现二者的表型存在有很大的差异。转基因型烟草的叶片浓绿,早期出现较小分枝侧芽,而野生型未出现侧芽。本研究的结果表明克隆的大叶落地生根中KdSTM基因具有生物学活性,对侧芽的形成具有一定促进的作用。 游义霞 黄先忠 郑银英 崔百明关键词:克隆 KNOX 小拟南芥液泡膜H^+-PPase基因OpVP1的克隆、序列分析及表达 被引量:8 2013年 植物液泡膜质子转运无机焦磷酸酶(V-PPase)酸化植物液泡并为液泡的次级转运系统提供能量,在植物耐盐性起着重要的作用。为了克隆小拟南芥液泡膜H+-PPase基因,采用RT-PCR结合RACE的方法从小拟南芥叶片的cDNA中克隆了1个液泡膜H+-PPase基因,命名为OpVP1。OpVP1基因的cDNA全长为2698bp,开放阅读框(ORF)为2313bp,编码770个氨基酸。OpVP1蛋白与琴叶拟南芥、拟南芥相似性最高,分别为98.6%、98.4%。系统进化分析表明OpVP1基因属于Ⅰ型液泡膜质子焦磷酸酶基因。OpVP1蛋白的分子量是80745.9Da,等电点pI为5.13,含有14个跨膜螺旋结构。三维结构分析表明OpVP1蛋白是由2个单体组成的二聚体蛋白。qRT-PCR表明OpVP1基因在角果中表达高于根、茎、叶和花中的表达。 徐芳 赵云霞 魏艳玲 李超 孙黎 黄先忠关键词:焦磷酸酶 小拟南芥 克隆 过量表达棉花GDSL脂肪酶提高甘蓝型油菜油脂含量的研究 被引量:4 2014年 GDSL脂肪酶作为一种脂质水解酶具有广泛的底物特异性,在植物的油脂代谢、生长发育等众多生理过程中发挥着重要作用。利用RT—PCR技术从发育的陆地棉种子中克隆得到棉花的GDSL脂肪酶基因的cDNA,该基因开放读码框为1068bp,编码含有356个氨基酸的蛋白质。对棉花种子发育不同时期进行半定量PCR分析的结果表明,在种子发育15—20d时,GhGLIP基因的表达量较高。将该基因构建到真核表达载体pCAMBIA2300中,转入农杆菌GV3101后转化甘蓝型油菜野油19,通过筛选和鉴定获得转基因阳性油菜株系。转基因油菜的GDSL脂肪酶活力获得了显著提高,转基因油菜种子的油脂含量比野生型油菜提高了8.68%,提高比率为24.3%。 郝晓云 蔡永智 袁哈利 李榕 王斐 李鸿彬关键词:棉花种子 油脂含量 甘蓝型油菜 棉花磷脂酶C基因的克隆及参与油脂代谢的功能分析 被引量:1 2015年 以陆地棉胚珠和纤维为实验材料,利用RT-PCR技术克隆得到磷脂酶C(Phospholipase C,PLC)基因(GhPLC,GenBank登录号:KR154219),将棉花磷脂酶C基因转化拟南芥,分析其在油脂代谢过程中的重要作用。测序鉴定显示,GhPLC基因的全长开放读码框为1 524bp,编码包含508个氨基酸的蛋白质,理论分子量约为55kD。序列比对分析显示,GhPLC属于典型的碱性磷酸酶超家族的磷脂酶。利用pET32a-GhPLC原核表达获得分子量约为55kD左右的重组蛋白GhPLC;酶活力分析显示,重组GhPLC蛋白具有较高的将卵磷脂(PC)催化为二酰甘油(DAG)的酶活力。半定量RT-PCR结果表明,GhPLC基因参与棉花种子和纤维发育过程。构建植物过量表达载体35S∷GhPLC并转化哥伦比亚野生型拟南芥,转基因拟南芥中GhPLC基因的表达和PLC酶活力显著提高,且转基因拟南芥种子的油脂含量提高了5.3%。 梁卓 谭兰 袁哈利 谢全亮 王斐 李鸿彬关键词:棉花 磷脂酶C 油脂含量 拟南芥 甘蓝型油菜下胚轴和带柄子叶再生体系研究 被引量:2 2013年 以甘蓝型油菜野油19号的下胚轴和带柄子叶为外植体,研究其下胚轴和带柄子叶在不同浓度激素配比下的分化率及再生频率的变化。该品系的油菜下胚轴和带柄子叶在1.5 mg/L的2,4-D中预培养4 d后,转入分化培养基中,其愈伤组织形成早,发生快,再生频率和分化频率均较高。其中,下胚轴转入MS+3 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA培养基中的分化率和再生频率最高,再生频率达到86.67%;带柄子叶外植体的再生频率要比下胚轴的再生频率低,在MS+4 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA的分化培养基中芽的再生频率为46.67%。本研究初步建立了甘蓝型油菜野油19号的高频率再生体系。 郝晓云 沈海涛 李鸿彬关键词:甘蓝型油菜 下胚轴 带柄子叶