海南海德热带农业资源研究所有限公司
- 作品数：15 被引量：46H指数：5
- 相关作者：谢柳刘卓明刘辰谭寿湖赵立仕更多>>
- 相关机构：广西大学贵州大学南开大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 黑龙江凉水自然保护区苏云金芽孢杆菌的收集与鉴定被引量：2
- 2009年
- 黑龙江凉水自然保护区是我国现有保存下来的较大片原始红松林基地之一，总面积6394hm^2，森林覆盖率95％以上。本研究从小兴安岭凉水自然保护区采集土样782份，采用醋酸钠培养基结合高温方法筛选土壤中的芽孢杆菌，通过光学显微镜观察鉴定产生伴胞晶体的苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis．Bt）。总计分离得到芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌分别为1735株和33株，Bt菌株的分离率和出菌率分别为1．90％和4．22％。利用SDS-PAGE和PCR—RFLP方法对筛选获得的成分离株进行了杀虫晶体蛋白和基因型分析，结果表明14株产菱形伴胞的＆菌株，SDS-PAGE电泳分析芽孢后期产生分子量大小130kD蛋白带，PCR-RFLP分析初步鉴定为crylAc基因，其它产圆形或其它不定形晶体蛋白的＆分离菌中，芽孢后期主要蛋白大小为20～150kD不等，PCR—RFLP方法鉴定结合PCR片段测序分析这些菌株含有新型cry4、cry39和cry40基因等。本研究是“中国助资源收鉴与利用”项目组成部分之一，凉水自然保护区苏云金芽孢杆菌的收集与鉴定目的是要对整个东北地区成资源分布和多样性作一个初步评估，实验结果表明东北森林地区具有丰富多样的威菌株和杀虫基因资源。
- 张文飞谢柳赵立仕方宣钧柳参奎
- 关键词：苏云金芽孢杆菌SDS-PAGEPCR-RFLP
- 槟榔高产育种的理想株型设计
- 2009年
- 本研究通过对槟榔高产株型的分析和育种栽培的实践,提出了"基于理想株型设计的槟榔高产育种"思路。理想株的叶片呈明显披垂型,与主杆间的夹角为70.5°±3.35°,这种叶片的空间分布可能有利于阳光的吸收。理想株的第一苞发育节位数和初始节位高度显著较低,在第6节至第7节开始苞的分化和发育,初始节位高度为45cm左右。理想株的果穗分枝数在14个左右,与其它株型基本一样,但果穗小花数为179±19.9个,显著高于其它株型。理想型株型植株矮小,节间长度较短,叶片较大,散状披垂,展开角度较大,有利于接受更多的光照,进行光合作用,产生更多有机物。
- 黄昭奋董峰郦建权方富炯
- 关键词：CATECHU理想株型高产育种
- 高产槟榔新品种:槟德1号和槟德2号被引量：2
- 2009年
- 2000年以来,海南省热带农业资源研究所＂基于理想株型设计的槟榔高产育种＂思路,并在2003-2004年在海南三亚崖城、雅亮等地进行实地调查,选择具有＂高产槟榔理想株＂植株形态特征和高产特征的槟榔种质，并收集成熟果实，于2004年在海南省热带农业资源研究所进行营养袋育苗、观察植株株型、测量茎秆的节数、节问长度、有效叶片数、
- 方富炯郦建权黄昭奋
- 关键词：槟榔理想株型农业资源植株形态营养袋育苗
- 乙醇脱氢酶(ADH)家族生物信息学分析被引量：9
- 2009年
- 本研究用生物信息学的方法分析了玉米等7个物种ADH的保守功能域、蛋白二级结构和进化关系。分析证实,植物ADH通常含有3个保守功能域,它们具有GroES结构的ADH_N结构域,Rossmann折叠NAD(P)(+)结合蛋白和锌结合位点,这3个保守结构在物种中具有相当的保守性。二级结构的分析表明,在我们研究的物种中,每个物种的两个ADH同工酶折叠情况大体相同,物种间蛋白二级结构也趋向一致。通过构建系统进化树,分析了供试物种中ADH以及ADH两个同工酶间的进化关系。初步显示,在进化上,单、双子叶植物源自不同的ADH祖先。双子叶植物ADH在物种间具有差异;而在单子叶植物不同物种其ADH同工酶出现分化。
- 石之光叶磊巩鹏涛赵德刚柳参奎
- 关键词：乙醇脱氢酶生物信息学保守结构域蛋白质二级结构
- 对鳞翅目昆虫有杀虫活性的Bt crylAc22基因及其应用
- 本发明涉及一种从苏云金杆芽孢杆菌(Bt)野生菌株W015－1中分离克隆的杀虫晶体蛋白基因cry1Ac22及其对鳞翅目昆虫具有高效杀虫活性和应用。本发明采用反向PCR克隆法从Bt菌株w015－1中克隆了Cry1Ac全长基因...
- 方宣钧张文飞谢柳刘卓明
- 文献传递
- 来自海南等地的17个Bt分离株质粒多样性分析
- 2009年
- 本研究采用琼脂糖凝胶电泳对分离自海南岛的12个Bt菌株与分离自广西、黑龙江的5株Bt菌株及2株Bt模式菌株进行质粒数量、大小等特征分析。19个供试菌株可区分为16种独特的质粒电泳图谱,充分显示出不同来源Bt菌株的质粒多样性。进一步选择了其中的10个菌株,利用包埋法制备琼脂块进行脉冲场凝胶电泳(PFGE),结果表明苏云金芽孢杆菌大质粒组成特征也具有丰富多样性。但是供试菌株的质粒电泳图谱并未体现与地理和生态特征相关联的特征差异。研究结果初步证实海南分离株S3078-1是一株无内生质粒的Bt菌株,而S3031-1和S3073-1两个分离株仅有一个大质粒存在,这三个分离株将为进一步研究质粒功能提供初始菌株。本研究进一步暗示将琼脂糖凝胶电泳和脉冲场凝胶电泳结合起来研究质粒特征提高了结果的可靠性。
- 韩丽珍王茜谢柳张文飞李有志方宣钧
- 关键词：BT菌株质粒图谱
- 苏云金芽孢杆菌基因组研究概况被引量：5
- 2009年
- 迄今为止,全球已有2个Bt株菌株完成了全基因组测序,1个Bt菌株正在拼接中,15个Bt菌株正在进行测序中。已有22个Bt质粒完成了全序列测定。Bt是作为生物农药使用最广泛的微生物菌株,也是最为成功地将其杀虫晶体蛋白基因应用于植物转基因的微生物。在基因组进化、新基因发现、基因表达调控等方面一直是科学家研究的热点,并取得了相当多的成果。本文概述了苏云金芽孢杆菌基因组测序现状、基因组特征及比较基因学等方面的研究进展。
- 谭寿湖张文飞叶大维
- 关键词：苏云金芽孢杆菌比较基因组
- 海南岛热带雨林区芽孢杆菌收集及Bt菌鉴定被引量：14
- 2009年
- 本研究系统地对海南岛热带雨林自然保护区进行了土壤样品的采集、芽孢杆菌的分离收集和Bt菌株的鉴定。从尖峰岭热带雨林区、五指山热带雨林区、吊罗山热带雨林区、霸王岭热带雨林区总共采集了土壤样品1882份,采用醋酸钠培养基结合高温方法分离出芽孢杆菌3924份,鉴定出Bt分离株158份,Bt菌株的分离率和出菌率分别为4.03%和8.40%。结果分析表明,海南岛热带雨林区芽孢杆菌及Bt菌株分布对环境和生态表现出一定的规律性,一般海拔900m至1400m的Bt菌株含量高、植被覆盖率高,土壤腐殖质含量高的热带沟谷雨林带Bt菌株含量最高。显微观察发现,获得的Bt菌株其伴胞晶体有菱形、球形、方形、椭球形、不定性等多种形状。利用SDS-PAGE方法对获得的Bt分离株进行了伴胞晶体进行分析,发现伴胞晶体的分子量有20kD到150kD不等。进一步利用PCR-RFLP技术对Bt分离株进行了cry基因型的分析,初步发现这些Bt菌株含有cry1、cry3、cry4、cry6、cry30、cry40等基因型。我们还利用鳞翅目昆虫小菜蛾和鞘翅目昆虫椰心叶甲进行部分Bt分离株的生物测定,初步结果显示本研究鉴定出的Bt分离株具有不同的抗虫靶标,对同一靶标昆虫也表现出不同的杀虫活性。整体而言,本研究结果显示出海南岛热带热带雨林自然保护区因其独特的热带地理生境、自然的生物演化系统,使得热带雨林区蕴藏了Bt菌株资源多样化,值得期待挖掘出一些新的菌株和新的基因资源。
- 张文飞全嘉新谢柳王茜易艳桃丰玫玫朱麟王锐萍方宣钧
- 关键词：芽孢杆菌苏云金芽孢杆菌
- 苏云金芽孢杆菌S1478-1分离株的特性鉴定及cry1Ac同源基因克隆被引量：6
- 2009年
- 本研究对从海南岛尖峰岭热带雨林自然保护区的土壤样品中分离出的Bt菌株S1478-1进行了特性鉴定,研究表明S1478-1分离株菌落形态和生长特征和Bt参照菌株HD73极其相似。16SrDNA序列分析表明,S1478-1分离株与其它B.thuringiensis、B.cereus和B.anthracis的16SrDNA序列相似性达到99%。分离株能产菱形伴胞晶体,SDS-PAGE蛋白电泳分析表明,菌株在生长后期,形成芽孢同时分泌130kD大小的晶体蛋白。生物测定表明S1478-1分离株对小菜蛾具有很高的毒杀活性,LC50值高达5.159×108cfu/mL。初步显示S1478-1分离株可作为防治鳞翅目害虫的生物农药菌株。利用PCR-RFLP方法鉴定S1478-1分离株含有cry1Ac同源基因,以PCR粘性端克隆方法扩增全长基因,序列测定表明该基因ORF为3537bp,编码1178个氨基酸,推定的编码蛋白分子量为133.3kD,与其它cry1Ac基因序列最高达到99%同源,因此,该基因可作为杀虫工程菌及培育转基因抗虫作物的候选基因。
- 张文飞姚淑霞谢柳杨明坤王锐萍叶大维方宣钧
- 关键词：苏云金芽孢杆菌生物测定
- 苏云金芽孢杆菌Cry1Ac杀虫晶体蛋白及其分子设计被引量：5
- 2009年
- cry1Ac编码的杀虫晶体蛋白是苏云金芽孢杆菌(Bt)产生的多种杀虫晶体蛋白中对鳞翅目昆虫有很高毒性的蛋白。第一个Cry1Ac杀虫晶体蛋白最早在库斯塔克亚种HD73中以伴胞晶体形式分离获得,其编码区为3534bp,编码蛋白分子量为133kD,含1178个氨基酸,等电点为4.84。自此以来,Cry1Ac杀虫晶体蛋白结构、功能以及应用研究一直是Bt杀虫晶体蛋白研究的重要方向。本文介绍了苏云金芽孢杆菌中应用最广泛的Cry1Ac杀虫晶体蛋白家族的结构、功能及其基因分类,并进一步就基于苏云金芽孢杆菌Cry1Ac杀虫晶体蛋白的基因工程研究做了分析,提出了持续利用BtCry1Ac杀虫晶体蛋白的一些见解。
- 刘卓明谢柳叶大维
- 关键词：苏云金芽孢杆菌分子设计
