中国热带农业科学院环境与植物保护研究所热带作物生物技术国家重点实验室
- 作品数：15 被引量：138H指数：6
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- 相关领域：农业科学生物学环境科学与工程更多>>
- 金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae HN1)几丁质酶基因的克隆及高效表达被引量：8
- 2006年
- 几丁质酶是昆虫病原真菌金龟子绿僵菌致病力的主要因子之一。用RT-PCR方法,从分离筛选到的高毒力金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae伽HN1中,扩增得到几丁质酶基因全长,此基因全长为1275bp,登录号为DQ011865,经Blastn分析此基因序列与M.anisopliae E6的chi1基因(AFD2749)同源率为96％。以pET-22b(+)为基础载体,构建pET-chi重组表达载体,在大肠杆菌(Escherichia coli)BL 21中进行表达。经SDS-PAGE分析,获得了42kDa大小的重组目的蛋白,目的蛋白占表达总蛋白含量的63．3％。菌体经冷冻与超声波破碎后,按DNS法可测得几丁质酶的活性。
- 任文彬张世清黄俊生
- 关键词：金龟子绿僵菌几丁质酶基因大肠杆菌
- 发酵条件对拟青霉E7菌株产脱乙酰几丁质酶的影响被引量：18
- 2006年
- 以脱乙酰几丁质为惟一碳源和氮源,通过平板透明圈筛选法,从土壤中筛选分离了30株产脱乙酰几丁质酶的菌株,根据产生透明圈的大小和酶活测定,从中选出产脱乙酰几丁质酶活力最高的拟青霉E7菌株进行产酶发酵条件的进一步研究。结果表明,0.5%￣1%的脱乙酰几丁质浓度有利于产酶,高于2%则对其产酶有抑制作用;金属离子对酶活力有一定的影响,在基本培养基中添加Mn2+对产酶有较强的诱导作用,而加入Ca2+则对产酶有一定的抑制作用;以蛋白胨为氮源时,产酶活力最高,可达到60U·mL-1;pH对E7菌株的产酶活力影响较大,方差分析表明,不同pH值的产酶活力存在显著差异(a=5%),pH在4.0￣6.0范围内酶活力较稳定,pH高于6.0酶活力很低,不利于产酶。
- 任文彬蒋桂芳张世清黄俊生
- 关键词：拟青霉酶活力
- 根癌农杆菌介导淡紫拟青霉的遗传转化
- 淡紫拟青霉Paecilomyces lilacinus是一种典型的土壤及多种植物根系的习居菌，是有效防治线虫的天敌真菌之一。国际马铃薯中心昆虫系Jatala博士1979年首次报道，P.Lilacinus能够有效防治南方根...
- 赵培静任文彬缪承杜黄俊生
- 关键词：根癌农杆菌淡紫拟青霉
- 文献传递
- 金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae HN1)几丁质酶基因的克隆及高效表达
- 几丁质酶是昆虫病原真菌金龟子绿僵菌致病力的主要因子之一.本实验用RT-PCR方法,从本实验室分离筛选到的高毒力金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae HN1中,扩增得到几丁质酶基因全长,此基因全长为12...
- 任文彬张世清黄俊生
- 关键词：金龟子绿僵菌几丁质酶基因大肠杆菌
- 香蕉枯萎病菌Fow1基因的克隆及序列分析被引量：5
- 2007年
- 为了解Fow1基因在尖镰刀菌古巴专化型侵染香蕉过程中的作用,及其与尖镰刀菌古巴专化型生理小种1号和生理小种4号之间的致病力差异的关系,采用PCR和RT-PCR方法扩增了2个生理小种的Fow1基因,并对扩增产物进行了克隆测序及相似序列搜索和比对,还对基因编码的蛋白进行了结构预测和功能分析。研究结果表明2个生理小种Fow1基因开放阅读框均为957bp,编码318个氨基酸,基因序列和氨基酸序列差异小,而且两个生理小种Fow1基因所编码的蛋白均具有酵母线粒体载体蛋白典型的结构特征,推测Fow1基因可能为香蕉枯萎病菌在香蕉组织中定殖所必需。从Fow1基因序列及其编码蛋白的氨基酸序列看,2个生理小种致病力的差异与Fow1基因并无明显对应关系,这为进一步研究Fow1基因功能奠定了基础。
- 郭立佳黄俊生
- 关键词：生理小种
- 绿僵菌防治椰心叶甲的毒力菌株筛选被引量：12
- 2006年
- 在室内用绿僵菌的分生孢子悬浮液喷洒椰心叶甲成虫和幼虫,检测了不同来源的21株绿僵菌菌株对椰心叶甲的致病力。初步试验结果表明,A类菌株中的MA2、MA4和MA9,B类菌株中的MB2、MB4、MB5、MB6和MB7等对椰心叶甲的成虫和幼虫均具有较理想的效果,处理5天后成虫和幼虫的平均僵死率可达95%以上。但由于A类菌株比B类菌株产孢快、孢子量多,所以对A类菌株的MA2、MA4和MA9菌株再做进一步的室内毒力试验。最终结果表明,MA4菌株对椰心叶甲的毒力相对是最高的,具有较大的开发利用价值。
- 宋妍詹儒林张世清郭立佳许天委黄俊生
- 关键词：绿僵菌椰心叶甲
- 香蕉炭疽菌rDNA ITS区的分子鉴定与检测被引量：58
- 2006年
- 香蕉炭疽病菌(Colletotrichum musae)是一种引起香蕉采后病害的最重要病原,本研究用真菌18S^28S间的内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)通用引物18SF和28SR扩增香蕉炭疽菌和其它外群真菌的基因组DNA,扩增出约510 bp的片段;通过克隆测序香蕉炭疽菌的ITS全序列并与GenBank中炭疽菌属其它种的ITS序列比对,设计出香蕉炭疽菌的特异性引物ColM1和ColM2。用此特异引物可以从香蕉炭疽菌株中扩增出382 bp的特异性片段,而其余20个参试菌株和香蕉组织的PCR反应结果为阴性,灵敏度实验证明可以检测到目标DNA的浓度为0.1 pg。该方法可用于快速、准确和灵敏地检测香蕉炭疽菌,为快速监测组织中有无香蕉炭疽病菌潜伏侵染与及早采取防治措施提供积极的指导意义。
- 杨腊英黄华平唐复润胡美娇张世清黄俊生
- 关键词：香蕉炭疽菌特异性引物PCR检测
- 爪哇正青霉Q-5产几丁质酶发酵条件的研究被引量：3
- 2006年
- 通过单因素试验对爪哇正青霉Q-5产几丁质酶的条件进行了研究。结果表明:0.5%(w/v)几丁质粉末对爪哇正青霉Q-5产几丁质酶诱导性最强;pH值在5.0～7.0的范围内酶活力最稳定,pH值为4.0时,酶活力最低;金属离子Mn2+和Cu2+对爪哇正青霉Q-5产几丁质酶有明显的促进作用,而Fe3+和Ca2+则完全抑制几丁质酶的活性;以蛋白胨为氮源时,酶的活力最高可达24 U;吐温-80作为表面活性剂能显著提高几丁质酶活性。
- 许天委张世清黄俊生
- 关键词：单因素几丁质酶
- 金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae HN1)几丁质酶基因的克隆及高效表达
- 几丁质酶是昆虫病原真菌金龟子绿僵菌致病力的主要因子之一。本实验用 RT-PCR方法,从本实验室分离筛选到的高毒力金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae HN1中, 扩增得到几丁质酶基因全长,此基因全长为...
- 任文彬张世清黄俊生
- 关键词：金龟子绿僵菌几丁质酶基因大肠杆菌
- 文献传递
- 椰心叶甲ITS、5.8S rDNA序列分析被引量：7
- 2006年
- 利用PCR和DNA测序技术,克隆了椰心叶甲的内转录间隔区ITS及5.8S rDNA序列,其全长为2 107 bp,并对这一序列进行了详细的分析,为研究椰心叶甲地理种群的差异及其不同类群之间的遗传关系,并重构椰心叶甲从原产地到各受灾地区的传播路线等方面奠定了分子基础,对制定椰心叶甲的综合防治策略具有指导意义。
- 黄华平杨腊英程子路黄俊生
- 关键词：椰心叶甲RDNAITS1ITS2
