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华南农业大学兽医学院广东省兽药研制与安全评价重点实验室: 作品数：277 被引量：1,500H指数：20; 相关作者：曾振灵李雪张文慧汤电王丽华更多>>; 相关机构：广东海洋大学农学院广东海洋大学农学院动物医学系暨南大学药学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金长江学者和创新团队发展计划更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生生物学环境科学与工程更多>>

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动物源qnr基因阳性肠杆菌Ⅰ类整合子的研究被引量：3: 2012年; 【目的】研究Ⅰ类整合子在qnr基因阳性的动物源肠杆菌中的流行情况,探讨qnr基因与Ⅰ类整合子之间的流行相关性。【方法】PCR测序检测从526株动物源肠杆菌中筛选到的14株qnr基因阳性株的Ⅰ类整合酶,并对Ⅰ类整合酶阳性菌的基因盒进行长片段PCR测序。【结果】14株qnr基因阳性动物源肠杆菌均携带Ⅰ类整合子,且每个基因盒至少携带两个耐药基因。在所发现的基因盒中二氢叶酸还原酶(dfrA)和氨基糖苷腺苷酰转移酶(aadA)的检出率最高。本研究还检测到了1个携带林可胺核苷酸转移酶(linF)和2个携带利福平核糖基转移酶(arr-3)的基因盒子。2株aac(6')-Ⅰb-cr基因阳性菌的aac(6')-Ⅰb-cr基因也位于基因盒中,且均位于一空基因盒的下游。在本研究检测到的基因盒中,dfrA27-aadA2、dfrA12-orfF-aadA2和dfrA17-aadA5为检出率最高的基因盒排列。【结论】qnr基因与Ⅰ类整合子具有明显的流行相关性。; 岳磊陈雪影庄娜何家欣时伟廖晓萍刘雅红; 关键词：QNR基因动物源肠杆菌整合子

临床分离食品动物源多重耐药大肠杆菌耐药分子特征研究被引量：1: 2008年; 本研究从主动外排机制、膜孔蛋白缺失及氟喹诺酮类药物作用靶位改变等几个方面探讨临床分离的20株动物源性多重耐药大肠杆菌的耐药分子特征。实验结果表明,20株临床分离大肠杆菌gyrA83、gyrA87、parC80的突变率分别为95%、85%、55%。gyrA和parC共同突变的有11株,突变率为55%;20株多重耐药菌大肠杆菌普遍存在主动外排机制,主要介导对部分氨基糖苷类、四环素、氟苯尼考和氟喹诺酮类药物耐药,当添加外排泵抑制剂PAβN后多数菌株庆大霉素、新霉素、四环素、氟苯尼考及氟喹诺酮类药物的MIC都降低了2倍～256倍。利用建立的ELISA方法检测外排泵AcrA蛋白的表达水平,结果证实所有临床分离菌外排泵表达都增高;20株分离大肠杆菌中,部分菌株缺失OmpC或OmpF蛋白,同时缺失这两个蛋白的只有3株。部分菌株OmpF蛋白条带附近存在有多重耐药相关蛋白(Mar)。本研究结果揭示多重耐药大肠杆菌对常用抗菌药物高水平的耐药表型是主动外排机制、药物作用靶位的改变、外膜通透性的改变及其它机制共同作用的结果。; 蒋红霞吕殿红陈杖榴陈继荣谢远东曾振灵; 关键词：大肠杆菌主动外排膜孔蛋白耐药性

鸡毒支原体实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：19: 2011年; 【目的】建立基于鸡毒支原体种特异性粘附蛋白编码基因pvpA的实时荧光定量PCR检测方法。【方法】根据GenBank公布的不同国家和地区鸡毒支原体pvpA基因序列,在高度保守区域设计一对引物。以临床分离鸡毒支原体RC1为模板扩增pvpA基因,将其连接到PMD19-T载体,转化至大肠杆菌DH5α中,经PCR和酶切鉴定并测序验证后得到阳性重组质粒rPvpA90。以rPvpA90为模板建立SYBR Green I荧光定量的标准曲线和溶点曲线,并进行特异性,灵敏性,重复性及临床样本检测试验,评价该方法的可行性。【结果】所建立的荧光定量PCR标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,溶点曲线特异,相关系数为0.990。最低检测限为72拷贝/20μL,其敏感性比常规PCR至少高100倍;无论是对不同病原DNA单模板还是几种病原DNA混合模板进行扩增,该方法都呈现很好的特异性;重复性试验中,批内和批间变异系数均小于2%,表明该方法重现性好;临床样本的检测结果表明所建立的荧光定量PCR检测方法的检测率明显高于常规PCR方法。【结论】本研究初步建立了基于种特异性基因pvpA的鸡毒支原体荧光定量PCR方法,为养禽场诊断和监测鸡毒支原体病原提供一种新的特异、灵敏的方法。; 周云雷魏飞龙李健张小华蒋红霞; 关键词：种特异性鸡毒支原体实时荧光PCR SYBR

二氟沙星长效注射乳剂的研制及其在猪体内的药动学: 二氟沙星属于兽医专用药物,为了研究其长效制剂,利用分散法制备二氟沙星乳剂,探索其制备工艺和影响因素。经单因素和多因素实验,筛选出影响乳剂稳定性的主要因素和其大致数量范围;利用均匀设计实验方案筛选制剂处方。经筛选实验认为,...; 曾振灵李志业丁焕中黄显会; 文献传递

应对细菌耐药策略研究进展被引量：1: 2023年; 细菌耐药性与畜牧产业发展、人类公共卫生安全和食品安全密切相关。细菌产生耐药的机制复杂,除由人-动物-环境三者之间复杂作用引起外,抗生素的使用对细菌耐药性的产生和传播具有非常重要的影响,需要采取多种策略应对细菌耐药性的产生。新发展的药物理论及分子生物学等技术的兴起,极大地推动了对细菌耐药机制的认识、新型抗菌药物的发现及药物的合理使用,为控制细菌耐药性的产生提供了重要的理论依据和技术手段。当前,细菌耐药性已然是不可忽视的严重问题,引起了多方关注。细菌耐药机制的复杂性及新药研发的困难性,决定了必须通过多种方法、多种途径和多种角度开展研究,从而控制其进一步发展。基于目前的研究现状,笔者归纳总结了多种应对细菌耐药的策略及方法,重点从新型抗菌药的研发、联合用药、药代动力学-药效动力学同步模型及多组学技术等方面阐述其在应对细菌耐药性方面的作用,以期为减缓和控制细菌耐药性的产生及临床治疗细菌感染提供参考和指导。; 李亚菲张秀凤张灵璇魏彦哲万凯曾振灵; 关键词：细菌耐药性多重耐药防控策略

细菌分型的分子生物学技术研究进展被引量：19: 2007年; 回顾了传统细菌分型方法的重要作用,并重点介绍了近年发展得比较成熟的脉冲凝胶电泳(PF-GE)、低频限制性切割位点聚合酶链式反应(IRS-PCR)、随意扩增多态性DNA(RAPD)、扩增片段长度多态性(AFLP)、多位点酶电泳(MLEE)和多位点测序分型(MLST)等6种用于细菌分型的分子生物学技术的原理、特点以及应用情况,指出了其他细菌分型技术,如ARDRA、SSCP、DGGE、TGGEI、S等的不足,对基因芯片技术和实时PCR在细菌分型上的应用潜力进行了展望。; 马俊英刘健华陈杖榴曾振灵; 关键词：细菌分型流行病学分子生物学技术

硫酸黏菌素对土壤细菌耐药性的影响被引量：2: 2018年; 为了解硫酸黏菌素在环境中残留对土壤细菌的影响,本试验建立土壤生态模型,施加不同浓度硫酸黏菌素,并在作用于土壤的14 d、35 d、70 d分别采集土壤,采用琼脂稀释法进行细菌对硫酸黏菌素的敏感性试验,采用药敏纸片扩散法进行细菌对抗菌药物的敏感性试验。结果表明,随着硫酸黏菌素施加浓度的逐渐增大,耐药菌数量逐渐增多;19种抗菌药中,硫酸黏菌素敏感菌对其中10种抗菌药的敏感性极显著高于硫酸黏菌素耐药菌（P〈0.01）。; 范葶莉彭金菊孙永学牛金利苏恺马驿; 关键词：土壤细菌耐药性敏感性

乙酰甲喹主要代谢物在鸡粪的排泄量研究被引量：6: 2011年; 本研究旨在建立鸡粪便中乙酰甲喹代谢物M1、M2的高效液相色谱检测方法,测定乙酰甲喹主要代谢物在鸡粪的排泄量。对15只7周龄健康科宝-500白羽鸡内服乙酰甲喹30mg.kg-1体质量后,于不同时间间隔收集其所有粪便,称重,取其中2g用体积比1︰1的二氯甲烷/乙腈混合液提取,吹干,残渣用30%甲醇/水溶液复溶,HPLC法检测。结果表明,代谢物M1、M2检测限与定量限分别为0.01、0.05μg.mL-1,代谢物M1、M2添加浓度在0.05、1.0、50μg.mL-1时,平均回收率范围分别为69.5%～72.4%、73.5%～80.6%。粪便中代谢物M1、M2占给药乙酰甲喹总量的比例分别为3.20%、4.58%。代谢物M1排出高峰期在给药后4～8h,占代谢物M1累积排泄总量的38.09%;代谢物M2排出高峰期在12～24h,占代谢物M2累积排出总量的42.29%。结果提示,该检测方法满足测定乙酰甲喹主要代谢物在鸡粪中排泄量的要求。; 刘迎春丁焕中刘义明杨帆王立琦曾振灵; 关键词：鸡粪乙酰甲喹代谢物排泄

食品动物源产CTX-M-14大肠杆菌传播分子机制的演变被引量：5: 2012年; 从保存的2002-2009年分离的食品动物源大肠杆菌中,挑选16株blaCTX-M-14阳性菌,用PCR方法检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)编码基因、PMQR耐药基因及其他重要抗生素耐药基因(rmtB和floR);通过脉冲场凝胶电泳(PFGE)及种族进化关系分析16株细菌的亲缘关系;通过接合转移试验、复制子分型和blaCTX-M-14上下游插入元件的检测,分析产CTX-M-14大肠杆菌的传播分子机制。PCR检测结果表明,16株食品动物源产CTX-M-14大肠杆菌大多属于系统发育组A组,其次为B1和D组,没有B2组;PFGE分型结果表明,同一时间内不同动物间存在产CTX-M-14共生型大肠杆菌克隆的扩散传播,但养殖场内CTX-M-14主要是随质粒或其他元件进行水平传播;质粒复制子分型结果表明,携带blaCTX-M-14的质粒属于IncK(3/14)、IncF(5/14)、IncHI2(1/14)、IncFIB和IncF(1/14)、IncHI1和IncN(2/14)、IncI1(2/14)等,且随着时间推移,复制子的种类呈增多趋势。2002-2007年的菌株blaCTX-M基因的上下游均检测到ISEcp1和IS903;但2009年菌株除了部分在上下游都可以检测到ISEcp1和IS903外,还有的只检测到上游的ISEcp1或下游的IS903;2002-2009年的菌均未检测到ISCR1。16株产CTX-M-14大肠杆菌除了携带其他ESBLs编码基因,如blaCTX-M79和blaTEM-135外,还携带其他重要抗生素耐药基因,如oqxA、floR、aac(6′)-1b-cr及rmtB,而且2002-2009年大肠杆菌携带耐药基因的种类和数量逐年增多;接合转移试验发现,2002-2005年的菌株,blaCTX-M-14往往发生单独转移,而2009年分离菌blaCTX-M-14往往和floR或rmtB位于同一质粒上发生共同转移。这说明养殖场使用氨基糖苷类或氟苯尼考等任何一种抗生素,都可以筛选出产CTX-M-14大肠杆菌并促进其扩散,所以动物养殖过程中要慎用这些抗生素。; 甄盼盼汤电任艳娜郭玉芳王丽华裘宗平蒋红霞; 关键词：CTX-M-14

大环内酯类药物在猪病防治中的应用: 大环内酯类药物在兽医临床上主要被广泛应用于预防和治疗动物的呼吸系统及消化系统等细菌性和支原体性疾病。此外,大环内酯类药物中的阿维菌素类药物虽无抗菌活性,却被视为最优良的抗内外寄生虫药。本文就常用的几种大环内酯类药物在猪病...; 亢继俊曾振灵; 关键词：大环内酯类药物猪病; 文献传递

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