华南农业大学生命科学学院广东省教育厅植物功能基因组与生物技术重点实验室
- 作品数：15 被引量：141H指数：7
- 相关作者：胡旭霞曹友培更多>>
- 相关机构：西南大学园艺园林学院西南大学园艺园林学院重庆市花卉工程技术研究中心西南大学园艺园林学院花卉研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 海芋凝集素AML的原核表达及其多克隆抗体制备
- 2010年
- 为了制备海芋凝集素(Alocasia macrorrhiza lectin,简写AML)的多克隆抗体,分别构建了AML全长及部分片段的原核表达载体,并利用获得的原核表达的AML片段免疫新西兰雄兔获得抗血清。结果表明,含AML全长的原核表达载体pET30a(+)-AMLcDNA的原核表达宿主菌株Rosetta(DE3),在加入不同浓度的诱导剂IPTG后,菌液浓度出现短暂增加后逐渐下降,且下降幅度与加入的IPTG浓度呈正相关,同时用SDS-PAGE电泳法未检测到预期融合蛋白的形成;而含AML片段的原核表达载体pET30a(+)-AMLcDNA(270-613)的原核表达宿主菌株Rosetta(DE3),在IPTG诱导下能正常生长,且能诱导出预期大小的融合蛋白。利用制备型SDS-PAGE法纯化此融合蛋白作为抗原免疫新西兰雄兔获得抗血清,用该抗血清作为一抗进行Western blot,在海芋块茎、叶、叶柄和诱导菌体中均能检测到相应分子量的AML条带,表明制备的AML多克隆抗体可以用于检测AML。
- 侯学文黄剑威何国卿
- 关键词：原核表达多克隆抗体
- CRISPR/Cas9基因组编辑技术在植物基因功能研究及植物改良中的应用被引量：22
- 2015年
- CRISPR/Cas是发现于细菌和古细菌基因组中的特殊结构,参与细菌和古细菌破坏噬菌体和外源质粒的免疫保护。科学家将II型CRISPR/Cas改造成为一个组装简便、高效和精准的基因组编辑工具,并迅速在动物、植物和微生物基因功能研究和遗传改造中获得广泛应用。本文介绍CRISPR/Cas9技术出现近两年来,在水稻、小麦、高粱、拟南芥、烟草、甜橙等植物中的研究情况,在此基础上对该技术的优点和需要进一步改进的地方提出了看法。
- 曾秀英侯学文
- 关键词：植物改良
- 烟草抗非生物逆境分子育种研究进展被引量：2
- 2010年
- 双子叶模式植物烟草是重要的经济作物,烟草抗非生物逆境分子生物学的研究一方面可以验证异源抗逆境基因的功能,另一方面有可能获得抗非生物逆境能力提高的烟草新品种。综述了近年来国内外利用转基因技术,在验证抗非生物逆境基因功能、提高烟草抗寒、抗旱、抗盐和重金属等非生物逆境方面的研究进展,以期为其它作物的抗逆研究提供参考。
- 黄强王津津侯学文
- 关键词：烟草抗逆基因非生物逆境转基因
- 彩叶草Rubisco活化酶基因SsRCA的分子特征及其表达模式被引量：5
- 2011年
- 为研究观赏植物彩叶草的光合特性,根据Rubisco活化酶(RCA)的保守区域简并扩增获得的保守片段,采用RACE方法,克隆了RCA全长cDNA,命名为SsRCA(GenBank登录号FJ787730)。SsRCAcDNA全长1 548bp,包含1个1 311bp的ORF框,编码436个氨基酸的前体蛋白。其5-′UTR区含有1个终止子TAA,3-′UTR区具有2个mRNA非稳定性相关的DST-like元件和推测的加尾信号AATAAA。SsRCA蛋白具有定位于叶绿体的N端转运肽,具有2个保守的ATP-binding结构域、1个sensor 2基序和多个磷酸化位点。多序列比对和系统进化分析表明,SsRCA与其他植物的RCA蛋白具有较高的一致性,属于RCA的β亚基。表达分析表明,SsRCA基因在含有绿色组织的茎、叶和萼片表达。在9 h黑暗和15 h光照的光周期处理中,正午时表达量最高,午夜时表达量最低,具有明显的光诱导表达特性。
- 祝钦泷谢先荣眭顺照李名扬
- 关键词：彩叶草RUBISCO活化酶分子特征
- 彩叶草中一个富亮氨酸重复相关蛋白基因SsLRP的克隆和分析被引量：3
- 2009年
- 根据彩叶草叶片小型EST库中一条具有1个富亮氨酸重复(leucine-rich repeat,LRR)结构域的EST序列,采用RACE与文库结合的方法,克隆了1个具有5个LRR结构域的全长cDNA,SsLRP(LRR-Related Protein)(GenBank登录号FJ787729)。SsLRP cDNA全长1024bp,包含一个657bp的ORF框,编码218个氨基酸。其5’-UTR区含有2个终止子TAG,3’-UTR区具有推测的加尾信号AATAAA。SsLRP蛋白N端具有的信号肽和保守的亮氨酸拉链结构域,具有5个保守的LRR结构域,多个磷酸化位点和N-糖基化位点。多序列比对和系统进化分析表明,SsLRP与番茄SlLRP同源性最高。二级结构和三级结构预测表明,SsLRP的功能可能与保守的LRR结构域密切相关,推测该基因可能参与蛋白间的相互作用与信号识别。RT-PCR分析表明,SsLRP与番茄SlLRP具有相似的表达模式,在正常植株的根、茎、叶和花中都有表达,在受菌核病感染植株的茎和叶中表达上调。
- 祝钦泷李名扬
- 关键词：彩叶草
- 植物细胞质雄性不育及其育性恢复的分子基础被引量：19
- 2007年
- 植物细胞质雄性不育是广泛存在于高等植物中的现象,其表现为母性遗传、花粉败育,但雌蕊正常。细胞质雄性不育在杂交种子生产中起着重要作用,研究其分子作用机制有利于更有效地利用细胞质雄性不育。随着一些不育基因和恢复基因相继被克隆,人们对一些细胞质雄性不育和恢复系统的分子作用机理已经有一定了解。本文综述了近年来对植物细胞质雄性不育基因和恢复基因作用机理研究的进展。
- 吴豪徐虹刘振兰刘耀光
- 关键词：细胞质雄性不育线粒体基因恢复基因
- 水稻丝氨酸蛋白酶S8基因家族的分布及分析
- 2010年
- 水稻丝氨酸蛋白酶S8基因家族在水稻的生长发育过程中起着重要的调控作用。本研究利用公共数据库资源,分析水稻中丝氨酸蛋白酶S8基因家族,在水稻12条染色体上找到46个该类基因。通过其结构分析发现,每个基因的内含子数目从0到10各不相同,但氨基酸序列是非常保守的,都有催化活性位点和底物结合位点。系统进化树分析显示,这46个基因分为3个亚家族,S8-1亚家族最大。该家族基因的进化主要是通过基因重复复制的方式进行,其表达模式发生了变化,并且多个基因在穗部具有表达。
- 姜大刚
- 关键词：水稻基因组
- 植物RNA干涉载体的构建及其在水稻基因表达沉默中的应用被引量：18
- 2006年
- 为了方便利用RNA干涉(RNAinterference,RNAi)研究植物基因的功能,本研究构建了2个用于RNAi的植物转化载体pRNAi-35S和pRNAi-Ubi。这两个载体以pCAMBIA双元载体为骨架,含有2个多克隆位点区进行目的基因片段的正向和反向克隆,并分别由CAMV35S启动子和玉米泛素基因启动子控制发夹结构RNA的产生。为了验证该载体的有效性,用PCR扩增了1个水稻转录因子(ArabidopsisAP2/EREBP同源基因)基因片段组装入pRNAi-Ubi,转化水稻获得转化体。在所检测的7株转化株中,5株的内源目标基因的mRNA被降低至RNAblot检测不到的水平。这些结果说明本研究构建的RNAi载体对基因表达沉默是有效的。
- 胡旭霞刘耀光
- 关键词：基因功能RNA干涉转录因子水稻
- 查尔酮异构酶基因的分子特征及其在基因工程中的应用被引量：15
- 2008年
- 介绍了查尔酮异构酶(CHI)的结构与作用机制、CHl基因的结构特征、系统进化、时空表达特性以及在基因工程中的应用研究进展。
- 吴冰祝钦泷郭余龙眭顺照皮伟李名扬
- 关键词：查尔酮异构酶分子特征基因工程
- 基因工程技术提高烟草抗病虫性的研究进展被引量：3
- 2010年
- 烟草既是重要的经济作物,同时又是双子叶模式植物,因此以烟草为对象展开研究一方面可以阐明异源基因的功能,另一方面有可能获得对病虫害抗性提高的有实用价值的转基因烟草株系。本文综述了近年来国内外利用转基因技术,在验证抗病虫害基因功能、提高烟草抗病虫害生物逆境方面的研究进展,以期为其他作物的抗病虫害研究提供借鉴。
- 王津津侯学文
- 关键词：烟草转基因
