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海芋凝集素AML的原核表达及其多克隆抗体制备: 2010年; 为了制备海芋凝集素(Alocasia macrorrhiza lectin,简写AML)的多克隆抗体,分别构建了AML全长及部分片段的原核表达载体,并利用获得的原核表达的AML片段免疫新西兰雄兔获得抗血清。结果表明,含AML全长的原核表达载体pET30a(+)-AMLcDNA的原核表达宿主菌株Rosetta(DE3),在加入不同浓度的诱导剂IPTG后,菌液浓度出现短暂增加后逐渐下降,且下降幅度与加入的IPTG浓度呈正相关,同时用SDS-PAGE电泳法未检测到预期融合蛋白的形成;而含AML片段的原核表达载体pET30a(+)-AMLcDNA(270-613)的原核表达宿主菌株Rosetta(DE3),在IPTG诱导下能正常生长,且能诱导出预期大小的融合蛋白。利用制备型SDS-PAGE法纯化此融合蛋白作为抗原免疫新西兰雄兔获得抗血清,用该抗血清作为一抗进行Western blot,在海芋块茎、叶、叶柄和诱导菌体中均能检测到相应分子量的AML条带,表明制备的AML多克隆抗体可以用于检测AML。; 侯学文黄剑威何国卿; 关键词：原核表达多克隆抗体

植物耐冷性分子机理的研究进展被引量：57: 2003年; 近年来对植物耐冷性分子机理的研究不断深入。主要体现在以下 4个方面 :植物的冷敏感性可以通过调节膜脂的不饱和脂肪酸水平得到调控 ,调节的途径是通过酰脂去饱和酶和甘油_3_磷酸酰基转移酶的作用 ;利用转基因技术在植物中超表达抗氧化酶基因 ,如编码SOD、APX、CAT和GR等的基因 ,可望提高耐冷性 ;植物低温逆境信号转导的研究表明 ,ABA不仅是重要的低温逆境信号 ,而且可调节冷害下基因的表达 ,Ca2 +是一个主要的第二信使 ,蛋白激酶途径也参与了植物冷害的信号转导 ;; 王国莉郭振飞; 关键词：耐冷性膜脂抗氧化酶信号转导基因表达

CRISPR/Cas9基因组编辑技术在植物基因功能研究及植物改良中的应用被引量：22: 2015年; CRISPR/Cas是发现于细菌和古细菌基因组中的特殊结构,参与细菌和古细菌破坏噬菌体和外源质粒的免疫保护。科学家将II型CRISPR/Cas改造成为一个组装简便、高效和精准的基因组编辑工具,并迅速在动物、植物和微生物基因功能研究和遗传改造中获得广泛应用。本文介绍CRISPR/Cas9技术出现近两年来,在水稻、小麦、高粱、拟南芥、烟草、甜橙等植物中的研究情况,在此基础上对该技术的优点和需要进一步改进的地方提出了看法。; 曾秀英侯学文; 关键词：植物改良

缺磷对不同磷效率基因型大豆光合日变化的影响被引量：31: 2005年; 用1/2Hoagland营养液培养磷高效大豆基因型BX10和磷低效基因型BD2,缺磷胁迫15d后测定其光合、光呼吸、暗呼吸的日变化,并进一步探讨了影响上述过程的原因。结果表明:缺磷使两基因型光合速率(Pn)显著下降,但BX10仍高于BD2(尤其在上午);缺磷对PSⅡ光化学效率(Fv/Fm)和胞间CO2浓度(Ci)的影响无规律可循,与Pn的相关性也不显著;缺磷显著降低大豆气孔导度(Gs),并与Pn呈极显著正相关(r=0.753,P<0.001)。暗呼吸(Rd)与Pn日变化趋势相近(r=0.706,P<0.01),但缺磷对其影响不大;缺磷下光呼吸(Pr)显著下降,而Pr/(Pn+Pr)在BX10中却相对提高。光呼吸相对加强可能有助于磷高效基因型回补叶绿体光合作用所需的无机磷(Pi)。; 于海秋彭新湘严小龙曹敏建; 关键词：缺磷大豆光合作用日变化

采用酵母双杂交技术研究OsRUS1与OsRUS2.1之间的相互作用被引量：1: 2012年; 为了研究OsRUS1(ROOTUV-B SENSITIVE1)与OsRUS2.1(ROOTUV-B SENSITIVE2.1)之间是否具有相互作用以及通过何种结构域相互作用,采用酵母双杂交技术开展了如下工作。根据对OsRUS1与OsRUS2.1的DUF647结构域分布的分析,分别采用分子克隆技术将OsRUS1的4个不同片段[OsRUS1(1～1782)、OsRUS1(1～504)、OsRUS1(510～1282)和Os-RUS1(1188～1782)]克隆到诱饵载体pGBKT7上,并将OsRUS2.1的4个不同片段[OsRUS2.1(1～1317)、OsRUS2.1(1～138)、OsRUS2.1(139～879)和OsRUS2.1(880～1317)]克隆到猎物载体pGADT7上,酶切和测序结果表明诱饵和猎物载体构建成功,读码框正确。将所构建的4个OsRUS1诱饵载体和4个OsRUS2.1猎物载体质粒依次转化酵母AH109,研究转化AH109菌落在营养缺陷型培养液SD-Trp-DO或SD-Leu-DO上的生长情况,以及对报告基因ADE、HIS、MEL1和LacZ的激活情况,表明它们均没有对酵母菌株AH109产生毒性和自激活活性。再将4个OsRUS1诱饵载体和4个OsRUS2.1猎物载体的16种组合分别共转化酵母AH109,共转化菌株能在二缺营养缺陷板SD-Trp-Leu-DO上生长良好,但不能在四缺营养缺陷板SD-Trp-Leu-Ade-His-DO上生长,也不能激活MEL1和LacZ报告基因。这些结果表明OsRUS1与OsRUS2.1之间没有直接的相互作用。; 潘家强侯学文; 关键词：酵母双杂交相互作用自激活

基因工程技术提高烟草抗病虫性的研究进展被引量：3: 2010年; 烟草既是重要的经济作物,同时又是双子叶模式植物,因此以烟草为对象展开研究一方面可以阐明异源基因的功能,另一方面有可能获得对病虫害抗性提高的有实用价值的转基因烟草株系。本文综述了近年来国内外利用转基因技术,在验证抗病虫害基因功能、提高烟草抗病虫害生物逆境方面的研究进展,以期为其他作物的抗病虫害研究提供借鉴。; 王津津侯学文; 关键词：烟草转基因

基于mRNA水平的差异表达基因筛选技术被引量：4: 2009年; 随着分子生物学技术的深入发展,基因组研究重点已经由基因组测序转向基因功能鉴定,即由结构基因组学向功能基因组学转变。研究获得不同处理下基因的差异表达谱是功能基因组学的重要一环,目前已经有多种检测基因差异表达的技术可供选用。在减法杂交技术和PCR基础上发展起来的DDRT-PCR、cDNA-RDA、cDNA-AFLP和SSH技术因其实用性而得到广泛的应用,并取得了令人满意的结果。; 王建晖侯学文; 关键词：SSH

缺磷对大豆叶片显微结构及光合作用的影响被引量：17: 2006年; 采用1/2浓度Hoagland营养液培养磷高效基因型大豆BX10和磷低效基因型大豆BD2,缺磷胁迫15 d后研究其叶片显微结构和光合作用变化的基因型差异及其关系。结果表明:缺磷胁迫下大豆叶片的显微结构发生了适应性变化,叶片厚度、栅栏组织厚度和海绵组织厚度与光合速率及磷效率相关性不大;BX10与BD2相比,磷效率高归功于其较大的光合面积、较多的栅栏组织细胞(光合作用的主要细胞)及其较大总液泡面积,即在缺磷胁迫下BX10在磷利用方面表现出了较高的细胞分裂和增生速度而不是细胞增大和伸长的速度。缺磷胁迫下叶片气孔保持一定的开度对维持光合作用的正常进行较为重要。; 于海秋彭新湘严小龙曹敏建; 关键词：缺磷胁迫大豆磷效率显微结构光合作用

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华南农业大学生命科学学院植物逆境生物学科研教学团队