江苏大学基础医学与医学技术学院医学生物化学系
- 作品数：11 被引量：15H指数：2
- 相关作者：吴佳陈敏洁更多>>
- 相关机构：南京农业大学动物医学院农业部动物生理生化重点开放实验室南京农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目江苏省教育厅自然科学基金更多>>
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- 沙门菌鞭毛基因表达的相变换研究进展被引量：1
- 2010年
- 沙门菌是目前研究较多的细菌之一,广泛分布于脊椎动物的肠道和很多种类的节肢动物中。大多数沙门菌为Ⅱ相菌株,具有鞭毛相变换的特征,这与其毒力和逃避宿主免疫监视有关。综述了沙门菌鞭毛相变换的研究进展,为进一步研究沙门菌的致病机制提供了理论依据。
- 张海方
- 关键词：沙门菌鞭毛
- 抗H:z66抗体诱导z66^+伤寒沙门菌鞭毛相变换特点的探讨被引量：1
- 2010年
- 目的探讨抗H∶z66抗体诱导z66+伤寒沙门菌鞭毛相变换的特点。方法利用含抗H∶z66抗体的半固体培养基诱导z66+伤寒沙门菌鞭毛发生相变换,通过提取z66+伤寒沙门菌和其相变株的线性质粒,利用脉冲场凝胶电泳和核酸内切酶分析比较z66+伤寒沙门菌鞭毛相变换前后线性质粒的结构,最后通过测定相变株的线性质粒全序列和Southern blot进一步揭示抗H∶z66抗体诱导z66+伤寒沙门菌鞭毛相变换的特点。结果 z66+伤寒沙门菌在抗H∶z66抗体的诱导下成功发生了鞭毛的单向相变换;这种单向相变换是由于伤寒沙门菌在抗体诱导下线性质粒缺失了含fljBA的2.6 kb末端区域所致,同时首次发现在鞭毛相变换后线性质粒结构反而变大,提示线性质粒可能形成了非共价结合的二聚体。结论该研究揭示了z66+伤寒沙门菌鞭毛的相变换特点,为更深入地研究z66+伤寒沙门菌奠定了基础。
- 张海方黄新祥张晓磊倪斌生秀梅徐顺高许化溪
- 关键词：伤寒沙门菌鞭毛线性质粒
- 伤寒沙门菌线性质粒pBSSB1的p17基因的生物学功能分析
- 2014年
- H:z66阳性伤寒沙门菌含有一特有的介导鞭毛单向相变换的线性质粒pBSSB1,其上第17号基因(p17)编码一未知功能蛋白(P17)。利用λ-Red系统制备p17基因缺陷变异株,测定变异株和野生株的生长曲线,比较其生长差异,同时通过半固体LB培养基进行动力试验比较其动力差异。利用PCR技术扩增获得p17基因,构建其重组表达载体pET28a(+)-p17,通过镍柱纯化目的蛋白P17-His6,纯化后蛋白作为抗原免疫兔子以制备多克隆抗体。结果显示,制备了p17基因缺陷变异株,变异株的生长明显迟缓于野生株(P<0.05),变异株的动力明显减弱。构建了重组表达载体pET28a(+)-p17,纯化获得了高纯度的目的蛋白P17-His6并制得相应的多克隆抗体。
- 朱云霞吴佳龚明玉侯书宁张绮思陈敏洁张海方
- 关键词：伤寒沙门菌线性质粒
- EB病毒BARF1基因表达对胃癌细胞株SGC7910生物学行为的影响被引量：7
- 2009年
- 目的:了解EB病毒BARF1基因表达对胃癌细胞生物学行为的影响。方法:构建pSG5/BARF1真核表达载体,转染到EB病毒阴性的胃癌细胞系SGC7901,经RT-PCR鉴定,获得BARF1稳定表达的细胞克隆。以pSG5空载体转染细胞为对照,进行细胞凋亡诱导实验、细胞增殖实验、软琼脂集落形成实验和细胞迁移实验。结果:与对照组相比,BARF1表达细胞组经抗癌药顺铂诱导后的细胞凋亡率显著降低(P<0.01),增殖速度显著加快(P<0.01),软琼脂集落形成率显著提高(P<0.05),细胞迁移能力显著增强(P<0.05)。结论:BARF1基因能够全面增强胃癌细胞的肿瘤原性,可能在EB病毒相关胃癌发生与演化的整个过程中起重要作用。
- 李友琼张雪怡曾健陈巧林李良菊成静訾瑞峰周天戟
- 关键词：EB病毒胃癌细胞细胞生物学行为
- 丙烯腈对体外培养鼠胚中脑神经细胞增殖分化的影响被引量：1
- 2005年
- 目的研究丙烯腈(ACN)对大鼠胚胎中脑神经细胞增殖分化的影响。方法16d的大鼠胚胎中脑组织经取材、分离、消化后作原代细胞培养,加入不同浓度(0.01,0.1,1.0,10.0,50.0,100.0,200.0μg/ml)的ACN,从细胞形态学及细胞计数角度观察细胞生长与分化过程,同时测定蛋白质含量、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性并与对照组进行比较。结果不同浓度的ACN明显抑制胚胎中脑神经细胞的增殖和分化,集落形成率明显减少,细胞体积小;其半数分化抑制剂量(ICD50)为29μg/ml,半数存活抑制剂量(ICV50)为42μg/ml,均显示剂量效应关系。结论ACN能抑制胚胎中脑神经细胞增殖和分化,可能与其能抑制蛋白质合成,并引起脂质过氧化有关。
- 端礼荣吴全义王卉芳
- 关键词：丙烯腈增殖分化脂质过氧化
- 细菌Ⅵ型分泌系统研究进展被引量：1
- 2010年
- Ⅵ型分泌系统(T6SS)是最新发现的细菌分泌系统之一,该分泌系统与细菌的致病性密切相关。综述了细菌Ⅵ型分泌系统的组成成分、调控及假设模型等方面的研究进展。
- 张海方王敏
- 关键词：细菌组成成分
- mig-14对伤寒沙门菌在高渗应激早期基因表达的调节被引量：2
- 2009年
- 目的:探查伤寒沙门菌mig-14在高渗应激下对若干基因表达的调节作用。方法:用自杀质粒介导的同源重组方法制备伤寒沙门菌mig-14基因缺陷变异株,用基因芯片分析高渗应激早期野生株和mig-14缺陷株基因表达差异,并对部分结果采用实时荧光定量PCR进行验证。结果:成功制备伤寒沙门菌mig-14缺陷株,高渗应激早期mig-14变异株与野生株相比有77个基因表达下调和72个基因表达上调。结论:mig-14可能是一种调节基因,主要参与调节细菌的物质和能量代谢。
- 夏秋风邹昕杜鸿高宇琳黄新祥
- 关键词：伤寒沙门菌基因芯片分析
- 伤寒沙门菌线性质粒一编码基因的克隆表达及其生物学功能初探
- 朱云霞黄新祥张海方
- 伤寒沙门菌鞭毛素基因fljB:z66的克隆表达及其多克隆抗体的制备被引量：3
- 2009年
- 目的:克隆表达H:z66阳性伤寒沙门菌鞭毛素基因fljB:z66,并纯化制备相应的多克隆抗体。方法:利用PCR技术从H:z66阳性伤寒沙门菌基因组DNA中得到鞭毛素基因fljB:z66,将该基因克隆到表达载体pET-28 a(+)上并在大肠埃希菌JM109中进行表达;fljB:z66的表达产物经N i柱纯化后作为抗原免疫兔以制备多克隆抗体。结果:经PCR及序列分析证实,伤寒沙门菌鞭毛素基因fljB:z66被成功导入表达载体pET-28 a(+),并在大肠埃希菌JM109中获得了高效表达,以此作为抗原成功制备了兔抗z66的多克隆抗体。结论:成功克隆表达了H:z66阳性伤寒沙门菌鞭毛素基因fljB:z66,并制备了相应的多克隆抗体,为今后深入研究H:z66阳性伤寒沙门菌的单向相变换机制奠定了基础。
- 张海方高宇琳黄新祥生秀梅徐顺高许化溪
- 关键词：伤寒沙门菌多克隆抗体
- 一组特异存在于猪乳中的高分子量蛋白质
- 2007年
- 猪乳中含有多种蛋白质,介绍了猪乳中新发现的一组高分子量蛋白质的研究现状,对其生化性质和功能作了综述,并探讨对其进一步研究和开发的重要意义。
- 张海方邹思湘秦宜德宗亚锋陈伟华
- 关键词：猪乳高分子量蛋白质多态性
