中山大学生命科学学院基因工程教育部重点实验室
- 作品数：208 被引量：1,841H指数：25
- 相关作者：徐培林杨惠英欧阳学智肖洁凝范云更多>>
- 相关机构：中国科学院南海海洋研究所深圳大学师范学院化学生物系深圳大学师范学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 油菜转抗草甘膦、抗虫基因获得双抗植株被引量：31
- 2005年
- 以草甘膦为筛选剂,用农杆菌介导法将编码5烯醇式丙酮酸莽草酸3磷酸合成酶(EPSPS)的aroAM12基因和编码苏云金杆菌毒蛋白的Btslm基因导入到甘蓝型油菜优良品种湘油15号中。在用草甘膦对转化体进行筛选的基础上,对转基因再生植株进行了PCR检测、Southernblot和Westernblot分析,结果证明外源基因确已导入到该油菜品种中,而且表达了相应的蛋白。对转基因植株进行抗草甘膦、抗虫性鉴定的结果表明,转基因植株具有抗草甘膦、抗虫的双重特性。研究结果还表明抗草甘膦的aroAM12基因在植物基因转化中,既可以用作抗除草剂基因,又可以代替常用的抗生素标记,用作植物筛选标记基因。
- 王景雪赵福永徐培林田颖川
- 关键词：油菜
- 自然水样微型藻类遗传多样性的方法学研究
- 海洋微型藻类是一类重要的浮游生物,它们在海洋生态系统的物质循环和能量流动中起着十分重要的作用。然而,由于微型浮游生物个体微小,许多种类难以在实验室人工培养,致使人们对海洋微型浮游植物的生物多样性的认识还是十分不够。采用新...
- 袁洁邵鹏陈月琴
- 文献传递
- 烟草叶片表面抗性蛋白T-phylloplanin基因的克隆被引量：2
- 2008年
- 从烟草突变体T-cldf叶片表达基因的SSH文库中,筛选到一个与真菌抗性相关的表达序列标签P1T10(GenBank Access No.EB102896)。以P1T10序列为模板设计引物,用末端快速扩增(RACE)技术扩增得到T-Phylloplanin的cDNA全长(GenBank Access No.DQ451214)。利用DNASTAR软件的EditSeq程序(Version 5.01)分析T-Phylloplanin基因,显示它包含一个完整的开放读码框,编码一个含有110个氨基酸、等电点为7.74、分子量为11.3 kD的小分子量蛋白(GenBank Access No.ABE03627)。通过BLAST比对发现它与烟草叶片的一个表面抗性蛋白全长基因(GenBank Access No.AY705384)的同源性为93%。通过半定量RT-PCR分析表明,T-Phylloplanin在烟草突变体T-cldf叶片中的表达量高于烟草K346。
- 蔡刘体胡重怡郑少清陈兴江黄学林
- 关键词：烟草
- 嗜铬粒蛋白N端片段基因在枯草杆菌中的表达及表达产物的活性分析被引量：7
- 2004年
- 嗜铬粒蛋白 (CGA)是存在于分泌细胞的由 43 9个氨基酸组成的可溶性蛋白。近年的研究发现CGA的N端具有抗血管收缩、抗细菌和抗真菌的功能。为了寻找高效低毒的抗真菌片段 ,利用PCR技术扩增了编码人嗜铬粒蛋白N端 1 76位氨基酸 (CGA1 76)的DNA片段 ,并将之克隆进本实验构建的枯草杆菌诱导型表达载体pSBPTQ ,获得含CGA1 76基因的重组质粒pSVTQ ,转化蛋白酶三缺陷的枯草杆菌DB40 3。经蔗糖诱导后 ,CGA1 76片段在枯草杆菌DB40 3 (pSVTQ)中获得表达 ,产物分泌到细胞外 ,分泌量约为 5mg L ,占总分泌蛋白的 13 3 %。测试了表达产物对几种丝状真菌和酵母的抑制作用 ,发现在 4μmol L的浓度下 ,枯草杆菌表达的重组CGA1 76对镰刀菌。
- 李瑞芳罗进贤张添元
- 关键词：枯草杆菌基因表达酵母丝状真菌
- 使君子科(Combretaceae)风车子亚科(Combretoideae)分子系统学研究:来自叶绿体基因与核基因序列的证据
- 测定了使君子科(Combretaceae)风车子亚科(Combretoideae)植物8属14种及外类群2种的叶绿体rbcL基因、psaA-ycf3间隔区和nrDNAITS序列。采用最大简约法(most parsimon...
- 谈凤笑钟扬施苏华
- 关键词：使君子科
- 文献传递
- 巯基乙酸对过氧化氢酶的激活及其机制研究被引量：3
- 2001年
- 研究了巯基乙酸对黑曲霉过氧化氢酶的激活作用 ,并从动力学和谱学角度研究了其激活原因 .过氧化氢酶被巯基乙酸激活后 ,其km 值减小、kcat/km 增大 ,即巯基乙酸能够提高过氧化氢酶对底物的亲和力及底物专一性 .巯基乙酸同样能够引起过氧化氢酶的可见光谱的蓝移及酶分子的色氨酸残基的荧光强度减小 ,从而使过氧化氢酶活性中心铁卟啉周围环境发生变化 。
- 刘建忠刘杰翁丽萍计亮年
- 关键词：过氧化氢酶巯基乙酸酶活力动力学光谱学荧光强度
- 海洋超微型浮游植物遗传多样性的分子系统学研究进展被引量：9
- 2005年
- 近20年来,分子系统学技术在海洋超微型浮游植物遗传多样性领域的应用,使该领域的研究突破了传统研究方法的限制而得到迅速发展,同时对海洋生物学和生态学研究也产生了重要影响,充分显示海洋超微型浮游植物在海洋生态系统的能量流动和物质循环中起到重要作用。文中介绍了海洋超微型浮游植物的发现、特征和生态作用;重点阐述了应用分子系统学方法研究其遗传多样性的主要成果和相关方法学进展;最后展望了发展方向和应用前景.
- 陈敏艺袁洁陈月琴屈良鹄
- 关键词：聚球藻原绿球藻分子系统学分子系统学研究海洋生物学海洋生态系统
- 海洋沉积物中特有细菌类群的初步探讨被引量：29
- 2001年
- 通过构建 16SrRNA基因文库对中国南海南沙海区沉积物中细菌多样性进行分析 ,并将获得的16SrRNA基因序列与国际基因数据库GenBank进行相似性比较及聚类分析 ,结果发现来自海洋沉积物的未能培养的微生物往往组成一簇 ,并与现已获培养并鉴定的微生物自然分开 ,这一现象表明 。
- 戴欣周惠蔡创华周世宁屈良鹄
- 关键词：海洋沉积物RRNA基因细菌多样性聚类分析海洋微生物
- 响应面法优化蝙蝠蛾拟青霉发酵培养基配方被引量：10
- 2011年
- 为了提高虫草无性型蝙蝠蛾拟青霉(Paecilomyces hepiali)菌丝体中的腺苷含量,采用响应面法对其液体发酵培养基配方进行了优化。首先采用Plackett-Burman设计法对影响蝙蝠蛾拟青霉腺苷收率的8个相关因素进行了筛选,从中确定其主要影响因子为马铃薯和蚕蛹粉。然后用最陡爬坡试验逼近上述2个因素的最大响应区域,并通过中心组合设计和响应面分析法,确定了主要影响因子的最佳浓度。优化后的培养基组成为:马铃薯8.25%,蔗糖1%,玉米粉1%,蛋白胨0.5%,蚕蛹粉0.81%,KH2PO40.1%,MgSO4.7H2O 0.1%,(NH4)2 SO40.1%。该配方所产生的蝙蝠蛾拟青霉菌丝体中腺苷含量由优化前的2.15 mg/g(干重)提高到3.44 mg/g(干重)。
- 巩伯梁董冰雪李长杰张丽萍李刚
- 关键词：响应面法腺苷
- 水稻矮化突变体差异表达cDNA片段的克隆与分析被引量：6
- 2001年
- 利用抑制性消减杂交 (Suppressivesubtractionhybridization ,SSH)分离本实验室获得的一株水稻矮化突变体dwarf6 9与其野生型对照品系特光矮_2 (Oryzasativa ,TGA_2indica)间表达有差异的cDNA片段 .分别以dwarf6 9作为驱赶子 ,TGA_2为检测子 ,以及以dwarf6 9作为检测子 ,TGA_2为驱赶子建立了两个差异表达cDNA文库 ,分别代表在TGA_2和dwarf6 9中特异表达的cDNA .经反式Northern检测这两个文库共得到
- 王永胜王景李发强刘筱斌刘良式
- 关键词：抑制性消减杂交矮化突变体水稻CDNA片段克隆
