扬州大学兽医学院江苏省动物预防医学重点实验室
- 作品数：202 被引量：506H指数：11
- 相关作者：刘岳龙林伟东于恩琪张永志程晓薇更多>>
- 相关机构：安徽农业大学动物科技学院南通大学实验动物中心南京农业大学动物医学院农业部动物疫病诊断与免疫控制重点开放实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏高校优势学科建设工程项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学化学工程更多>>
- 免疫肉种鸡产蛋高峰期爆发鸡马立克病
- 鸡马立克氏病由马立克氏病病毒引起,通常于10-12周龄发病。本文报道了一例在24-30周龄已免疫马立克疫苗的种鸡群中爆发马立克氏病。鸡群于24周龄出现临床症状,30周龄肿瘤达到最高峰,发病率与死亡率分别为5%和80%。病...
- 庄新宇秦爱建
- 关键词：马立克病病毒病毒分离肉种鸡产蛋高峰期
- 文献传递
- J亚群禽白血病病毒超感染抗性鸡胚成纤维细胞系建立
- 将J亚群禽白血病病毒囊膜基因(ALV-Jenv)插入pcDNA3.1真核表达载体构建成转移载体pcDNA-env,并转染鸡胚成纤维细胞系DF-1,通过Zeocin药物筛选获得转染阳性细胞。细胞经传30代后,冻存。13个月...
- 叶建强秦爱建邵红霞刘红梅金文杰刘岳龙
- 关键词：J亚群禽白血病病毒ENV基因细胞系抗病毒感染
- 文献传递
- 禽白血病病毒衣壳蛋白表达载体的构建及应用被引量：1
- 2017年
- 为利用分段表达载体鉴定禽白血病病毒(ALV)衣壳蛋白单克隆抗体识别区域,构建ALV衣壳蛋白p27全长及分段真核表达载体。将实验室保存的pGEX-6p-1-p27质粒双酶切亚克隆到pcDNA3.1真核表达载体中,构建pcDNA3.1-p27全长表达质粒。同时设计引物,扩增p27基因1~480 bp的A片段以及241~720 bp的B片段,构建pcDNA3.1-p27A和pcDNA3.1-p27B分段表达载体,并在DF-1细胞中暂态表达,利用IFA和Western blot方法鉴定病毒衣壳蛋白单克隆抗体的识别区域。结果表明:重组质粒均能正确表达,并鉴定出两株单克隆抗体5D3和4F12的抗原识别区域均位于衣壳蛋白p27蛋白碳端161~240位氨基酸区域。研究成功构建并表达了ALV衣壳蛋白p27的全长和分段真核表达载体,并利用分段表达质粒鉴定了两株单克隆抗体的抗原识别区域,为深入研究衣壳蛋白p27的生物学功能提供了生物材料。
- 孙舒胡海胡海秦爱建程晓薇
- 关键词：真核表达载体
- 重组马立克病病毒CVI988／Rispens的构建被引量：3
- 2005年
- 根据I型马立克病病毒(MDV)强毒GA株基因序列,设计两对引物,用PCR方法扩增出CVI988／Rispens株的US10及其侧翼序列,分别克隆入pUC18载体中。经测序检测正确后,进一步插入含CMV启动子的绿色荧光蛋白 (EGFP)基因表达盒,获得了含EGFP报告基因的转移载体质粒pPUC18-US10-EGFP。通过同源重组,成功地筛选出表达EGFP的重组病毒rCVI988-EGFP,经传代证明重组rCVI988-EGFP在感染的CEF细胞中能稳定表达EGFP。结果表明:构建的重组转移载体质粒正确,US10是MDV复制非必需片段,为进一步利用US10区构建重组MDV多价基因工程疫苗奠定了基础。
- 刘红梅秦爱建叶建强陈鸿军金文杰刘岳龙
- 关键词：马立克病病毒绿色荧光蛋白重组病毒
- 野鸭源新城疫病毒的分离及其F基因的克隆与序列分析
- 用RT-PCR方法对从野鸭体内分离到3株新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)(JS-1/06/wd、JS-2/06/wd和JS-3/06/wd)的F基因序列进行了测定和分析.结果表明该分离...
- 王桂军秦爱建陈建霞崔平福邵红霞金文杰
- 关键词：野鸭新城疫病毒F基因
- 文献传递
- 鸡传染性贫血病毒VP2蛋白单克隆抗体的研制及其识别抗原表位的鉴定被引量：1
- 2022年
- 拟制备针对鸡传染性贫血病毒(CIAV)VP2蛋白的单克隆抗体(mAb),为CIAV的诊断和病毒生物学特性研究提供有用制剂。以PCR技术扩增CIAV VP2基因并克隆到原核表达载体pET-32a中,经IPTG诱导表达。以原核表达的融合蛋白免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术研制并筛选分泌抗CIAV VP2蛋白mAb的阳性杂交瘤细胞;采用截短表达CIAV VP2基因方法鉴定mAb识别的抗原表位。结果显示:成功获得了1株能稳定分泌抗CIAV VP2蛋白mAb的杂交瘤细胞株,并命名为CIAV-VP2-4A12;亚类鉴定结果表明,该mAb重链为IgG_(1)型,轻链为kappa链;Western blot结果显示,该mAb可以识别大肠杆菌,Sf9细胞和转染pCAGGS-VP2-Flag的DF1细胞中表达的VP2蛋白。使用原核表达截短蛋白进行表位鉴定,发现该mAb识别抗原表位序列是^(155)KTVRW^(159),序列比对发现该表位在CIAV中高度保守。本研究成功制备了针对CIAV VP2蛋白的特异性mAb,并精确鉴定了其识别表位,为VP2蛋白功能的研究以及CIAV的诊断方法研发提供了有效工具。
- 汪铭锐吴俊花王飞邵红霞邵红霞钱琨叶建强
- 关键词：鸡传染性贫血病毒VP2蛋白单克隆抗体抗原表位
- 江苏部分地区鸡胚源沙门氏菌的分离鉴定及耐药性分析被引量：2
- 2023年
- 为调查江苏部分地区未出壳鸡死胚中沙门氏菌感染情况,试验通过细菌分离培养鉴定、MLST分型对来自13家种鸡场的2433个未出壳的鸡死胚进行沙门氏菌分离鉴定,并通过药物敏感性试验确定分离株对不同药物的敏感程度和多重耐药性。结果显示:未出壳鸡死胚沙门氏菌感染率为3.00%,其中鸡白痢沙门氏菌占50.68%(37/73)、肠炎沙门氏菌占41.10%(30/73),同时分离到少量海德尔堡沙门氏菌、科特布斯沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌,分别占4.11%(3/73)、1.40%(1/73)和2.74%(2/73);鸡白痢沙门氏菌、肠炎沙门氏菌、海德尔堡沙门氏菌、科特布斯沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌分别对应ST92、ST11、ST15、ST582和ST19型;分离株对萘啶酸、链霉素等耐药率较高,分别达86.30%(63/73)和82.19%(60/73),对头孢他啶、厄他培南、氨曲南、阿米卡星表现为敏感,且存在多重耐药性,多重耐药菌株占71.23%(52/73)。结果表明:江苏省部分养鸡场存在一定程度的沙门氏菌感染,尤其是鸡白痢沙门氏菌和肠炎沙门氏菌,分离株耐药情况较为严重,需进一步规范抗菌药的使用。
- 沈海玉窦新红秦爱建
- 关键词：鸡胚多位点序列分型药物敏感性试验
- 新城疫病毒F蛋白在昆虫细胞中的表达及其融细胞作用
- 本研究用RT-PCR方法扩增出新城疫病毒标准强毒株F48E8的F基因,并将其克隆到pGEM-T载体,命名为pGEM-F.鉴定正确后,以BamHI和XbaI双酶切将F基因从pGEM-F中释放出来,并插入到pFast Bac...
- 王桂军秦爱建邵红霞崔平福金文杰
- 关键词：新城疫病毒F48E8融合蛋白重组杆状病毒昆虫细胞
- 文献传递
- 胶体金免疫层析检测牛结核γ干扰素方法的建立被引量：3
- 2010年
- 牛结核病是一种重要的人畜共患病,尽管许多国家已经实施了牛群净化,但其仍然威胁人类的公共卫生健康。本研究利用抗牛γ干扰素特异性单克隆抗体,通过免疫金标记技术,建立了胶体金免疫层析试纸条检测牛γ干扰素的方法。研究结果证明,该方法对牛γ干扰素具有高度特异性,与其它动物干扰素没有交叉反应,检测牛γ干扰素的灵敏度与进口ELISA试剂盒相当。试纸条在室温保存6个月、4℃保存12个月,其特异性及灵敏度没有明显变化。对田间送检的23份全血经结核特异性刺激后进行检测,结果与进口结核ELISA试剂盒符合率为91.3%。研究表明,本研究建立的牛γ干扰素免疫层析检测方法具有特异、敏感、稳定、操作简单快捷等特点,适合用于牛结核的快速特异检测。
- 钱琨尹天燕赵士学黄大卢金文杰秦爱建
- 关键词：牛结核病单克隆抗体胶体金免疫层析
- 家禽β连环蛋白基因绝对定量PCR方法的建立及应用
- 程晓薇张丹阳张杰邵红霞秦爱建钱琨
