温州医学院检验医学院浙江省医学遗传学重点实验室
- 作品数：109 被引量：322H指数：11
- 相关作者：肖美英王金丹田宇鑫张琳白永恒更多>>
- 相关机构：重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室重庆医科大学检验医学院中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金浙江省医药卫生科学研究基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>
- NK4基因的克隆及在Raji细胞中的表达
- NK4是目前已知的最佳HGF拮抗剂,可与HGF竞争性结合受体c=Met,但不能诱导c-Met的酪氨酸磷酸化,从而阻断HGF/Met系统的信号转导,抑制HGF的生物学效应。我们通过克隆NK4基因,构建其重组真核表达质粒并观...
- 滑世轩岑东吕建新裴仁治
- 关键词：NK4克隆
- 文献传递
- 浙江省五个遗传性非综合征型耳聋家系GJB2基因突变分析
- 遗传性耳聋分为非综合征型耳聋(Nonsyndromic Hearing Impairment,NSHI)和综合征型耳聋(Syndromic Hearing Impairment,SHI)。其遗传方式可表现为常染色体显性遗...
- 李永燕吕建新沈智森丁禹尤俊艳管敏鑫
- 关键词：CX26GJB2基因非综合征型耳聋常染色体隐性遗传
- 文献传递
- 线粒体tRNA^(Glu)A14693G可能是与Leber遗传性视神经病变相关的基因突变被引量：16
- 2010年
- 收集了3个具有典型临床特征的中国汉族Leber遗传性视神经病变(Leber′s hereditary optic neuropathy,LHON)家系。通过对先证者和家系其他成员进行眼科临床(如视力损害程度和发病年龄)检查,发现这些家系成员中视力损害的外显率很低,经mtDNA测序分析,在tRNAGlu上发现了A14693G同质性突变位点,多态性位点分别属于东亚单体型Y1b、Y1和Y1,没有发现其他高度保守和有功能意义的突变位点。A14693G突变位于线粒体tRNAGlu高度保守区(通用位点为54位),可能导致tRNA空间结构和稳定性发生改变,继而影响tRNA的代谢,导致线粒体蛋白合成功能受损和ATP障碍,最终导致视力损害。所以,tRNAGluA14693G突变可能是与视神经病变相关的致病性线粒体突变位点。
- 张永梅冀延春刘晓玲周翔天赵福新孙艳红韦企平张娟娟刘燕瞿佳管敏鑫
- 关键词：LEBER遗传性视神经病变线粒体DNA视力障碍突变
- 不同年龄段非综合征性耳聋常见基因检测及临床表型分析
- 为了探讨基因突变对非综合征性耳聋的影响及其发病特点,文章收集了2006年4月耀2011年4月就诊的176名非综合征性耳聋患者,按发病年龄分为成人组(跃18岁)及未成人组,后者又分为婴幼儿组(0-3岁)、学龄前组(3-6岁...
- 张初琴陈波蓓刘学军郑静陈迎迎高金建南奔宇章誉耀余啸管敏鑫
- 关键词：非综合征性耳聋GJB2线粒体DNA基因诊断
- 文献传递
- 双萤光素酶共表达载体构建及特性研究被引量：4
- 2010年
- 利用来源于TaV的自剪切多肽2A的编码序列构建一种分泌型萤光素酶Gluc和非分泌型萤光素酶Fluc共表达的载体,对其体内外表达及活体成像特点进行研究。采用重叠PCR技术获得Gluc-2A-Fluc片段,克隆入表达质粒pAAV2neoCAG中,获得重组质粒pAAV2neoCAG-Gluc-2A-Fluc。将重组质粒瞬时转染BHK-21细胞,24h后在细胞上清液和细胞裂解液中均能检测到Gluc和Fluc的表达,其中Gluc98%以上分布在上清液中,而Fluc98%以上存在于细胞中,随时间延长Gluc活性在上清液中逐步增加,而细胞内Fluc活性则保持相对平稳。用水动力法经小鼠尾静脉注射pAAV2neoCAG-Gluc-2A-Fluc质粒DNA,通过尾静脉微量采血(2.5μl/次)即可实时地监测体内Gluc的表达情况。活体成像结果显示,注射Gluc的底物腔肠素时小鼠明显表现为全身显像,显像在10min内迅速衰减;而注射Fluc的底物D-Luciferin时显像主要集中在肝脏,显像在30min内都比较稳定。本研究设计和构建的pAAV2neoCAG-Gluc-2A-Fluc质粒实现了分泌型和非分泌型萤光素酶的共表达,既可以在不裂解细胞或处死动物的情况下直接在细胞培养上清或血液中动态检测Gluc的活性,又可以利用活体成像技术准确定位Fluc表达部位,比单一的萤光素酶报告载体在细胞标记和体内示踪研究方面更具优越性。
- 付昕阳王刚田文洪陈素云董小岩吴小兵谭万龙
- 关键词：共表达
- aac(3)-Ⅱ／tem-105融合基因的构建、克隆及表达
- 目的了解aac(3)-Ⅱ／tem-105融合基因表达的融合蛋白酶与单个基因表达的蛋白酶在活性上的差异。方法应用PCR重叠延伸技术将aac(3)-Ⅱ基因和tem-105基因通过一疏水性多肽接头 (Gly4Ser)3前后拼接...
- 陈云波王震查长森吕建新
- 关键词：融合基因抗生素耐药性
- 文献传递
- 线粒体tRNA^(Thr) G15927A突变可能影响耳聋相关的12S rRNA A1555G突变的表型表达被引量：7
- 2008年
- 对1个中国汉族耳聋家系进行了临床和分子遗传学特征分析。家系中听力下降的母系成员表现为程度不等、听力图形态不同的听力损害,但同为双侧对称的感觉神经性耳聋。该家系耳聋外显率很高,包括药物致聋的耳聋外显率为75%,而非药物致聋的外显率为41.7%。对母系成员进行线粒体DNA(mtDNA)全序列扩增分析,发现了耳聋相关12SrRNAA1555G同质性突变位点和多态性位点,属于东亚人群B5b单体型。在这些变异位点中,mtDNA15927位点的G-A碱基变化破坏tRNAThr反密码子结构上十分保守的C-G碱基对,这可能加重由A1555G突变造成的线粒体功能缺陷。这表明tRNAThrG15927A突变可能增强携带12SrRNAA1555G的中国汉族耳聋家系的外显率和表现度。
- 唐霄雯李智渊吕建新朱翌李荣华王金丹管敏鑫
- 关键词：耳聋突变氨基糖甙类抗生素
- 线粒体DNA G7444A突变可能影响A1555G突变的表型表达
- 线粒体12S rRNA 和 tRNASer(UCN)基因是导致非综合征型听力损失的两个突变热点区域。本研究收集了1个母系遗传感音神经性聋家系,该家系同时携带线粒体 DNA(mtDNA)A1555G 和 G7444A 突变...
- 杨爱芬朱翌吕建新杨丽赵建越孙冬梅管敏鑫
- 关键词：氨基糖甙类抗生素基因突变
- 文献传递
- NK4拮抗HGF促进肿瘤细胞凋亡的生物学效应被引量：3
- 2013年
- 观察NK4通过拮抗肝细胞生长因子(HGF)诱导不同肿瘤细胞凋亡,研究其生物学作用及分子机制.以足叶乙甙(VP-16)诱导凋亡,分别或经HGF蛋白、NK4蛋白处理5种肿瘤细胞(B细胞淋巴瘤细胞系Raji、人急性粒细胞白血病细胞系HL-60、宫颈癌细胞系HeLa、前列腺癌细胞系PC-3、非小细胞肺癌细胞系A549),采用流式细胞术(FCM)、吖啶橙(AO)染色法、苏木素-伊红(HE)染色法定量观察5种肿瘤细胞的凋亡情况,并进行相关分析.FCM发现,经VP-16处理5种肿瘤细胞凋亡率均显著高于对照组(P<0.001),而HGF+VP-16组凋亡率明显下降(P<0.01),HGF+NK4+VP-16组细胞凋亡率均明显高于HGF+VP-16组(P<0.05).AO染色和HE染色结果也证实,5种肿瘤细胞经VP-16处理后凋亡率均显著增高(P<0.001,P<0.001),而HGF+VP-16组细胞凋亡率均明显低于VP-16组(P<0.001,P<0.01),HGF+NK4+VP-16组细胞凋亡率均明显高于HGF+VP-16组(P<0.001,P<0.05).此外,发现NK4+VP-16组、HGF+NK4+VP-16组、VP-16组等3组间凋亡率无统计学差异(P>0.05).以上结果提示,HGF蛋白可抵抗凋亡诱导剂VP16的作用,明显降低细胞凋亡;NK4通过竞争性抑制HGF从而促进肿瘤细胞的凋亡,具有潜在的肿瘤治疗价值.
- 郑筱娇高洲沈蓉蓉岑东裴仁治罗建平吕建新
- 关键词：肝细胞生长因子凋亡拮抗
- tRNA^Ser(UCN)7472delC可能是耳聋与癫痫相关的线粒体基因新突变被引量：3
- 2008年
- 线粒体DNA突变与许多人类疾病的发病机制相关。文章报道1例典型的患有耳聋与癫痫症状的具有母系遗传特征的中国家系。该家系共3代人,其中14名母系成员中有3名耳聋患者,3名癫痫患者,而其他成员则无临床症状。线粒体全基因组序列分析表明,tRNASer(UCN)基因7472delC新突变和33个多态位点属于东亚单体型B4b1a2。7472delC突变位于tRNASer(UCN)高度保守的T-arm上。而在该区域的相同位点7472insC突变已在多个无遗传相关的家系中被发现与耳聋和癫痫相关。7472insC突变使tRNA代谢和线粒体功能产生缺陷。这样与7472insC突变相近的7472delC突变可能也会以相似机制引起线粒体功能障碍。同时,在该家系中未发现GJB2基因及其他线粒体基因突变。因此,tRNASer(UCN)7472delC可能是耳聋与癫痫相关的线粒体基因新突变。
- 赵建越唐霄雯兰金山吕建新杨丽李智渊朱翌孙冬梅杨爱芬王金丹徐静管敏鑫
- 关键词：耳聋癫痫线粒体DNA
