上海交通大学医学院神经生物学实验室
- 作品数：40 被引量：86H指数：5
- 相关作者：盛祖杭窦芳芳傅聪朱慧琴赵真更多>>
- 相关机构：新乡医学院基础医学院形态学实验室新乡医学院基础医学院北京大学基础医学院更多>>
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- 细胞来源和培养液成分对大鼠神经前体细胞增殖和分化的影响被引量：4
- 2008年
- 在成功建立体外分离培养大鼠胚胎脑和脊髓神经前体细胞(neuron precursor cells,NPCs)的基础上,本研究设计了三种培养液组合:DF/N2、DF/B27和DF/(N2+B27),观察在不同培养液成分对胚胎脑和脊髓NPCs增殖和分化的影响。结果显示:与NF/N2組和DF/B27组相比,脑来源的NPCs在DF/(N2+B27)中增殖最快、最稳定(P<0.01),而脊髓来源的NPCs在三种培养液组合中的增殖速度无明显差异。脑和胚胎15 d脊髓来源的NPCs在DF/B27和DF/(N2+B27)中分化为神经元的比例明显高于DF/N2组合(P<0.01);取自胚胎15 d的脊髓NPCs分化为神经元和少突胶质细胞的比例均显著高于胚胎16 d的NPCs(P<0.05)。以上结果提示:(1)在培养液中同时添加N2和B27不仅可以提高体外培养的NPCs的增殖速度,同时可显著增加神经元分化的比例;(2)NPCs的分化潜能可因NPCs来源(脑或脊髓)和发育阶段的不同而有差异。
- 王艳霞李莹陆佩华富赛里
- 关键词：神经前体细胞增殖分化
- 中枢神经系统OMgp的研究进展被引量：2
- 2006年
- 窦芳芳陆佩华徐晓明
- 关键词：中枢神经系统脊髓损伤神经再生发育过程胶质细胞神经冲动
- Olig1过表达对大鼠神经干细胞向少突胶质细胞分化的影响被引量：6
- 2010年
- 目的:Olig1基因修饰的神经干细胞(NSCs)移植治疗中枢神经脱髓鞘疾病具有重要的应用前景。本研究目的是构建大鼠olig1真核表达载体,并观察其过表达对大鼠NSCs向少突胶质细胞分化的影响。方法:采用RT-PCR,以新生大鼠脊髓RNA为模板,扩增olig1基因,定向克隆到pEGFP-N3载体中;用电穿孔方法转染pEGFP-N3-olig1表达载体至NSCs中,然后用RT-PCR鉴定olig1的表达,免疫荧光染色鉴定NSCs向少突胶质细胞的分化情况。结果:成功构建了pEGFP-N3-olig1真核表达载体,olig1在重组质粒转染的NSCs中能够高效表达。重组质粒转染的NSCs在体外诱导分化后,能够较空质粒转染的NSCs产生更多的少突胶质细胞(P<0.01)。结论:Olig1过表达能够显著促进大鼠NSCs向少突胶质细胞方向分化。
- 吕合作邹健王艳霞陆佩华
- 关键词：克隆神经干细胞
- 小鼠抗人BART多克隆抗体的制备和鉴定被引量：2
- 2007年
- 目的制备小鼠抗人源性BART的抗体。方法采用原核系统表达人全长BART,经纯化后免疫小鼠制备抗BART的抗体,以Western blot、免疫组化染色法检测抗体的效价和特异性。结果获得高效价的小鼠抗BART的抗体,该抗体能够识别大鼠脊髓组织中的BART分子。海马神经元和星形胶质细胞的免疫组化染色结果显示,BART分子在海马神经元、星形胶质细胞中广泛表达;在海马神经元中,BART与钙离子通道存在共定位现象。结论制备出能特异性识别天然BART分子的抗体,为检测BART分子并进一步研究其功能奠定了基础。
- 虞志华陆佩华黄立东
- 硒对MNNG诱导大鼠胃癌形成过程中肾上腺皮质酶活性的影响被引量：3
- 2006年
- 目的观察硒在抗肿瘤发生过程中对大鼠肾上腺皮质3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)、琥珀酸脱氢酶(SDH)和脂类的影响。方法给断乳1周的雄性Wistar大鼠以N甲基-N′-硝基-N亚硝基胍(MNNG)20mg/kg灌胃,每天1次,连续10d,以诱导大鼠胃黏膜异倍体形成(大鼠胃癌模型)。在灌胃前和灌胃后以普通饲料、低硒和高硒饲料等分别喂养。第25周时,用流式细胞仪测定硒对大鼠胃幽门黏膜异倍体形成的影响;同时用组织化学方法观察硒(0.2mg/kg及2.0mg/kg)在预防大鼠胃黏膜异倍体形成过程中,大鼠肾上腺皮质细胞中脂类以及SDH和3β-HSD的组织化学变化。结果1.硒能抑制大鼠胃黏膜异倍体形成;2.实验对照组与正常对照组相比,大鼠肾上腺皮质细胞3β-HSD和SDH组织化学反应明显增强(P<0.01),而肾上腺皮质细胞的脂滴含量明显减少(P<0.01);3.加硒实验各组与实验对照组相比,大鼠肾上腺皮质3β-HSD和SDH组织化学反应均减弱,尤以给MNNG前喂饲高硒饲料组减弱更明显,具有显著性差异(P<0.05);而肾上腺皮质细胞的脂滴含量均增多;尤以给MNNG前喂饲高硒饲料组增多更明显,与实验对照组相比具有显著性差异(P<0.05)。结论硒能抑制大鼠胃黏膜异倍体形成;MNNG所致大鼠胃黏膜细胞异倍体的形成和发展过程中其肾上腺皮质细胞功能发生明显变化;硒在预防大鼠胃黏膜异倍体形成过程中对大鼠肾上腺皮质细胞的功能也有一定的影响。
- 李艳萍唐军民唐岩史福军
- 关键词：硒胃癌肾上腺皮质组织化学
- 髓鞘相关糖蛋白与神经系统的髓鞘发育和轴突生长被引量：4
- 2006年
- 髓鞘相关糖蛋白(myelin-associated glycoprotein,MAG)是免疫球蛋白超家族成员,它由中枢神经系统的少突胶质细胞和外周神经系统的施万细胞表达。MAG定位于直接和轴突相接触的髓鞘膜的最里层,它通过介导胶质细胞与轴突的相互作用参与髓鞘的形成及其完整性的维持。同时MAG也是髓鞘来源的神经生长抑制因子的主要成分。在神经系统发育的不同阶段,MAG显示不同的功能:即发育期促进轴突生长,成熟期抑制轴突生长。其抑制作用主要由髓鞘来源的抑制分子的共同受体NgR介导,在神经营养因子受体p75NTR以及小GTP酶Rho等信号分子的共同参与下完成。
- 顾文莉陆佩华
- 关键词：髓鞘轴突NOGO受体
- Annexin A2的结构和功能及其与疾病的关系被引量：13
- 2008年
- Annexins是一类钙依赖性膜磷脂结合蛋白。Annexin A2是Annexins家族中的一个重要成员,存在于细胞膜、胞质和胞外。Annexin A2蛋白在细胞膜构架的形成、膜聚合、内吞和胞吐中均扮演重要角色。Annexin A2还参与某些病理过程,与心血管疾病、血液病、肿瘤等多种疾病相关。文章简要综述了Annexin A2分子的结构、生化特征、生物学功能及其与疾病的关系。
- 陆秋涯黄立东陆佩华
- 关键词：ANNEXINP36钙结合蛋白
- 新生大鼠杏仁体基底外侧核的神经解剖及神经元的原代培养
- 2008年
- 用原代培养的神经元,研究神经元功能和突触传递,简单易行。杏仁体基底外侧核(BLA)在条件性恐惧记忆环路中起重要作用,然而BLA的直接取材比较困难,BLA神经元的培养方法未见报道。本文介绍BLA取材的详细步骤及BLA神经元的原代培养方法.BLA的分离、消化、神经元的种植需要1.5h,细胞状态能维持2周。这种BLA的分离及神经元原代培养的方法。简便易行,是研究BLA神经元功能和突触传递的潜在性手段。
- 刘欣秋钱爱华马南吕合作李莹陆佩华
- 关键词：神经解剖原代培养
- 经颈动脉途径移植神经干细胞治疗缺血性脑卒中被引量：2
- 2007年
- 目的观察经颈动脉途径移植神经干细胞(NSCs)治疗大鼠脑缺血再灌注模型的效果以及移植NSCs在大鼠脑内的状况。方法采用线栓法制作大鼠的大脑中动脉闭塞/再灌注(MCAO/R)模型;将大鼠随机分为MCAO/R+NSCs移植组、MCAO/R+培养液(DFNG)注射组和正常大鼠+NSCs移植组,MCAO/R+NSCs移植组和MCAO/R+DFNG注射组于建模后24 h经同侧颈内动脉分别注射NSCs和DFNG;对3组大鼠进行神经功能评估和病理组织学检查。结果整个观察过程中,正常大鼠+NSCs移植组大鼠未出现神经功能障碍,MCAO/R+NSCs移植组和MCAO/R +DFNG注射组大鼠手术建模后均出现明显的神经功能障碍,随后神经功能状况逐渐改善,在移植早期两组大鼠的神经功能评分差异无统计学意义(P>0.05),在移植后期(手术建模后10和14 d) MCAO/R+NSCs移植组大鼠的神经功能状况要优于MCAO/R+DFNG注射组(P<0.05,P<0.05);苏木素-伊红(HE)染色显示,MCAO/R+NSCs移植组和MCAO/R+DFNG注射组可见在右侧大脑中动脉供应的额顶叶和尾壳核区域缺血性损伤改变,而正常大鼠+NSCs移植组的脑组织结构正常;免疫荧光染色发现,MCAO/R+NSCs移植组可见有移植的NSCs存活、分布于缺血损伤的额顶叶和尾壳核区域,并有部分移植的NSCs开始朝着神经元方向分化,个别移植的NSCs则开始朝着星形胶质细胞方向分化;而正常大鼠+NSCs移植组和MCAO/R+DFNG注射组的大鼠中均未发现有这些现象。结论经颈动脉途径移植NSCs治疗缺血性脑卒中,可见有移植的NSCs存活、分布于缺血损伤区域,并朝神经元和星形胶质细胞方向分化来进行神经修复,从而改善神经功能障碍。
- 戴炯李善泉文立马政文富赛里智玲梅
- 关键词：卒中神经干细胞
- Annexin A2单克隆抗体制备及初步鉴定
- 2008年
- 制备Annexin A2特异性单克隆抗体(McAb),为Annexin A2的体内外功能的研究提供有力的抗体工具。以原核表达的全长p36蛋白(Annexin A2单体)免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术制备针对Annexin A2的McAb。以间接ELISA法筛选出目的杂交瘤细胞株并进行染色体计数;分析McAb的亚型,检测其效价、浓度及亲和常数;以细胞荧光染色,Western blot和RT-PCR鉴定McAb特异性。结果得到1株能稳定分泌特异性针对p36的McAb的细胞株F8,其抗体亚类重链为IgG2a,轻链为κ型;腹水纯化后效价为1∶4 000;亲和常数为3.4×109L/mol。成功获得了能稳定分泌AnnexinA2特异性McAb的细胞株。
- 陆秋涯陆佩华黄立东
- 关键词：ANNEXINA2P36基因克隆和表达单克隆抗体
