南开大学生命科学学院分子微生物学与技术教育部重点实验室 作品数:115 被引量:276 H指数:9 相关作者: 周大炜 王霞 王颖 轩辕铮铮 王燕森 更多>> 相关机构: 天津农学院农学系 北京大学工学院 天津科技大学生物工程学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 天津市自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 环境科学与工程 化学工程 医药卫生 更多>>
表征生物降解聚合物生物降解性能的环境降解参数 环境降解参数(EdK)在描述环境可降解高分子聚合物(BDPs)的生物降解性能方面发挥着重要的作用.在本文中,作者提出了EdK的概念和基于ISO14852方法通过检测二氧化碳的释放量作为分析参数的检测方法,将EdK的作为评... Wenbin Guo 郭文斌 陶剑 Jian Tao Chao Yang 杨超 Cunjiang Song 宋存江 Weitao Geng 耿伟涛 Qiang Li 李强 Yuanyuan Wang 王媛媛 孔梅梅 Meimei Kong Shufang Wang 王淑芳关键词:高分子聚合物 生物降解性能 评价指标 糖基转移酶反应的基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法监测 被引量:2 2011年 以wabD(大肠杆菌O77中O抗原基因簇内)编码的α-1,3-甘露糖转移酶、wfgD(大肠杆菌O152中O抗原基因簇内)编码的β-1,3-葡萄糖转移酶和wfeD(志贺氏菌鲍氏O14中O抗原基因簇内)编码的β-1,4-半乳糖基转移酶酶促反应产物为研究对象,尝试应用碰撞诱导解离(CID)负离子模式基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术建立简单、高效的糖基转移酶监测方法。该方法首先直接用质谱分析0.3μL未经色谱分离、除盐处理的反应混合物,随后应用CID串联质谱技术对酶活反应产物进行结构表征,实现酶活反应的快速检测。研究结果表明,CID MALDI-TOF MS平台适用于新建克隆的糖基转移酶酶活反应的监测,与现有的高通量方法相比,在速度、灵敏度、重现性、自动化和溶剂消耗方面具有绝对优势。 周大炜 刘斌 吴俊丽 胡波 齐源远关键词:脂寡糖 糖基转移酶 枯草芽孢杆菌YwbN的双精氨酸信号肽可以介导双精氨酸转运依赖甲基对硫磷水解酶的分泌 在细菌和古细菌中,双精氨酸转运途径能将折叠的蛋白从细胞内通过质膜运输到胞外.两个平行的精氨酸转运途径(TatAdCd 和TatAyCy 系统),它们有着不同的底物特异性.在本研究中,为了将甲基对硫磷水解酶(MPH)分泌到... 左振强 杨超 宋存江关键词:甲基对硫磷水解酶 利用门多萨假单胞菌NK-01发酵合成PHA和褐藻寡糖及其结构鉴定 从土壤中分离到一株能够合成中长链聚羟基脂肪酸酯(PHAMCL)的细菌,经鉴定命名为Pseudomonas mendocina NK-01。对在氮源限制情况下,利用葡萄糖合成的PHA进行了结构分析。深入研究发现,菌体内积累... 郭文斌 王淑芳 王嫒嫒 宋存江关键词:发酵 文献传递 用酶联免疫吸附法检测蛋白质的聚合 2015年 许多蛋白质二聚化或多聚化在调节其功能方面发挥重要作用,研究蛋白质的聚合有助于阐明相关的生物学过程.本文使用酶联免疫吸附法,对分子量11 k D的马传染性贫血病毒核壳蛋白(nucleocapsid protein 11 k D,NCp11)的聚合进行检测.首先利用亲和层析分别纯化了NCp11以及N-端或C-端融合有FLAG标签的NCp11.然后将NCp11包被于聚苯乙烯96孔板底,加入带FLAG标签的NCp11与之聚合,再依次加入抗FLAG抗体、辣根过氧化物酶标记的二抗及底物,反应终止后于450 nm波长下读取吸收值.结果表明,酶联免疫吸附法适用于NCp11聚合的检测,可对聚合的特异性、剂量依赖效应和影响因素等进行定量评价.利用该方法不仅能检测蛋白质的聚合,而且具有灵敏度高、特异性好、通量高、成本低和快速简便等优点,有望获得广泛应用. 钱云云 郭玉莹 安婧 王颖关键词:酶联免疫吸附法 核壳蛋白 马传染性贫血病毒 剩余活性污泥完全资源化利用微生物技术的研究 微生物集成技术研究剩余活性污泥的完全资源化利用,主要包括:
使用土著PHA合成菌回注法驯化并发酵活性污泥生产生物降解性高分子材料PHA;采用嗜酸性氧化亚铁硫杆菌和氧化硫硫杆菌生物淋滤,以去除污泥中重金属;进一步... 孙村民 李强 王聪 邓飞 张伟 高世哲 王淑芳 宋存江关键词:剩余活性污泥 生物淋滤 重金属去除 两株嗜热解烃菌对原油的降黏机制 被引量:9 2013年 引言 微生物采油技术是通过微生物自身及其代谢活动作用于原油和油藏,从而提高原油采收率的一项采油技术[1-4]。按代谢类型划分,油藏微生物主要包括解烃菌、腐生菌、厌氧发酵菌、硝酸盐还原菌、硫酸盐还原菌和产甲烷菌等[5]。其中,解烃菌是能利用石油烃作为碳源生长代谢,并产生气体、有机酸、脂肪酸以及生物表面活性剂等代谢产物的一类微生物的总称[6]。 高配科 王燕森 张宏祚 潘晓轩 李国强 马挺关键词:原油 降解 乳化 降黏 组成型表达chi基因的Bt工程菌株构建及其特性 被引量:1 2014年 【目的】通过构建能够组成型高效表达几丁质酶的苏云金芽胞杆菌工程菌株,以提高其抑真菌活性。【方法】首先通过PCR扩增获得Bti75菌株chiB全长及系列缺失启动子片段,与本室构建的启动子探测型载体pCB连接,转化Bti75菌株,通过β-半乳糖苷酶活性检测及β-半乳糖苷酶mRNA的Real time-PCR检测,确定了一段长度为190 bp的组成型高效表达启动子。将这一启动子分别与Bti75自身几丁质酶基因chiA以及地衣芽胞杆菌(Bacillus licheniformis)的几丁质酶基因chiMY连接构建了组成型高效表达的工程菌株Bti75(pDA)和Bti75(pDM)。应用几丁质酶酶活检测、SDS-PAGE及酶谱分析检测了工程菌几丁质酶的表达情况。最后,通过检测工程菌发酵粗酶液对真菌孢子萌发和菌丝生长的影响,评估了工程菌对3种植物病原真菌的抗真菌活性。【结果】在没有诱导物存在的情况下,Bti75(pBPΔ7)菌株表达的β-半乳糖苷酶酶活和β-半乳糖苷酶mRNA的转录量分别是Bti75(pBP)菌株的7倍和2.5倍左右。在没有几丁质诱导的情况下,与野生株Bti75相比,工程菌株Bti75(pDA)和Bti75(pDM)的几丁质酶活性均提高了3.5倍左右。SDS-PAGE及酶谱分析证明目的几丁质酶在非诱导条件下达到组成型高效表达,抑真菌实验显示工程菌Bti75(pDA)和Bti75(pDM)抑制3种植物病原真菌的活性明显提高。【结论】发现190 bp的缺失启动子能够组成型高效表达不同来源的几丁质酶,无需诱导物的诱导,工程菌株就能展现良好的抗真菌能力。 李蓬飞 罗洋 谢池楚 蔡峻 边强 陈月华关键词:苏云金芽胞杆菌 几丁质酶 组成型表达 硝酸盐注入方式对抑制硫酸盐还原菌活性的影响 被引量:7 2019年 生物竞争排斥技术具有价格低廉、处理范围大、操作简单的特点,已经成为硫酸盐还原菌(SRB)油藏治理的重要方法,但现场注入工艺一直是限制该技术使用效果的主要瓶颈。在室内模拟地层条件,通过向地层水中注入硝酸盐类SRB抑制剂(每日注入或一次性注入等量药剂),促进水中的硝酸盐还原菌(NRB)大量生长扩增,以控制SRB的菌体数量与代谢活性,研究了硝酸盐注入方式对水中SO4^2-、NO^3-、NO^2-、H2S浓度和SRB、NRB菌体数量的影响。结果表明,与一次性加药组相比,每日加药组中SO4^2-浓度下降速度和幅度大,NO^3-和NO^2-浓度较低;两种加药方式均不产生H2S。治理初期一次性注入药剂对NRB的增殖效果明显优于每日注入的效果;治理中后期SRB受到抑制后,持续加入NO^3-的效果要优于一次性加入。在SRB治理过程中,前期投入过量的硝酸盐来刺激NRB的生长进而抑制SRB产生S^2-,后期使用小剂量药剂持续注入的方法来维持抑制效果。 王大威 张世仑 靖波 靖波 景宏 马挺关键词:硫酸盐还原菌 硝酸盐还原菌 硝酸盐 肠道致病菌感染位点识别机制 2019年 肠道是病原菌定殖和感染的主要人体器官.肠道感染每年在世界范围内可造成150~250万人死亡,居所有疾病的第三位.不同的肠道致病菌选择不同的肠道部位侵染、定殖,其中小肠和大肠是病原菌在肠道内定殖和感染的最主要位点.在致病过程中,肠道致病菌通过感受一系列环境信号(生物素、核酸、氧、短链脂肪酸、胆盐等)来精确识别其感染位点,启动致病基因表达,快速吸附或入侵肠上皮细胞,进而导致疾病发生.本文简要综述两种最重要的致病菌(大肠致病菌——肠出血性大肠杆菌,小肠致病菌——沙门氏菌)的感染位点识别机制. 杨斌 蒋玲艳 黄笛 丁鹏 刘斌 王磊关键词:肠道致病菌 肠出血性大肠杆菌 沙门氏菌