中山医科大学中山医学院分子医学研究中心
- 作品数：33 被引量：162H指数：5
- 相关作者：龙建平王银娜张斌诸辉徐年平更多>>
- 相关机构：中山大学生命科学学院北京大学生命科学学院三峡大学体育系更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金美国中华医学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学更多>>
- 胚胎干细胞体外分化为心肌细胞诱导因素的探讨被引量：29
- 2000年
- 目的：用胚胎干细胞（ＥＳＣ）体外诱导分化为心肌细胞，从分子水平上研究早期心脏发育相关基 因及其功能。方法：（１）胚胎干细胞的培养。（２）胚胎于细胞的分化培养。（３）被分化的心肌细胞鉴定：ＲＮＡ的 提取；心脏特异性引物的合成和ＲＴ－ＰＣＲ反应；探针标记、纯化和比放射活性测定；ＲＮＡ斑点杂交。结果：用最 适条件培养液对ＦＳＣ定向诱导分化，可使８０％以上的ＥＳＣ分化为心肌细胞。心肌细胞以同步的方式进行收缩。 反转录ＰＣＲ和斑点杂交的结果显示：心肌在早期发育就开始表达其特异性基因。结论：胚胎干细胞体外能诱导 分化为心肌细胞。胎牛血清、二甲基亚砜和维甲酸的浓度及它们之间的组成不同，对ＥＳ细胞定向诱导为心肌 细胞均有影响。最佳诱导条件是用２ｎｍｏｌ／Ｌ维甲酸、０．６％二甲基亚砜和２０％胎牛血清组成的条件培养液。
- 刘兰英杨琨朱振宇刘玉川余细勇银巍汤建马涧泉顾军
- 关键词：胚胎干细胞心肌细胞ESC
- 肥胖者及2型糖尿病患者瘦素基因的表达被引量：4
- 1999年
- 近年研究表明瘦素基因〔ｌｅｐｔｉｎｇｅｎｅ，旧称为肥胖基因（ｏｂｇｅｎｅ）〕的编码产物—瘦素（ｌｅｐｔｉｎ）在体重调节中起着重要作用。本研究采用ＲＮＡ斑点印迹杂交技术，检测了中国汉族人单纯性肥胖症患者及２型糖尿病患者腹部皮下脂肪组织的瘦素基因ｍＲＮＡ...
- 徐明彤钟光恕傅祖植傅祖植程桦
- 关键词：肥胖症II型糖尿病瘦素基因
- 番茄红素与癌被引量：18
- 2001年
- 番茄红素是主要的类胡萝卜素之一。最近的科学研究发现 ,它对人类健康有重要的作用。本文介绍了番茄红素的食物来源、生物合成、物理化学特性和生理活性 ,它的抗癌效果与其抗氧化活性有关。很多的流行病学研究证明 ,番茄红素对一些类型的癌有预防效果 ,如前列腺癌和消化道癌。体内和体外的癌细胞培养研究也支持这一结论。因此 ,具有广泛用途的番茄红素 。
- 谭新平王银娜刘昕
- 关键词：类胡萝卜素番茄红素癌症抗氧化剂食品抗癌作用
- 草鱼肝胰脏脂肪酸组成的气相色谱测定法被引量：4
- 2002年
- 本方法通过甲醇与氯仿的混合液（1:1）提取鱼类的肝胰脏得到的粗脂肪,再用氢氧化钾-甲醇室温脂化法酯化后,用气相色谱技术对经过甲脂化后的脂肪酸进行检测,用程序升温技术和面积归一化法定量,结果表明重复性和精密度都较好,是一种准确、快速和简单的测量方法。
- 郑文晖刘永坚田丽霞
- 关键词：脂肪酸组成气相色谱测定法
- 高效液相色谱法测定胃液中甲硝唑浓度被引量：1
- 1997年
- 介绍了反相高效液相色谱法测定人的胃液中甲硝唑含量的方法。服药后插管抽取胃液，试样用无水乙醇沉淀蛋白，离心，过滤，进样测定。方法的线性范围为２．５～２００ｍｇ／Ｌ，最小检知量为０．４ｍｇ／Ｌ，平均回收率为９６．０％，变异系数为３．０７％。
- 何光耀谭定定钟春宁
- 关键词：高效液相色谱甲硝唑胃液抗溃疡药灭滴灵
- 人ureb1在大肠杆菌中高效表达及其抗体的制备被引量：5
- 2001年
- 目的 :构建人的ureb1(hureb1)原核高效表达重组质粒 ,以此表达的外源蛋白为抗原制备抗ureb1的抗体。方法 :用XhoI/NotI从pGU 2质粒酶切得到hureb1的ORF与pGEX 4T 2的XhoI/NotI大片段连接 ,构建表达GST hureb1融合蛋白的重组载体。转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,IPTG诱导表达。以粗制的GST hureb1融合蛋白分别免疫大白兔和小鼠 ,制备抗hureb1的多克隆抗体和单克隆抗体 ,采用WesternBlot进行特异性鉴定。结果 :构建了高效表达GST hureb1融合蛋白的原核表达载体 ,融合蛋白的表达量占菌体蛋白质总量的 33 45 %。以大肠杆菌表达的GST hureb1融合蛋白免疫动物制备了高滴度、高特异性的抗hureb1的抗体。结论 :利用重组GST hureb1融合蛋白免疫动物可获得高滴度的抗hureb1抗体。重组GST
- 明文玉林学颜银巍顾军
- 关键词：DNA原核表达载体抗体大肠杆菌重组融合蛋白质粒
- 肌动蛋白在体外与p38激酶结合并抑制其激酶活性被引量：4
- 2002年
- p38激酶（简称p38）参与炎症、应急、细胞生长与凋亡、细胞周期调控、缺血/再灌损伤及心肌肥厚等生理、病理过程中的信号转导.为了研究该信号通道的分子机理和调节作用,寻找p38的结合蛋白,并检测其相互作用对激酶活性的影响,采用体外蛋白结合试验,在细菌内毒素或紫外辐射处理的鼠源性巨噬细胞系（RAW264.7）中,发现有两种蛋白在体外与p38直接结合,其中一种蛋白经肽质谱图鉴定为β-肌动蛋白（β-actin）,激酶活性检测表明,actin在体外抑制p38的自磷酸化活性,并抑制p38对其底物ATF2的磷酸化作用.提示actin与p38的结合在体内可能产生一种负反馈作用,调节p38通路的信号转导,从而调节细胞功能.
- 杨琨姜勇韩家淮顾军
- 关键词：丝裂原活化蛋白激酶P38激酶肌动蛋白蛋白-蛋白相互作用信号通道激酶活性
- 儿童日常饮食中脂肪含量及其脂肪酸组成的分析
- 改革开放以来,人们的生活水平得到了显著的提高,已经从过去的温饱型转向较富裕型,日常饮食中动物性食品增加了,脂肪的摄入量相应增加了,据有关资料显示,饱和脂肪酸的摄入量与血胆固醇水平,冠心病死亡率有一定的相关性。因此,如何合...
- 谭炳炎林敬本郑琳汤丽芬吴珏珩
- 文献传递
- 人胸腺上皮细胞培养上清液促进鼠胸腺细胞和细胞株增殖的研究(英文)
- 1997年
- 胸腺是细胞分化发育的场所，源于骨髓的前Ｔ细胞。在以胸腺上皮细胞为主体的基质细胞作用下，增殖、分化、成为成熟Ｔ细胞，迁移至外周。胸腺基质细胞通过细胞与细胞之间的直接接触和分泌细胞因子影响细胞分化发育的各个阶段。本文探讨了人胸腺上皮细胞培养上清液（ＴＥＣＳＮ）对鼠胸腺细胞、８５、Ｂｅ１３、ＨＤＭａｒ、Ｍｏｌｔ４、Ｒｅｈ以及Ｊｕｒｋａｔ细胞株增殖的影响。取人胸腺组织，用０．１５％的胰酶消化组织块后，将其接种到培养瓶中进行培养，收集上清液。将ＴＥＣＳＮ加到鼠胸腺细胞悬液中，２ｈ后加３ＨＴｄＲ，观察鼠胸腺细胞自发性掺入３ＨＴｄＲ有无改变。同时将ＴＥＣＳＮ＋ＣｏｎＡ加入鼠胸腺细胞悬液中培养４８ｈ，收获细胞前１８ｈ加入３ＨＴｄＲ，测定ＣＰＭ值。此外，ＴＥＣＳＮ加入８５细胞株及其它细胞株悬液中，观察ＴＥＣＳＮ对这些细胞株增殖的影响。上述各实验均设有对照组（Ｔａｂ．１）。结果表明：ＴＥＣＳＮ本身能增强鼠胸腺细胞３ＨＴｄＲ自发掺入，其３ＨＴｄＲＣＰＭ值明显大于对照组（Ｆｉｇ．１）。ＴＥＣＳＮ单独使用不影响胸腺细胞增殖，ＣｏｎＡ单独作用能促进鼠胸腺细胞增殖反应，而ＴＥＣＳＮ与ＣｏｎＡ共同使用，胸腺?
- 龙建平
- 关键词：上清液细胞增殖
- 人UREB1基因克隆及其在肿瘤组织中的分布被引量：5
- 2001年
- 目的：大鼠 ＵＲＥＢ１基因编码的蛋白质能特异性地结合位于强吗啡基因启动子上游的一段 ＤＮＡ序列（ｕｐｓｔｒｅａｍ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ ｅｌｅｍｅｎｔ，ＵＲＥ）。早期研究证实 ＵＲＥＢ１对强吗啡基因启动子的转录具有促进作用，而对ｐ５３的转录激活作用具有抑制效应。本实验目的就是克隆人ＵＲＥＢ１基因，探索其与肿瘤发生发展的关系。方法：利用人工合成寡核苷酸探针从人脑ｃＤＮＡ文库中筛选人ＵＲＥＢ１基因，应用大肠杆菌表达的重组蛋白质制备的抗体检测肿瘤组织中ＵＲＥＢ１的表达分布。结果：获得了人ＵＲＥＢ１基因，核苷酸序列在对应区域及氨基酸序列与大鼠ＵＲＥＢ１基因ｃＤＮＡ序列和氨基酸序列皆有９１％的同源性。在各种肿瘤组织中都有ＵＲＥＢ１的表达，但是表达水平及定位不一样。初步发现有这样一个规律，随着肿瘤的恶性程度增加 ＵＲＥＢ在１核内的聚集程度增加。 ＵＲＥＢ１的酪氨酸磷酸化分析结果显示，肿瘤恶性程度高，ＵＲＥＢ１的酪氨酸磷酸化程度高。结论：ＵＲＥＢ１可能参与肿瘤的发生发展，其酪氨酸磷酸化水平可以影响肿瘤的恶性程度。
- 明文玉银巍刘子川林学颜顾军
- 关键词：基因克隆肿瘤蛋白质磷酸化
