山西医科大学基础医学院医学寄生虫学研究所
- 作品数：108 被引量：281H指数：11
- 相关作者：殷国荣张建红马广源石蓉李雅清更多>>
- 相关机构：太原师范学院生物系山西农业大学动物科技学院山西大学生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山西省自然科学基金山西省青年科技研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- STAg和CT滴鼻免疫小鼠诱导的刚地弓形虫特异性黏膜及系统免疫应答被引量：1
- 2007年
- 刚地弓形虫（Toxoplasma gondii）属专性细胞内寄生性原虫，人群感染极为普遍，全球约20亿人感染，2001—2004年中国人群血清阳性率高达7．88％。弓形虫感染在免疫缺陷、免疫抑制者可引起严重病变，孕期感染可经胎盘垂直传播致先天性弓形虫病。研制安全、有效、价廉的疫苗防治弓形虫感染乃当务之急。机体95％以上的感染发生在黏膜部位，皮下、肌肉接种疫苗不能有效诱导黏膜部位的免疫应答，只有从黏膜部位进行疫苗接种，才能有效预防黏膜感染。
- 孟晓丽殷国荣
- 关键词：可溶性速殖子抗原滴鼻免疫弓形虫黏膜免疫
- 弓形虫SAG1基因功能片段的克隆、表达与抗原性分析被引量：3
- 2009年
- 目的重组、表达与纯化弓形虫速殖子主要表面抗原1(SAG1)具有生物活性的功能多肽,分析其抗原性。方法根据SAG1的基因序列设计引物,截除其前端的信号肽和后端的疏水区,只扩增650bp的功能区域;将该片段重组入带有His标签的pET-30a(+)质粒,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导其在E.coli中表达,调整诱导表达时间、IPTG浓度等条件,高效稳定地表达出目的蛋白;镍柱亲和层析法纯化目的蛋白,Western-blot检验纯化后蛋白的抗原性。结果成功构建pET-30a(+)/SAG1重组质粒,使其在E.coli中高效稳定地可溶性表达,并确定出在0.5mmol/LIPTG浓度下诱导12h为最佳表达条件,Western-blot显示纯化后的蛋白具有良好的抗原性。结论获得了可溶性的弓形虫SAG1基因功能片段表达的产物,其具有良好的抗原性。
- 张建伟王海龙殷国荣刘转转刘晋平赵丰
- 关键词：弓形虫SAG1蛋白纯化抗原性
- 弓形虫排泄-分泌抗原和可溶性速殖子抗原免疫原性的观察被引量：2
- 2009年
- 目的观察弓形虫速殖子排泄-分泌抗原(excreted/secreted antigen,ESA)和可溶性速殖子抗原(soluble tachyzoite antigen,STAg)鼻内免疫小鼠的免疫原性。方法BALB/c小鼠随机分为4组,分别用PBS 20μl/只、体外排泄-分泌抗原(excreted/secreted antigenin vitro,ESAv)、腹腔排泄-分泌抗原(excreted/secreted antigen in mice,ESAm)和STAg各20μg/只鼻内免疫2次,间隔14 d。分别于末次免疫后14 d和44 d每组处死8只小鼠,计数肠上皮内淋巴细胞(intestinal intraepithelial lymphocytes,iIEL)和脾淋巴细胞,ELISA法检测血清IgG和小肠冲洗液sIgA抗体水平。结果实验期间,ESAm组小鼠于二次免疫后状态欠佳,其他各组小鼠健康状况良好。末次免疫后14 d,各抗原组脾淋巴细胞及iIEL均增殖活跃,细胞数与PBS组比较,差异具统计学意义(P<0.05或P<0.01);至免疫后44 d,两种ESA组脾淋巴细胞及iIEL数与PBS组比较差异具统计学意义(P<0.05)。各抗原组血清IgG水平在免疫后14 d和44 d均明显增高,与PBS组比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。免疫后14 d肠液sIgA水平ESAv、ES-Am和STAg组与PBS组比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),ESAm和STAg组与ESAv组比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),两种ESA组在免疫后44 d与PBS组比较差异仍具统计学意义(P<0.05)。结论ESAv、ESAm和STAg鼻内免疫均可诱导粘膜及系统的细胞和体液免疫应答,有较强的免疫原性。但ESAm可能对机体有毒副作用,不适宜直接鼻内免疫。
- 刘娟娟吴静殷国荣孟晓丽刘红丽刘转转
- 关键词：刚地弓形虫排泄-分泌抗原可溶性速殖子抗原鼻内免疫免疫原性
- 弓形虫复合黏膜疫苗滴鼻免疫小鼠诱导的脾淋巴细胞持续性免疫应答被引量：5
- 2006年
- 目的观察弓形虫复合黏膜疫苗滴鼻免疫BALB/c小鼠后诱导的脾淋巴细胞的免疫应答及持续时间。方法96只BALB/c小鼠随机分为免疫组和对照组,免疫组以弓形虫复合黏膜疫苗20μl/只(20μg可溶性速殖子抗原+1μg霍乱毒素)滴鼻免疫2次(间隔2周),对照组以PBS滴鼻。分别于末次滴鼻后第1,2,3,4,6,8,10,12周处死小鼠,脾淋巴细胞计数,免疫细胞化学法检测CD4+、CD8+T细胞亚群水平。结果免疫组小鼠于第1,2周脾淋巴细胞明显高于对照组(P<0.01),其中以CD4+T细胞增生为主,第1,2,3,4,6周增生显著(P<0.01),CD8+T细胞水平在第2,3周也有增生(P<0.05),CD4+/CD8+比值第6周高于对照组(P<0.01)。结论弓形虫复合黏膜疫苗滴鼻免疫BALB/c小鼠可有效诱导脾淋巴细胞增殖性免疫应答,且可持续较长时间。
- 孟晓丽殷国荣吴静唐旭马广源张杰
- 关键词：弓形虫属黏膜疫苗滴鼻免疫霍乱毒素
- 弓形虫STAg不同接种途径免疫小鼠诱导的免疫应答被引量：13
- 2008年
- 目的观察弓形虫可溶性速殖子抗原（STAg）经滴鼻、灌胃和皮下注射3种途径免疫小鼠诱导的免疫应答。方法5-6周龄BALB／c小鼠32只，随机分为4组，分别以20μgSTAg滴鼻、灌胃或皮下注射免疫小鼠2次，间隔2周，对照组不作处理。末次免疫后14d脱颈椎处死小鼠，分离脾淋巴细胞和肠上皮内淋巴细胞（IELs）并计数，ELISA法测定血清、肠冲洗液中的弓形虫特异性抗体。结果滴鼻组和皮下注射组的脾淋巴细胞数量高于灌胃组和对照组，灌胃组与对照组相近。滴鼻组的IELs数量高于皮下注射组、灌胃组和对照组，皮下注射组和灌胃组与对照组一致。皮下注射组的血清IgG水平高于滴鼻组、灌胃组和对照组，滴鼻组略高于灌胃组和对照组，但差异无显著意义。滴鼻组的小肠冲洗液sIgA水平高于皮下注射组、灌胃组和对照组，皮下注射注射组和灌胃组略高于对照组，差异无显著意义。结论20腭STAg滴鼻免疫小鼠诱导的黏膜免疫应答优于灌胃和皮下注射；皮下注射免疫小鼠诱导的血清IgG抗体水平高于滴鼻和灌胃，但其未能诱导黏膜免疫应答。
- 刘延庆刘晋平殷国荣马晓明孟晓丽刘红丽
- 关键词：可溶性速殖子抗原刚地弓形虫免疫应答免疫途径
- 弓形虫STAg不同途径免疫小鼠诱导的黏膜免疫和系统免疫应答动态变化被引量：2
- 2010年
- 目的动态观察弓形虫可溶性速殖子抗原（soluble tachyzoite antigen,STAg）滴鼻和皮下免疫小鼠诱导的黏膜免疫和系统免疫应答。方法6周龄BALB/c小鼠90只随机分为3组,分别以20μg STAg滴鼻或皮下注射免疫小鼠2次,间隔2周,对照组不做处理。末次免疫后1、2、3、4和5周,每组随机处死6只小鼠。ELISA法测定小肠冲洗液sI-gA和血清IgG,分离并计数小肠上皮内淋巴细胞（intraepithelial lymphocyte,IEL）和脾淋巴细胞。结果对照组小鼠小肠冲洗液sIgA水平和IEL数及血清IgG水平和脾淋巴细胞数均维持在较低水平。滴鼻免疫组小鼠小肠冲洗液sIgA水平升高,与对照组比较差异有统计学意义（FsIgA=10.074,FIEL=14.747,P〈0.01）,其中第5周sIgA水平、第2~5周IEL数量与皮下免疫组比较差异有统计学意义（FsIgA=7.862,FIEL=9.807,P〈0.05）。皮下免疫组小鼠血清IgG水平和脾淋巴细胞数均升高,与对照组比较差异有统计学意义（FIgG=8.207,F脾细胞=11.209,P〈0.05）,第5周脾淋巴细胞数与滴鼻组比较差异有统计学意义（F=6.826,P〈0.05）。结论20μg STAg滴鼻免疫小鼠诱导的黏膜免疫应答水平优于同剂量的皮下免疫,同时也诱导了较高水平的系统免疫应答。皮下免疫可诱导较高水平的系统免疫应答,但其诱导的黏膜免疫应答较弱。
- 刘美娜殷国荣孟晓丽殷丽天申金雁刘红丽
- 关键词：可溶性速殖子抗原鼻内免疫黏膜免疫免疫途径
- 经口感染弓形虫在小鼠组织内的动态分布被引量：3
- 2008年
- 目的观察经口感染弓形虫速殖子在小鼠小肠组织、实质器官内的动态分布。方法BALB/c小鼠96只,随机分为8组,0 d组用0.5 ml PBS/只灌胃,其余组用RH株弓形虫速殖子1×104个灌胃感染,感染后2、4、6、8、10、12、14 d处死小鼠,每次处死12只,取十二指肠、空肠、回肠、肝脏、脾、肾、肺、心和脑做组织印片,吉-瑞氏染色,镜检。结果感染后2 d在十二指肠、空肠、回肠、肺和心,4 d在脾,6 d在肾和肝脏发现虫体,脑内未发现虫体。十二指肠、空肠、回肠组织内虫体数量呈上升趋势,第6天达高峰后稍有下降。肝内虫体数量呈上升趋势,第6天最多;脾内虫体数量在6 d达峰值后保持较高水平;实验期间肾、肺和心内虫体数量保持较低水平。结论弓形虫经口感染小鼠后2 d,小肠组织出现大量速殖子;同时肺和心内有少量速殖子;4 d在脾、6 d在肾和肝脏发现虫体;速殖子在上述组织内增殖,并形成假包囊,脑内未发现虫体。
- 申金雁杨莎莎殷国荣马广源孟晓丽刘红丽
- 关键词：弓形虫经口感染
- 重组弓形虫热休克蛋白70鼻内及皮下免疫小鼠诱导的免疫应答比较被引量：5
- 2011年
- 目的比较重组弓形虫热休克蛋白70(rTgHSP70)滴鼻及皮下免疫小鼠诱导的免疫应答及其持续时间。方法将90只BALB/c小鼠随机分为3组:滴鼻组用20μg rTgHSP70滴鼻,皮下组用80μg rTgHSP70皮下免疫,间隔2周加强免疫1次,对照组不处理。末次免疫后第1、2、3、4、5、6周,每组分别处死小鼠5只,ELISA法检测血清IgG水平、鼻咽和肠冲洗液sIgA水平;分离脾淋巴细胞和肠上皮内淋巴细胞(IEL)并计数。结果滴鼻组小鼠血清IgG水平第1～6周高于皮下组和对照组,其中第3～5周差异有统计学意义(P<0.001);皮下组小鼠第3、4周显著高于对照组(P<0.001)。滴鼻组小鼠第3～5周,皮下组小鼠第4～5周鼻咽冲洗液sIgA水平显著高于对照组(P<0.001)。滴鼻组小鼠小肠冲洗液sIgA水平第1～6周显著高于皮下组和对照组(P均<0.001);皮下组小鼠第3、4周显著高于对照组(P<0.001)。滴鼻组小鼠脾淋巴细胞数量第2～4周显著高于对照组(P<0.000 1),3～4周显著高于皮下组(P<0.001);皮下组小鼠第2～4周显著高于对照组(P<0.001)。滴鼻组小鼠IEL数量第1～6周显著高于对照组(P<0.000 1),第3～4周显著高于皮下组(P<0.000 1),皮下组小鼠第1～5周显著高于对照组(P<0.05)。结论 rTgHSP70皮下和滴鼻免疫小鼠均能诱导有效的黏膜和系统免疫应答,且滴鼻免疫的效果优于皮下免疫,是rTgHSP70更为有效的免疫途径。
- 殷丽天曹蕾王海龙孟晓丽张建红殷国荣
- 关键词：刚地弓形虫热休克蛋白70鼻内免疫
- 弓形虫复合黏膜疫苗鼻内免疫小鼠抵抗弓形虫感染作用的观察被引量：35
- 2007年
- 目的观察弓形虫复合黏膜疫苗鼻内免疫小鼠诱导的肠黏膜和系统免疫应答及其抗弓形虫感染作用。方法BALB/c小鼠52只随机分为两组(每组26只),免疫组小鼠用弓形虫复合黏膜疫苗(每毫升含可溶性速殖子抗原1mg,霍乱毒素50μg)20μl/只滴鼻免疫2次,间隔2周;对照组用等剂量PBS滴鼻。末次免疫后14d,各组处死6只,摘眼球取血(0.5～1ml);取直肠内粪便(4～5粒),ELISA测定血清IgG和粪IgA抗体;分别计数脾组织、派伊尔集合淋巴结(PP)和肠上皮淋巴细胞(IEL),免疫细胞化学法检测各组织中CD4+、CD8+T细胞亚群水平。用RH株弓形虫速殖子(4×104个/只)灌胃攻击感染各组其余小鼠,30d后颈椎脱位处死,计数肝、脑组织速殖子虫荷。结果免疫后14d,免疫组小鼠血清IgG和粪IgA抗体水平(分别为0.224和0.371),显著高于对照组(分别为0.041和0.037)(P<0.05),脾、PP和IEL中T淋巴细胞与对照组相比明显增生(P<0.01),其中脾、PP中CD4+、CD8+T淋巴细胞增殖显著(P<0.05),IEL中以CD8+T细胞为主,增殖显著(P<0.01),CD4+/CD8+比值降低(P<0.05)。攻击后30d,免疫组小鼠存活率(85.0%)显著高于对照组(45.0%)(P<0.05)。免疫组肝、脑组织速殖子数比对照组分别减少86.3%、86.7%,两组差异有统计学意义(P<0.05)。结论弓形虫复合黏膜疫苗鼻内免疫小鼠,能有效诱导黏膜和系统免疫应答,小鼠存活率显著提高,肝、脑组织虫荷显著降低。
- 殷国荣孟晓丽马广源马晓明
- 关键词：弓形虫黏膜疫苗鼻内免疫可溶性抗原霍乱毒素
- 刚地弓形虫滑行相关蛋白的研究进展被引量：5
- 2016年
- 顶复门寄生虫入侵宿主细胞的能力是其生存和致病的关键。刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)是顶复门的一种专性细胞内寄生虫,无论其滑行、入侵或逸出感染细胞,都必须依靠被称为肌-动球蛋白马达(actomyosin motor,AMM)的装置提供动力。AMM主要由肌球蛋白A、1条肌球蛋白轻链(myosin light chain,MLC1)和2条必需轻链(essential light chain,ELC)1、2以及滑行相关蛋白(gliding-associated protein,GAP)组成。目前已经发现的GAP家族包括GAP45、GAP50、GAP80、GAP70和GAP40,它们是构成驱动寄生虫运动的滑行体的重要成分。滑行体是一个存在于寄生虫质膜与内膜复合物之间的以肌-动球蛋白为基础的动力装置。本文概述了目前对GAP构建与功能的理解以及弓形虫运动的分子基础,同时对GAP作为弓形虫病疫苗候选抗原分子作了展望。
- 李润花殷国荣
- 关键词：刚地弓形虫
