西北农林科技大学动物科技学院国家干细胞工程技术研究中心陕西分中心
- 作品数：73 被引量：87H指数：4
- 相关作者：华进联王华岩高志敏沈巧艳杨文琳更多>>
- 相关机构：四川农业大学动物科技学院榆林学院生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 脂肪间质干细胞修复犬关节软骨损伤的研究
- 2024年
- 以手术方法建立2对共4处犬关节软骨组织损伤;使用无血清细胞培养液为对照,以标记有绿色荧光蛋白的犬脂肪间充质干细胞进行移植治疗试验。病理模型犬进行常规饲养15周后,对病理模型进行取样并系统检测。结果显示,试验组较对照组有更大面积和体积的新生关节软骨组织。新生软骨样组织呈绿色荧光蛋白(GFP)阳性。试验组与对照组的新生组织HE染色显示,试验组的细胞外基质染色较对照组更加均一,基质切面更加平整光滑。透明软骨的标志性基因COL2a1的免疫荧光染色显示,试验组可见较强的COL2a1阳性染色,而对照组仅有少量微弱的阳性染色。实时荧光定量PCR检测结果显示,试验组的COL2a1含量显著高于对照组(P<0.05)。试验结果表明,直接移植原代犬脂肪间充质干细胞到关节腔可有效修复犬软骨组织缺损,为干细胞治疗临床软骨组织损伤提供了科学依据。
- 滕鑫艾力·艾尔肯吕长荣张欣珂赵献军华进联
- 关键词：间充质干细胞干细胞移植治疗
- 山羊角膜缘干细胞荧光蛋白(Venus)细胞株的建立及角膜上皮植片构建被引量：1
- 2010年
- 角膜缘干细胞是角膜上皮更新与修复的来源,角膜上皮受损严重常会导致角膜盲。尽管近几年通过角膜缘干细胞移植术(LSCT)治愈角膜上皮受损的临床应用已被推广,但是对于角膜缘干细胞移植受损机体后的修复机理并不明确。为了实现角膜缘干细胞移植后的活体追踪,使用G418筛选标记有Venus荧光蛋白的角膜缘干细胞株(GLSC-V),并以其为种子细胞接种于去上皮羊膜上,体外培养21d构建成荧光角膜上皮植片。荧光倒置显微镜下观察GLSC-V的细胞质和细胞核均有绿色荧光表达,在体外培养荧光至少持续3个月。免疫荧光检测GLSC-V细胞P63、Integrinβ1均呈阳性表达,对GLSC-V细胞及未转染的GLSCs进行半定量RT-PCR检测显示,两组细胞皆未表达终末分化角膜上皮细胞基因k3、k12,GLSC-V中p63及pcna较未转染组细胞略上调,venus强表达。经HE染色观察构建的人工角膜组织由5～6层上皮细胞组成,组织中上表皮细胞个数少、体积大且呈扁平状;基底部细胞密集、体积小且成立方状。经免疫荧光检测仅组织基底部最基层细胞表达P63,上表皮细胞不表达。该人工角膜与正常角膜上皮组织结构特性相似,可用于移植,为研究角膜缘干细胞修复严重受损角膜上皮机理奠定基础。
- 殷吉庆刘文强刘超赵贵民张翊华刘维帅华进联窦忠英雷安民
- 关键词：角膜缘干细胞角膜缘干细胞移植术
- METTL3对猪干细胞多能基因表达的调控作用被引量：4
- 2018年
- m^6A是真核生物m RNA中重要的转录后修饰,METTL3作为m^6A甲基转移酶复合物中的重要组分,在细胞重编程、胚胎干细胞和诱导多能干细胞的干性维持、胚胎发育等过程中发挥重要作用。为了揭示猪METTL3的表达模式,对不同物种METTL3蛋白序列进行了比对,用RT-PCR检测了METTL3基因在不同猪组织和细胞中的表达情况,并确认了METTL3的细胞核定位。为了研究METTL3对猪干细胞多能基因表达的调控作用,克隆了猪METTL3编码区序列,设计了METTL3干扰片段,并构建了相应的过表达和沉默载体。发现干扰METTL3的表达后,猪多能干细胞出现类似na?ve状态的细胞克隆,NANOG、OCT4和LIN28A表达水平显著升高。在猪多能干细胞培养基中添加m^6A甲基化抑制剂环亮氨酸培养细胞48 h后,试验结果与干扰METTL3表达的结果一致。本研究为优化猪多能干细胞的培养体系提供了新的方向和依据。
- 马子玉任亚辉凌敏王华岩
- 猪BMP-15和GDF-9报告载体的构建及其组织特异性表达研究
- 本研究从猪的9种不同组织(卵巢、辜丸、胃脏、肝脏、肌肉、肾脏、心脏、胸腺、肺脏)中提取总RNA，采用定量RT-PCR方法检测上述两个基因的表达变化。再对猪卵母细胞、中国仓鼠卵巢细胞(CHO)、小鼠成肌细胞(C2C12 )...
- 秦明鸣万千惠王华岩
- 关键词：转移生长因子基因表达协调控制生物学反应
- 文献传递
- 抗衰老的GDF11生物学特征与功能表现被引量：5
- 2016年
- 生长分化因子11(growth differentiation factor-11,GDF11)是转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)超家族中骨形态发生蛋白(bone morphogenetic proteins,BMPs)亚家族中的一个重要成员,在哺乳动物的骨骼、肾等多种器官组织上均有表达,且在胚胎发育、骨骼和肌肉形成等方面起着重要作用。近年研究发现,GDF11与哺乳动物的抗衰老作用联系越来越紧密。本文整理国内外关于GDF11与衰老关系的研究,对GDF11生物学基础以及对动物心脏的衰老、认知能力以及骨骼肌肉等方面的影响进行了综述。我们认为,GDF11作为一种新的细胞因子,可以调控多种下游信号通路,其作用的方式及影响还有待研究。GDF11研究可为在抗衰老以及与衰老相关疾病的治疗提供一定的理论基础。
- 沈巧艳李娜华进联
- 关键词：转化生长因子Β抗衰老
- 内质网应激与哺乳动物雄性生殖被引量：6
- 2016年
- 内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)激活未折叠蛋白反应,维持哺乳动物细胞的胞内稳态,过度持续的ERS导致细胞凋亡。最新研究表明,ERS对哺乳动物雄性生殖有重要的调节作用,包括对精母细胞、睾丸结构及精子发生的影响。ERS是研究生殖细胞生存和凋亡的新通路。雄性不育可能是由过度ERS引起的。本文通过简述ERS的最新研究进展,分析雄性生殖与ERS的关系,并从ERS调控雄性生殖角度提出新的理解和展望。
- 崔艳华华进联彭莎
- 关键词：内质网应激雄性生殖哺乳动物
- AQP3对体外培养的牛卵母细胞胞质直径的影响
- 2013年
- 哺乳动物卵母细胞的体外成熟培养技术与显微实时摄影技术相互结合,使得体外培养卵母细胞成熟过程的全程记录监控成为可能。本研究利用这一技术对牛卵母细胞体外培养过程的形态学变化进行了观测并进行了一些初步分析,用以监测卵母细胞体外成熟的过程,初步探索掌握牛卵母细胞体外成熟过程的形态学变化规律,为相关领域的深入研究提供参考。在CO2培养箱内、外分别进行牛卵母细胞的体外成熟培养,在确定环境对卵成熟影响的基础上,利用显微实时摄像系统监控牛卵母细胞体外培养过程中的形态变化与第一极体排出率。结果表明,在CO2培养箱内、外的不同环境下培养,牛卵母细胞成熟率没有显著差异(P>0.05)。通过实时监测卵母细胞成熟过程,发现部分卵母细胞存在一个短时间的胞质膨涨并随之恢复原体积的过程,而且这类卵母细胞最终死亡,造成这种现象的原因推测是与卵子中一种叫做AQP3的水通道蛋白有关。
- 安鹏张亚伟张德锋刘明兰雷安民
- 关键词：卵母细胞体外培养AQP3
- 正常胚胎与核移植重构胚发育中的生物学变化比较被引量：3
- 2012年
- 本文介绍了正常胚胎和核移植重构胚发育过程中的生物学变化,从细胞形态学和分子机理两方面阐述了二者之间的差异,总结了影响核移植重构胚胎发育的主要因素。在细胞形态学上着重探讨了卵子染色体结构变化对于卵重编程作用的影响,在分子水平上对卵子组蛋白与供核细胞组蛋白的置换进行了讨论,理论上为核移植效率的提高提供了借鉴。
- 隋进强高文超左秀荷雷安民
- 关键词：核移植胚胎
- TGF-β通路与哺乳动物卵母细胞发育研究进展被引量：2
- 2018年
- 转化生长因子β(TGF-β)信号通路是一个包含众多成员的多功能细胞因子的大家族,其在卵母细胞形成和发育方面发挥重要的作用。TGF-β信号通路主要是通过配体与受体结合形成复合物,从而激活相关分子调控关键基因的表达。这一系列过程包括直接参与调控作用的骨形成蛋白(BMPs)、激活素(activins)、抑制素(inhibin)、TGF-β和抗苗勒管素(AMH)。另外,还通过偶联环腺苷酸(cAMP)、激素和表皮生长因子(EGF)三个主要途径间接影响TGF-β通路对卵母细胞的发育。论文通过综述TGF-β通路对哺乳动物卵母细胞发育影响的研究进展,为相关研究提供参考。
- 牛慧敏王丽丽张俊玉吕珊尚江华雷安民
- 关键词：转化生长因子Β卵母细胞环磷酸腺苷
- Hsp70及其辅助伴侣分子的分子结构和生物学功能研究进展被引量：1
- 2020年
- 分子伴侣具有稳定蛋白质或辅助蛋白质完成折叠的作用。热激蛋白(heat shock protein,HSP)是分子伴侣的一个家族,可在蛋白质复合物组装过程中保护蛋白质并防止蛋白质聚集和分解。目前,对于热激蛋白70(Hsp70)的研究最为广泛和深入。Hsp70与底物作用时需要依靠辅助伴侣分子,不同的辅助伴侣分子对于Hsp70的作用不同。论文详细介绍了Hsp70与3种主要辅助伴侣分子(carboxyl terminus of the Hsc70-interacting protein,CHIP、nucleotide exchange factor,NEF、J domain protein,JDP)的结构、生物学功能及它们在Hsp70循环中的作用。
- 王卓曹云师李雪梅彭莎
- 关键词：热激蛋白70分子结构生物学功能
