江南大学食品学院食品营养与安全研究所
- 作品数：14 被引量：43H指数：3
- 相关作者：施用辉艾正亚更多>>
- 相关机构：河南工业大学生物工程学院江西农业大学动物科学技术学院吉林农业大学食品科学与工程学院更多>>
- 发文基金：中央级科研院所科技基础性工作专项国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- 家蝇抗菌肽的抑菌动力学研究及其机理初探被引量：25
- 2006年
- 利用鼠伤寒沙门氏菌针刺诱导家蝇幼虫表达抗菌肽,对抗菌肽的抑菌动力学进行研究,并通过抗菌肽对不同细菌动力学特性的研究出发对抗菌肽抑菌作用机制进行了探讨。研究发现抗菌肽样品的活性与作用时间有关,24h内出现一到两个活性峰,同一抗菌肽样品对不同细菌的抑菌动力学有差异,抗菌肽的抑菌动力学机制应该与它的抑菌作用机制有关。通过电镜观测、细胞磷代谢、紫外吸收物测定以及抗菌肽与细菌DNA相互作用结果可知,微生物诱导家蝇表达的抗菌肽样品不仅能够造成细菌细胞的快速坍塌破裂而且能够破坏细胞核心,与DNA结合。抗菌肽抑菌动力学的解释:微生物诱导产物中含有两部分抗菌肽,一部分抗菌肽能造成细胞膜的快速坍塌破裂形成第一个活性峰;另一部分抗菌肽可进入细胞,破坏细胞核心,造成紫外吸收物大量外泄形成第二个活性峰。
- 翟培韩晋辉侯丽霞乐国伟施用晖
- 关键词：家蝇幼虫抗菌肽抑菌机理
- 携带pcDNA3s质粒重组减毒沙门菌在小鼠体内的组织代谢与免疫应答
- 本文研究了外源质粒 pcDNA3s 被减毒伤寒沙门菌承载后在小鼠体内的组织分布与代谢,研究了重组减毒鼠伤寒沙门菌的细胞免疫与体液免疫反应。将质粒 pcDNA3s 电转化到减毒鼠伤寒沙门菌 SL8786,构建重组减毒鼠伤寒...
- 方希修孙进管军军白新鹏王冬梅乐国伟
- 文献传递
- 外源核苷酸对LPS刺激小鼠的保护作用及其机制研究
- 目的:研究外源核苷酸对脂多糖(LPS)刺激小鼠的保护作用,并探讨其可能机制。方法:采用刚断奶的16±2日龄昆明种仔鼠40只,按体重随机分成五组:对照组、核苷酸(NT)组(4h、1 8h)、无核苷酸(NF)组(4h、1 8...
- 李石营施用晖乐国伟
- 关键词：核苷酸
- 文献传递
- 抗乙肝病毒卵黄IgY理化特性研究
- 2006年
- 用ELISA技术研究了抗乙肝卵黄免疫球蛋白(抗HBV-IgY)对温度、酸碱度、胃蛋白酶、胰蛋白酶及反复冻融的稳定性。在大于75℃的高温条件下,抗HBV-IgY是极不稳定的;在pH4.0～10.0范围内,抗HBV-IgY活性相对稳定;对胃蛋白酶具有良好的抵抗能力(pH>4.0),对胰蛋白酶非常敏感,经2h酶解处理,抗HBV-IgY的结合活性完全丧失;抗HBV-IgY具有很好的耐反复冻融的特性。
- 方希修周新民乐国伟白新鹏施用晖
- 关键词：酶联免疫吸附测定胃蛋白酶胰蛋白酶理化特性
- 携带pcDNA3s与EGFPC3质粒的重组减毒沙门氏菌的免疫性与EGFP的表达被引量：1
- 2007年
- 目的研究HBsAg DNA重组减毒鼠伤寒沙门氏菌的免疫性与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因EGFPC3在小鼠体内的表达。方法将质粒pcDNA3s与pEGFPC3分别电转化减毒鼠伤寒沙门氏菌SL8786,构建重组减毒鼠伤寒沙门氏菌SL8786/EGFPC3与SL8786/pcDNA3s。利用时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)检测小鼠的血清抗体的含量,以及重组菌引起的T细胞增殖和细胞毒性T淋巴细胞(CTL)应答。用荧光显微镜观察EGFPC3表达。结果口服SL8786/p cDNA3s免疫小鼠后,可诱导产生较强的特异性CTL应答。口服免疫小鼠后第11周抗-HBs含量最高。用流式细胞术检测贴壁培养的2只小鼠的脾细胞中SL8786/EGFPC3阳性率分别为19.20%和17.36%,而SL8786/pcDNA3口服的2只小鼠脾细胞中的EGFP阳性率分别仅为1.95%和1.63%。给小鼠口服SL8786/EGFPC33周后,在小鼠肝脏、脾脏、肾脏、胸腺、十二指肠及肌肉等组织中,均有EGFPC3的表达。结论口服SL8786/pcDNA3s在小鼠体内诱导了特异性细胞和体液免疫应答。携带EGFPC3的重组鼠伤寒沙门氏菌SL8786/EGFPC3在小鼠的部分组织中产生绿色荧光表达,该重组菌的构建为减毒沙门氏菌作为活载体基因工程疫苗的研制提供了一个优良模型。
- 方希修王冬梅施用辉乐国伟白新鹏刘建文
- 关键词：免疫应答
- 减毒沙门菌承载的质粒DNA在小鼠体内的组织代谢与免疫应答
- 研究外源质粒pcDNA3s被减毒伤寒沙门菌承载后在小鼠体内的组织分布与代谢,研究重组减毒鼠伤寒沙门菌的细胞免疫与体液免疫反应。将质粒pcDNA3s电转化到减毒鼠伤寒沙门菌SL8786,构建重组减毒鼠伤寒沙门菌疫苗,分别灌...
- 方希修乐国伟王冬梅施用辉刘建文
- 关键词：组织代谢免疫应答
- 文献传递
- 高蛋白膳食对小鼠胰腺功能的氧化损伤被引量：2
- 2010年
- 为探讨高蛋白膳食对小鼠胰腺功能的影响,试验选用30只C57BL/6J雄性小鼠,按体重随机分成对照组、高蛋白组和抗氧化剂组3组。试验2周后处死小鼠,取胰腺组织进行检测。结果表明,与对照组相比,高蛋白组MDA显著升高(P<0.05),SOD、GSH-Px活性和T-AOC显著下降(P<0.05),脏器中胰腺重影响较大,表现为显著增加,蛋白质、DNA和RNA浓度显著提高,消化酶活性显著降低,生长抑素和胰岛素水平显著提高(P<0.05)。添加抗氧化剂—半胱胺后,自由基水平被降低,抗氧化能力被提高,胰腺功能也有所改善。因此,高蛋白膳食可通过破坏胰腺氧化和抗氧化平衡状态,增加自由基对胰腺内外分泌功能的氧化应激损伤。
- 谷春梅施用晖乐国伟
- 关键词：胰腺抗氧化剂小鼠
- 超滤/DEAE离子交换层析法分离纯化IgY被引量：4
- 2007年
- 应用平板式膜超滤技术与 DEAE 离子交换层析法对卵黄免疫球蛋白(IgY)进行分离纯化。首先,卵黄液经过缓冲液稀释分离;然后,用平板式膜组件对其超滤,并且分析了各种因素对其的影响,确定分子截留量为100 ku,操作压力差为0.12 MPa、进料温度为30℃,pH5.2,截留液抗体回收率达到91.89%,纯度为86%。经 DEAE 离子交换层析得到高纯度的 IgY。
- 方希修管军军严新义周新民乐国伟
- 关键词：卵黄免疫球蛋白超滤
- 携带EGFPC3质粒的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌在小鼠体内的表达被引量：2
- 2007年
- 目的构建重组减毒鼠伤寒沙门氏菌X8786/pEGFP-C3,检测增强型绿色荧光蛋白C3(EGFP-C3)在小鼠体内荧光表达。方法将质粒pEGFP-C3电转化到减毒鼠伤寒沙门菌SL8786,构建重组减毒鼠伤寒沙门菌X8786(pEGFP-C3),分别灌胃饲服昆明种小鼠,流式细胞仪检测脾脏细胞荧光表达,利用荧光显微镜检测小鼠组织荧光表达。结果在体外稳定试验中,重组菌经LB固体及液体培养基连续传15代后,单个菌落和菌液均呈绿色;流式细胞仪结果证实,体外情况下,减毒鼠伤寒沙门菌可以将pEGFP-C3转入小鼠腹腔灌洗巨噬细胞,并在其中表达。在体内稳定试验中,经昆明种小鼠连续传代10次,从肝脏、脾脏中分离的细菌经LB固体培养仍为绿色,证明构建的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌是稳定的。用免疫剂量的重组细菌接种昆明种小鼠后,观察1个月未见有异常现象,同时剖检后也未见脏器有眼观病变。免疫一定时间后,在小鼠肝脏、脾脏、肾脏、胸腺、十二指肠、肌肉等组织有荧光表达。结论表达EGFP-C3的重组鼠伤寒沙门氏菌的成功构建为减毒沙门氏菌作为活载体的基因工程疫苗研制提供一个优良模型。
- 方希修王冬梅唐现文刘建文
- 绿色荧光蛋白在环磷酰胺处理小鼠胸腺中表达的研究被引量：2
- 2005年
- 目的:探讨绿色荧光蛋白(GFP)在环磷酰胺(CY)处理小鼠胸腺中的表达。方法:将质粒pEGFP-c3和梭华SofastTM基因转染试剂按一定比例配制成转染液,经腹腔注入3组小鼠(每组15只)进行转染。转染24h后分别注射0.5、1、2mg/只的CY,并设对照组(15只)。18h后称小鼠体质量,然后处死动物,无菌取胸腺并称重,用PBS洗出细胞,制成单细胞悬液,于荧光显微镜下观察GFP的表达情况。结果:GFP可在小鼠胸腺中表达,且GFP+细胞数与CY的剂量相关。高剂量的CY处理可导致胸腺明显萎缩、胸腺细胞总数及GFP+细胞数的减少。结论:转染质粒pEGFP-c3并经CY处理的小鼠及正常对照组小鼠的胸腺中均可表达GFP,但CY处理的小鼠胸腺中GFP的表达情况明显低于对照组小鼠。
- 艾正亚施用晖乐国伟虞泽鹏王海松
- 关键词：绿色荧光蛋白基因转染环磷酰胺胸腺
