华东理工大学生物工程学院鲁华生物技术研究所 作品数:16 被引量:73 H指数:3 相关作者: 张建国 许伟钦 蒋靖欣 徐正军 张成刚 更多>> 相关机构: 上海师范大学生命与环境科学学院 南京工业大学生物与制药工程学院 福建农林大学植物保护学院 更多>> 发文基金: 中国博士后科学基金 国家自然科学基金 上海市教育委员会重点学科基金 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 化学工程 轻工技术与工程 更多>>
海洋真菌及其活性代谢产物研究进展 被引量:18 2004年 微生物生理活性物质对人类健康极其重要。近年来,海洋微生物研究逐步成为热点,而海洋真菌是海洋微生物的重要组成部分。当前,具有生物活性的海洋真菌代谢产物被广泛应用于食品和医药产业中,研究和开发海洋真菌的生物活性代谢产物具有重要的实际意义。 梁剑光 王晓飞 陈义勇 方永兰 徐正军关键词:海洋真菌 海洋微生物 朱黄青霉α-1,6-葡聚糖酶在毕赤酵母GS115中的异源表达 被引量:3 2014年 目的构建毕赤酵母基因工程菌,以实现朱黄青霉α-1,6-葡聚糖酶的异源高效表达。方法人工合成朱黄青霉HI-4的α-1,6-葡聚糖酶基因ZHdex,克隆到毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K,电转入毕赤酵母GS115。甲醇诱导目的蛋白表达。结果成功在毕赤酵母GS115中对ZHdex基因进行表达,SDS-PAGE表明重组毕赤酵母在66×103附近有目的蛋白表达,与理论值一致。在摇瓶水平,甲醇诱导培养120 h后,α-1,6-葡聚糖酶的最高酶活达28.79 U/mL,蛋白质浓度为0.56 mg/mL。结论获得一株重组毕赤酵母GS115-ZHdex,其产物具备α-1,6-葡聚糖酶活性,成功地实现朱黄青霉α-1,6-葡聚糖酶的异源高效表达。 王赟 章晓庆 王风清关键词:异源表达 毕赤酵母 粪产碱杆菌来源的青霉素G酰化酶拆分制备(S)-2-氨基-4-苯基丁氨酸 2011年 粪产碱杆菌来源的青霉素G酰化酶(A lcaligenes faecalispenicillin G acylase,A-fPGA)可以对映选择性地水解N-苯乙酰苯基丁氨酸制备(S)-2-氨基-4-苯基丁氨酸。反应体系的pH及温度对酶的对映选择性影响不显著。研究表明,水饱和的乙酸乙酯体系要优于传统的水相体系,该体系显著提高了底物N-苯乙酰化苯基丁氨酸的溶解度,并可简化产物的分离过程。当底物的转化率为48.6%时,(S)-2-氨基-4-苯基丁氨酸的光学纯度(e.e.值)为99.8%。 许伟钦 林金萍 魏东芝关键词:青霉素G酰化酶 替硝唑口腔贴膜对实验性大鼠牙周炎的治疗作用及其对口腔粘膜刺激性研究 被引量:3 2004年 目的 :观察替硝唑口腔贴膜 (TM)对实验性大鼠牙周炎的治疗作用及其对大鼠口腔粘膜的刺激性。方法 :用丝线缝扎大鼠上颌右侧第一磨牙、肌注醋酸强的松龙以及饲喂高糖水软饲料的方法造成实验性大鼠牙周炎模型 ,将TM贴敷于病变牙周部位 ,观察其对实验性牙周炎的治疗作用 (TM 0 .0 75、0 .175、0 .375mg 只 ,每日 1次 ,连续 7d) ,观察TM对正常大鼠口腔粘膜的刺激性。每次给予TM1.5mg·cm-2 (0 .5cm× 0 .5cm ) ,每日 1次 ,连续7d。结果 :TM 0 .0 75、0 .175mg 只对大鼠的口腔牙周软组织炎症有改善作用 ,其疗效与阳性组 (灌胃给药替硝唑 10 0mg·kg-1)相似 ,TM 0 .375mg 只可使牙周软组织炎症明显减轻 ,其疗效优于阳性组。对于牙周袋的形成及牙槽骨的破坏 ,TM均无明显改善作用。对大鼠口腔粘膜无明显刺激作用。结论 :替硝唑口腔贴膜对实验性大鼠牙周炎有较好的治疗作用 。 王琳辉 季晖 任萍 李东霞 魏东芝关键词:替硝唑 实验性牙周炎 黏膜刺激性 渗透休克法提取重组青霉素G酰化酶及酶学性质研究 被引量:1 2010年 为简化后期提取工艺,采用渗透休克法提取基因工程菌重组青霉素G酰化酶,回收率92.4%的酶蛋白释放到胞外,纯度达80%,比酶活26.4 U/m g.酶学性质研究表明,K cPGA的最适作用pH和温度分别为pH 7~9和50℃,在pH 5.0~8.0和低于40℃的范围较稳定. 蒋咏梅 章文贤 魏东芝关键词:青霉素G酰化酶 酶学性质 生长抑素增强胆囊癌细胞化疗敏感性的研究 被引量:3 2004年 目的 :探讨在生长抑素预先作用下 ,胆囊癌细胞化疗敏感性的变化。方法 :运用生长抑素预先作用于体外培养的人胆囊癌细胞株 ,2 4h后加入梯度浓度的化疗药物阿霉素 ,观察癌细胞的生长曲线 ,并与单独使用化疗药物的癌细胞生长曲线相比较。结果 :阿霉素能够明显抑制胆囊癌细胞的生长 ,其作用呈现效应 -浓度依赖性 (P <0 .0 5)。生长抑素能够诱导离体胆囊癌细胞生长停滞于DNA合成期 (S期)。经生长抑素预处理后 ,阿霉素对癌细胞生长的抑制效果较单独用药为佳 (P <0 .0 1 )。结论 :生长抑素可增强胆囊癌细胞对化疗药物阿霉素的敏感性。 李济宇 全志伟 张强 刘建文关键词:生长抑素 阿霉素 化疗敏感性 胆囊癌 生物技术应用性研究及其产业化 <正> 生物技术是一门交叉性和应用性都非常强的学科,在经历了医药生物技术、农业生物技术两次历史性技术革命浪潮之后又迎来了工业生物技术所引导的第三次生物技术浪潮,分析技术发展与演变的轨迹,不难看出,在科学进步的同时,技术的... 魏东芝羰基还原酶的定制:基于大分子底物催化的活性口袋改造 羰基还原酶能够将前手性酮不对称还原为手性醇,是一类具有重要应用价值的工业生物催化剂。我们基于对氧化葡萄糖酸杆菌基因组数据的挖掘,报道了一种新的羰基还原酶(GoCR)。该酶属于短链醇脱氢酶超家族,严格依赖NAD/NADH。... 邓健 林金萍 魏东芝文献传递 生长抑素对胆囊癌细胞生长周期的影响 被引量:14 2003年 目的:探讨生长抑素作用下胆囊癌细胞分裂周期的变化。方法:选择梯度浓度的生长抑素作用于人胆囊癌细胞株,观察浓度依赖性生长曲线;同时,运用流式细胞仪观察胆囊癌细胞周期在生长抑素作用下的变化。结果:随生长抑素浓度的递增,胆囊癌细胞株的生长逐步受到抑制(P<0.05)。生长抑素作用后1d,胆囊癌细胞周期停滞于S期,随后,细胞凋亡率明显上升。结论:生长抑素在较高浓度下能够抑制胆囊癌细胞的生长,其机制在早期为诱导生长停滞,随后则诱导细胞凋亡。 全志伟 李济宇 张强 刘建文关键词:生长抑素 胆囊癌 细胞生长周期 分枝杆菌Mycobacterium Neoaurum NwIB-01 3-甾酮-Δ~1-脱氢酶基因的克隆表达 被引量:3 2011年 通过分析已知两种分枝杆菌的3-甾酮-Δ1-脱氢酶(kstD)碱基保守序列,设计简并引物,以甾醇降解菌株Mycobacterium neoaurumNwIB-01的DNA作模板,得到一个kstD基因片段,通过染色体走读,得到其完整的阅读框。以pUC18为异源表达载体,构建pTQ002表达质粒,在E.coliDH5α中对kstD进行了胞内活性表达,测定Mycobacteri-um neoaurumNwIB-01 kstD酶活为(0.37±0.05)U.mL-1,约为原酶活的一半,为构建高效转化生成3-酮基-1,4-二烯类固醇的基因工程菌奠定了基础。 张成刚 王风清 魏东芝关键词:分枝杆菌