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LDHB调控PDK1/Akt/GSK3β信号通路促进脑胶质瘤细胞生长的研究被引量：3: 2018年; 该研究旨在探讨乳酸脱氢酶B(lactate dehydrogenase B,LDHB)基因对胶质瘤细胞生长的影响。用sh-LDHB或sh-EGFP质粒转染胶质瘤细胞,q RT-PCR和Western blot分别检测m RNA和蛋白质水平,CCK-8法和克隆形成实验分析细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期和凋亡情况。结果表明,转染sh-LDHB质粒后,脑胶质瘤细胞中LDHB的m RNA和蛋白质水平显著降低。敲低LDHB基因后,脑胶质瘤细胞的增殖能力明显降低,出现细胞凋亡峰(sub-G1),细胞增殖相关基因c-Myc和Cylin D1表达水平降低,同时,PDK1、Akt和GSK3β的磷酸化水平降低。研究结果表明,LDHB基因可以通过激活PDK1/Akt/GSK3β信号通路促进脑胶质瘤细胞的生长。; 韩秀陈曦唐宇程洁刘菲许婧彭琬昕杜凤移龚爱华; 关键词：脑胶质瘤

组蛋白去甲基化酶LSD1及其生物学功能被引量：11: 2010年; 赖氨酸特异性组蛋白去甲基化酶1(Lysine specific demethylase1,LSD1)的发现,表明组蛋白的甲基化修饰是一个动态可调节的过程。结构分析显示,LSD1是一个黄素腺嘌呤二核苷酸(Flavin adenine dinulcleotide,FAD)依赖性胺氧化酶,它能够特异性脱去单甲基化和二甲基化组蛋白H3第4位赖氨酸(H3K4)和H3K9位点上的甲基基团。功能研究显示,LSD1定位于细胞核内,调控着基因转录的激活和抑制,被誉为细胞深处的基因"开关",在胚胎发育和肿瘤发生过程中起着重要的作用。文章主要综述了LSD1的结构、作用机制及其调控作用研究的新进展。; 邵根宝黄晓佳龚爱华张志坚陆荣柱桑建荣; 关键词：组蛋白去甲基化酶基因转录调控肿瘤抑制胚胎发育

Ⅱ型cGMP依赖性蛋白激酶重组腺病毒载体的构建、鉴定及初步应用被引量：1: 2010年; 目的:构建携带Ⅱ型cGMP依赖性蛋白激酶(PKGⅡ)基因的重组腺病毒载体,并以此初步研究PKGⅡ对增殖相关的MAPK信号转导的影响。方法:将PKGⅡcDNA片段自载体pRC/CMV-GKⅡ(wt)中切出,克隆至穿梭质粒pENTR 1A,用ClonaseⅡ将pENTR-PKGⅡ中的PKGⅡcDNA片段定向克隆到pAd/CMV/V5-DEST中构建pAd/CMV/V5-DEST-PKGⅡ(Ad-PKGⅡ)。重组质粒Ad-PKGⅡ用PacⅠ酶酶切,使其线性化,再用脂质体转染法转染HEK293A细胞进行包装和扩增,微量全细胞病变法检测病毒滴度,蛋白质印迹法检测重组腺病毒Ad-PKGⅡ感染细胞后PKGⅡ的表达以及MAPK通路关键成分胞外信号调节激酶(ERK)活性的变化。结果:重组腺病毒滴度达5×109pfu/ml,蛋白质印迹法检测显示重组腺病毒感染CS54细胞后使其PKGⅡ表达明显增高;在BGC-823胃癌细胞株,PKGⅡ对EGF导致的ERK的激活有明显抑制作用。结论:成功构建了携带PKGⅡ基因的重组腺病毒,初步证明PKGⅡ对细胞增殖相关信号转导有抑制作用,为进一步研究PKGⅡ与肿瘤细胞发生发展的关系提供了基础。; 屈睿刘加宝桑建荣任峰赵爽陈永昌; 关键词：腺病毒载体 DNA重组胞外信号调节激酶

乳酸脱氢酶A通过AMPK信号通路抑制人脑胶质瘤细胞线粒体自噬被引量：1: 2020年; 该研究旨在探讨乳酸脱氢酶A(lactate dehydrogenase A,LDHA)对人脑胶质瘤细胞线粒体自噬的影响。用质粒sh-EGFP或sh-LDHA转染人脑胶质瘤细胞株U87MG,qRT-PCR和Western blot检测干扰效率,荧光染色技术检测线粒体ROS水平及线粒体膜电位,Western blot检测线粒体自噬相关蛋白及AMPK信号通路相关蛋白表达。结果表明,与sh-EGFP组相比较,sh-LDHA组人脑胶质瘤细胞U87MG中LDHA的mRNA及蛋白质水平均显著降低,线粒体ROS的产生增加,线粒体膜电位明显降低,线粒体自噬相关蛋白PINK1、Parkin及BNIP3、BNIP3L的表达增高,AMPK的磷酸化水平明显升高,而mTOR的磷酸化水平降低。研究结果表明,LDHA能够通过抑制AMPK信号通路,降低线粒体ROS水平,提高线粒体膜电位,抑制线粒体自噬。; 刘菲黄雪阳杨梦婷张俊尧房文静龚爱华; 关键词：脑胶质瘤

堤岸田鼠(Bank Vole)重组朊蛋白在RT-QuIC反应上的特点及其关键位点的作用探索: 2018年; 堤岸田鼠对很多种属的朊病毒易感。在堤岸田鼠的朊蛋白氨基酸序列中,只有两个位点是同仓鼠和小鼠都不相同的,分别是位于C端的227位和230位。为了评估这两个位点对堤岸田鼠RT-QuIC反应的影响,我们构建了田鼠野生型（Vole-WT）,两种突变型（Vole-E227D,Vole-S230R）,以及仓鼠野生型（Ha-WT）蛋白用于RT-QuIC反应。结果显示田鼠野生型及两种突变型具有极强的RT-QuIC反应效率。即使在较弱的反应条件下,田鼠野生型及突变型也表现出比仓鼠更高的反应效率。其中Vole-E227D在三种田鼠蛋白中是效率最高的,随后为野生型和Vole-S230R。我们的结果表明堤岸田鼠朊蛋白氨基酸227位和230位不是造成堤岸田鼠RT-QuIC反应如此高的原因,但特定氨基酸位点的改变会在一定程度上影响朊蛋白的RT-QuIC反应效率。; 丁涤非肖康马月王晶高晨董小平刘霞石琦; 关键词：朊病毒病朊蛋白突变

Th17/Treg失衡与大鼠放射性肺炎的关系被引量：5: 2014年; 目的探讨辅助性T细胞17(Th17细胞)和调节性T细胞(Treg细胞)在大鼠放射性肺炎中的变化及意义。方法 30只大鼠随机分为X线照射组(A组,25只)和对照组(B组,5只)。照射后1、2、3、4、5周分别采样,采用HE染色观察肺组织的病理变化,免疫组织化学检测Th17和Treg细胞在肺组织的表达,流式细胞术检测全血中Th17和Treg细胞数。结果 A组大鼠肺组织照射5周后出现淋巴细胞性肺泡炎;IL-17a和叉头转录因子(Foxp3)蛋白主要表达在各级支气管和血管周围细胞。与B组相比,A组Th17细胞数增加(P<0.05),而Treg细胞数减少(P<0.05)。结论放射性肺炎形成过程中出现Th17/Treg失衡,这为进一步揭示放射性肺炎的发病机制及临床寻找放射性肺炎的预测因子提供了重要信息。; 王洁邵根宝龚爱华金洁王燕薛春泉吴立广王承伟吴朝阳; 关键词：辅助性T细胞17 调节性T细胞放射性肺炎

miRNA与神经系统被引量：2: 2009年; microRNA(miRNA)是一类约21～25个核苷酸的非编码小RNA分子,功能复杂,主要通过碱基互补配对导致靶基因mRNA的降解或翻译抑制。miRNA具有进化保守性、组织特异性和表达时序性,从而决定组织和细胞的功能特异性。miRNA在中枢神经系统中含量丰富,在神经系统的发育及可塑性中发挥重要作用,并且与神经系统有关疾病的发生发展密切相关。; 赵克芳周红凌树才; 关键词：MIRNA 神经系统发育

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江苏大学基础医学与医学技术学院基础医学研究所