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固安鼎泰海规生物科技有限公司: 作品数：18 被引量：14H指数：2; 相关机构：广州白云山拜迪生物医药有限公司武汉大学中国人民解放军总医院更多>>; 发文基金：国家科技重大专项更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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半定量法检测结核DNA疫苗中SDS残留量的方法学验证: 2022年; 目的建立半定量法检测十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate,SDS)残留量并进行方法学验证,用于结核DNA疫苗的质量控制。方法样本中残留的SDS与吖啶橙形成复合物,用Spectra Max 340PC微孔板检测器测定该复合物的吸光度。通过定量法测定SDS的残留量时,样品的吸光度不在标准曲线线性范围内,采用对比供试品与对照溶液的吸光度的半定量法,判断供试品中SDS的残留量。结果该方法回收率范围为102%~105%,不同人员、不同时间测定结果一致,该法受辅料、测试温度、萃取时间的影响较小,测定的3批供试品SDS残留量均小于0.02%。结论建立的方法准确度、中间精密度、专属性和耐用性较好,可用于结核DNA疫苗中SDS残留量的快速检测。; 杨丽菲李婷孔雯雯黄明梁艳吴雪琼孙澳郭润姿; 关键词：SDS 结核DNA疫苗

mRNA技术及其在传染病疫苗研发中的应用被引量：7: 2020年; mRNA疫苗技术是近年逐渐发展起来的疫苗新技术之一,其在稳定性、高效投递等方面的技术日趋成熟。mRNA疫苗在细胞内表达抗原,通过刺激免疫系统产生B、T细胞免疫应答等多种效应机制,可达到预防传染病的作用。同时由于其是全合成制备,生产工艺简单,具有快速应对诸如新型冠状病毒感染等突发传染病疫情的潜力。为了解传染病mRNA疫苗的开发与研究现状,本文重点对mRNA疫苗的结构特点、优势和挑战以及应用于传染病疫苗研究的现状进行了综述,为新型冠状病毒等传染病mRNA疫苗的研发提供一定借鉴。; 柯尊阳王宇李忠明于继云; 关键词：传染病临床前研究

一种规模化质粒纯化的联合液相层析分离方法: 本发明提供可用于药物级核酸pDNA疫苗规模化制备的质粒纯化方法，该方法联合应用颗粒介质柱液相层析分离系统与近年开发的固定整体(Monoliths)柱液相层析分离系统，取长补短充分发挥二者的优点获得了优异效果，具有优良的实...; 刘庆良李忠明柯尊阳; 文献传递

一种用于裸质粒pSFVK1-NMM生产的大肠杆菌发酵培养基: 本发明公开了一种用于裸质粒pSFVK1‑NMM生产的大肠杆菌发酵培养基。发酵培养基包括：种子液培养基、发酵基础培养基、发酵补料培养基和微量营养液。每1升种子液培养基含有：胰蛋白胨5‑7g、酵母提取物10‑14g、甘油4‑...; 于继云柯尊阳王洋王宇郭润姿宋卫卫徐强徐星星; 文献传递

一种抗肿瘤重组NMM融合抗原质粒DNA疫苗: 本发明公开了一种抗肿瘤重组NMM融合抗原质粒DNA疫苗。所述抗肿瘤重组NMM融合抗原的设计方案为：通过连接臂GCAGCATAT将NY‑ESO‑1与MUCI基因的5’端相连，MUCI基因的3’端通过连接臂AAGAAG连接到...; 于继云王宇徐强柯尊阳宋卫卫郭润姿王洋徐星星; 文献传递

可复制型DNA疫苗生产用工程菌的筛选被引量：2: 2022年; 肿瘤治疗性DNA疫苗pSFVK1-NMM由于采用了基于塞姆利基森林病毒(semliki for estvirus,SFV)的复制子系统,使得其大小超过15 kb,所以需要对该疫苗生产用菌株进行筛选后才能建立三级种子库。本研究首先对不同构型的pSFVK1-NMM质粒进行了电泳分析,对该质粒的超螺旋构型、线性构型、开环构型和碱变性构型的电泳特征进行了描述。然后分别在37,34,30℃培养温度下对比该质粒结构稳定性的差异,发现30℃能提供该质粒稳定的复制环境,为工程菌合适的培养温度,同时也对因高温培养所产生的截短型DNA进行了电泳分析。最后通过30℃条件下的传代培养对21株含有质粒的重组大肠杆菌进行筛选,比较第5,10,15,20代的质粒电泳结果,获得1株能够稳定培养20代的菌株作为生产用工程菌,后续可用于三级种子库的建立。; 柯尊阳孔垂占于继云王宇; 关键词：生物工程 DNA疫苗菌株筛选连续传代

核酸质粒药物制备中用于大肠杆菌碱裂解的搅拌、冷却和加压过滤三合一反应罐: 核酸质粒药物制备中用于大肠杆菌碱裂解的搅拌、冷却和加压过滤三合一反应罐，包括罐体、搅拌器、压力表、过滤组件、阀门，其中，罐体包括由内圆筒、外圆筒、上法兰盘和下法兰盘组成的中部双层罐筒、上盖和下盖，内圆筒和外圆筒之间形成的...; 柯尊阳刘庆良王宇李忠明; 文献传递

结核DNA疫苗宿主蛋白残留检测方法的建立: 2022年; 目的建立结核DNA疫苗中大肠杆菌宿主蛋白残留量检测的方法。方法采用双抗夹心酶联免疫吸附法(ELISA法)建立结核DNA疫苗中宿主蛋白残留量检测的方法,对方法的准确度、专属性、线性范围和耐用性等进行验证,并采用建立的方法对结核DNA疫苗原液进行测定。结果大肠杆菌宿主蛋白含量在2~24ng·L^(-1)范围内,相关系数R 2>0.990,线性关系良好;该法宿主蛋白含量在高中低浓度范围内,回收率在70%~120%之内,准确度良好;该法不易受辅料、核酸、孵育温度和孵育时间影响,专属性和耐用性较好;三批原液的宿主蛋白残留量(HCP)均<1μg·mg^(-1)。结论此方法有较好的准确度、专属性、重复性、中间精密度和耐用性,可用于结核DNA疫苗的宿主蛋白残留量的检测。; 谭奇凤李婷孔雯雯倪世明黄明梁艳吴雪琼郭润姿; 关键词：结核DNA疫苗 ELISA法

高效液相色谱-示差折光法测定NMM抗肿瘤DNA疫苗中甘露醇含量: 2024年; 目的建立测定NMM抗肿瘤DNA疫苗中甘露醇含量的高效液相色谱-示差折光法。方法检测器为示差折光检测器,色谱柱为SUGAR SC1011阳离子钙型交换柱(300 mm×8 mm,6μm),流动相为纯化水,流速为1.0 mL/min,柱温为80℃,检测池温度为37℃,进样量为10μL。结果甘露醇的质量浓度在0.02~5.00 mg/mL(R2=1.000 0,n=6)范围内与峰面积线性关系良好;定量限为13.37μg/mL;精密度、重复性、稳定性试验结果的RSD均小于2.0%;加样回收率为97.76%,RSD为0.97%(n=9)。3批小试样品和中试样品中甘露醇的含量分别为20.02,19.95 mg/mL。结论该方法操作简便、重复性好、结果准确,可用于NMM抗肿瘤DNA疫苗中甘露醇的含量测定。; 郭润姿黄言孙澳于继云王宇; 关键词：甘露醇高效液相色谱法

NMM抗肿瘤治疗性DNA疫苗中卡那霉素残留量检测方法的建立与验证: 2023年; 建立并验证检测NMM抗肿瘤DNA疫苗中卡那霉素残留量的方法。采用间接竞争ELISA方法检测卡那霉素残留量,采用四参数Logstic曲线进行回归分析,并对本方法的专属性、检测限、定量限、线性与范围、精密度、准确度、耐用性等进行验证,验证方法有效后对多批次样品进行检测。使用该方法检测卡那霉素残留量时,样品无需稀释,辅料、质粒DNA对卡那霉素的检测无干扰;本方法检测限为0.15 ng/mL;定量限为0.5 ng/mL;在0.5~40.5 ng/mL范围内线性关系良好,且符合四参数方程式:y=D+(A-D)/[1+(x/C)^(B)],R^(2)≥0.999;在检测线性范围内加入不同浓度的卡那霉素对照溶液,回收率均值在95%~115%之间(n=12,RSD=6.20%);本方法重复性试验中卡那霉素含量RSD值为4.22%(n=6),中间精密度试验中DNA疫苗中卡那霉素含量RSD值为10.95%。本方法检测实验条件发生微小变动时(不同人员、不同批次试剂盒、不同酶标仪),对测定结果的影响在可接受范围内。应用该方法对7批样品中卡那霉素残留量进行检测,结果表明,每个人用剂量(0.3 mg DNA)卡那霉素的残留量均小于0.5 ng。本方法操作简便、准确可靠、专属性强,可用于NMM抗肿瘤DNA疫苗卡那霉素残留量的检定。; 郭润姿伊君梅田园宋卫卫车亦伟于继云王宇; 关键词：酶联免疫吸附法药物分析

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