湖南大学生物学院生物能源与材料研究中心 作品数:29 被引量:138 H指数:8 相关作者: 黄星群 梅进 袁昕 俞竞 刘实 更多>> 相关机构: 怀化学院生命科学系 中南大学化学化工学院 长沙学院生物工程与环境科学系 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 湖南省自然科学基金 国家科技基础条件平台建设计划 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 医药卫生 轻工技术与工程 更多>>
壳寡糖纳米载体细胞内递送EGFR脱氧核酶的研究 被引量:1 2010年 设计靶向EGFR mRNA的脱氧核酶(EGFR DRz),以壳寡糖(COS)为材料,建立了一种有效的纳米基因细胞内传递体系,并研究其介导的靶向EGFR的脱氧核酶在Hela细胞内的生物学效应.流式结果表明COS-EGFR DRz复合体转染效率为88.7%,与脂质体转染试剂的89.7%相比无显著差异.半定量RT-PCR结果显示,经壳寡糖纳米载体递送的EGFR DRz能有效地靶向切割Hela细胞内的EGFR mRNA,使其表达下降.进一步的流式分析显示细胞被阻滞在G0~G1期,并且出现凋亡现象,其中COS组的凋亡率为19.3%,大于对照组脂质体的凋亡率13.0%.研究表明,COS较脂质体有相似的转染效率和更低的毒性,是一种潜在的、有效的脱氧核酶递送载体. 李丹 王贝 林奕婷 靳冉 刘志文 刘选明关键词:壳寡糖 脱氧核酶 EGFR 甘蓝型油菜BnCOP1基因编码区全长cDNA的克隆与功能研究 被引量:6 2011年 通过分析拟南芥、豌豆、番茄和水稻的COP1(constitutively photomorphogenic 1)的cDNA序列,运用RT-PCR和改进的基因组步行(genome walking)技术相结合的方法,首次从甘蓝型油菜中克隆到油菜BnCOP1编码区cDNA的全长序列,其全长2 034 bp,编码677个氨基酸.同源性分析表明,其编码的氨基酸序列与拟南芥的同源性高达94%.对BnCOP1编码序列(cDNA)演绎出的氨基酸序列分析表明,其编码的蛋白包含有N端的环形锌指结合域(ring finger zinc bindingdomain,RING)、中间的卷曲螺旋形结构域(coiled-coil domain,coiled-coil),7个C端的WD-40重复序列(WD-40 repeats,WD-40)的功能域.半定量RT-PCR和实时荧光定量PCR分析该基因在油菜中的表达模式,结果显示,BnCOP1在甘蓝型油菜的各个组织器官中均有表达,其中在花中的表达明显高于在根、叶、茎、果荚及子叶和胚轴中,暗示该蛋白可能与开花途径相关.过表达BnCOP1的转基因拟南芥植株在高度、主茎的直径和叶片大小上都呈现出比野生型弱小的表型,表明BnCOP1抑制了拟南芥光形态建成从而影响了植物的生长发育. 彭丹 周波 赵小英 黄星群 贺热情 宋丽丽 唐冬英 刘选明关键词:甘蓝型油菜 RT-PCR 转基因 GA2ox8基因过量表达诱导蓝光下拟南芥光形态建成 被引量:8 2008年 检测不同光照强度蓝光下,过量表达GA2ox8基因的转基因植株光形态建成表型的结果表明,突变体比各自的母本的下胚轴短,茎尖角度和子叶张开度较大,花青素和叶绿素的含量较高,并且其差异与GA2ox8基因的表达量呈正相关。RT-PCR检测光调节基因表达水平的结果显示,暗培养条件下其突变体幼苗中的水平比各自的母本高,蓝光下35S::GFP- GA2ox8-1、35S::GFP-GA2ox8-8与母本col-4之间差异不明显,但scc7-D中的水平比母本crylcry2高。这似乎说明,GA2ox8基因过量表达可诱导蓝光下拟南芥幼苗光形态建成。 李妍 赵小英 郭明 李旭 黄绿红 唐冬英 郭新红 刘选明关键词:蓝光 拟南芥 光形态建成 拟南芥CIPK1基因的功能初步分析 被引量:9 2007年 以模式植物拟南芥为材料,采用RT-PCR分析、基因克隆、转化等方法对CIPK1基因功能进行了研究.结果发现,CIPK1(CBL-interacting protein kinase 1)基因在拟南芥茎和花中表达量最高,在叶中表达量最低;ABA能迅速诱导CIPK1基因的表达,GA则抑制该基因的表达,但2,4-D和6-BA对该基因的表达无明显影响;通过对CIPK1基因转基因突变体进行ABA处理,发现转基因拟南芥种子的萌发率明显高于野生型.以上结果表明CIPK1基因的表达具有组织特异性,并且该基因参与ABA和GA信号传导,尤其在ABA促进种子休眠的信号传导途径中具有非常重要的作用. 刘实 赵小英 唐冬英 郭新红 刘选明关键词:拟南芥 基因表达 RT-PCR 种子萌发 甘蓝型油菜BnCYP78A8的克隆及序列分析 2012年 采用Genome walking方法,首次克隆到甘蓝型油菜BnCYP78A8的基因组序列,根据基因特异性引物克隆到其编码序列。基因组序列长1 679bp,有1个内含子和2个外显子。编码序列长1 605bp,编码534个氨基酸。序列比对分析表明,其氨基酸序列与拟南芥细胞色素P450单加氧酶基因(AtCYP78A8)的相似度高达88%。生物信息学分析显示,该蛋白含有1个细胞色素P450特有的亚铁血红素配合基结合位点和1个跨膜结构域。实时荧光定量PCR分析结果表明,BnCYP78A8在甘蓝型油菜的各个器官组织均有表达,根中表达量最高,表明该基因可能参与根的生长发育。 宋丽丽 贺热情 黄星群 谢敏敏 赵小英 刘选明关键词:甘蓝型油菜 GENOME WALKING 特矮稻ED基因的遗传定位和分析 2009年 赤霉素(GA3)鉴定表明,一种新型特矮稻(命名为‘特矮稻-2’)的GA3信号转导途径正常,施加外源GA3不能恢复到正常植株的高度,说明此种矮稻的矮化机制与GA3无关。来源于组合‘特矮稻-2’ב日本晴’的F2群体的遗传分析表明,‘特矮稻-2’的特矮性状受1对隐性基因控制。采用SSR分子标记,将该矮秆基因定位于第12染色体上的RM519和RM235标记之间,遗传距离分别为15.9和22.0cM,该基因暂命名为ED。 梅进 杨远柱 林建中 胡小淳 周波 赵小英 符辰建 黄星群 唐冬英 刘选明关键词:水稻 矮秆基因 基因定位 拟南芥CKL3基因表达对非生物胁迫的响应 被引量:1 2008年 以拟南芥为材料,采用PCR和RT-PCR技术在DNA和RNA水平上鉴定出了与CKL3基因对应的T-DNA插入纯合突变体,并对其表型变化进行了观察。半定量RT-PCR检测CKL3基因在拟南芥不同器官和非生物胁迫响应中表达的结果表明,CKL3基因在根、花、叶中表达较高,在茎、叶柄中表达较弱;盐胁迫下CKL3基因表达下降,蓝光下CKL3基因表达升高,但热激和红光对此基因表达量的影响不大。 郭新红 王婕 秦玉芝 喻达时 刘选明关键词:拟南芥 基因克隆 非生物胁迫 基于聚乙烯醇/Fe_2O_3纳米颗粒的纤维素酶固定化 被引量:13 2008年 以聚乙烯醇/Fe2O3磁性纳米颗粒为纤维素酶固定化载体,通过反复冻融的方法成功地实现了纤维素酶固定化.采用透射电镜、红外光谱仪、振动样品磁强度计对固定化酶复合体进行了表征,结果显示,固定化酶复合体为大小约1μm的微凝胶团,内含10nm左右的Fe2O3纳米颗粒.研究影响固定化因素后发现,当pH为6,固定化时间为11h,纤维素酶/PVA质量比为4,PVA/Fe质量比为50时,固定化纤维素酶效果最好.通过该方法固定后酶活回收率达42%,酶水解效率显著提高,经过5次反应后的固定化酶相对酶活力保留50%以上.因此,基于聚乙烯醇/Fe2O3纳米颗粒的纤维素酶固定有利于酶的循环使用并显著提高酶的使用效率,是一种有效固定化纤维素酶的新方法. 廖红东 袁丽 童春义 朱咏华 李杜 刘选明关键词:纤维素酶 固定化 聚乙烯醇 受光调节的拟南芥锌指蛋白DBB(Double B-Box)亚家族基因的转录表达 被引量:5 2009年 整合微阵列数据和采用实时荧光定量PCR分析拟南芥锌指蛋白DBB亚家族中8个基因在不同光周期和不同光质条件下转录表达的结果表明,在长日和短日照条件下该家族中6个基因的转录都具有光周期节律性,并且其中4个基因的表达受光诱导,有1个基因的表达受光抑制,1个基因的表达不受光调节。 汪启明 屠小菊 赵小英 唐冬英 刘选明关键词:拟南芥 光周期 锌指蛋白 生物钟节律 鱼腥草叶片总RNA提取方法研究 被引量:1 2010年 [目的]筛选出适合鱼腥草(Houttuynia cordata)叶片RNA提取的方法。[方法]以鱼腥草叶片为材料,比较了经典RNA提取试剂盒、Trizol试剂盒A、Trizol试剂盒B以及富含多糖类材料RNA提取试剂盒提取鱼腥草RNA的效果。[结果]Trizol试剂盒A、Trizol试剂盒B和经典RNA提取试剂盒难以提取出高质量的RNA,而富含多糖类材料RNA提取试剂盒提出的RNA质量高,完整性好,可以满足进一步分子生物学研究的要求。[结论]普通RNA提取试剂盒难以提取出鱼腥草叶片的RNA。 吴成就 伍贤进 魏麟 刘选明 黄星群关键词:鱼腥草 总RNA