上海奇诺肿瘤生物高新技术有限公司
- 作品数：12 被引量：77H指数：5
- 相关机构：上海市胸科医院浙江大学医学院附属第二医院浙江省人民医院更多>>
- 发文基金：上海市基础研究重大（重点）项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肺癌患者血清中游离DNA含量与肿瘤标志物相关性分析被引量：3
- 2006年
- 通过对52例肺癌患者、8例肺部良性疾病患者和10名健康人血清游离DNA含量与肿瘤标志物（TM）CA19-9、CA125、CYFRA21-1、CEA和NSE的联合检测，对两种检测结果作相关性分析。将表皮生长因子受体（EGFR）作为肿瘤基因标志物，运用荧光定量RT-PCR方法检测血清游离DNA含量。结果显示，10名健康人血清游离DNA含量平均为18．81ng／mL（范围：0．17～54.64ng／mL）。若以19ng／mL作为血清游离DNA含量的阳性临界值，则87．5％的健康人低于此水平。8例肺部良性疾病患者游离DNA含量均值为76．86ng／mL（范围；5．33～189．7ng／mL），其中4例（50％）高于阳性临界值。52例肺癌患者游离DNA均值为107．6ng／mL（范围：6．39～1617ng／mL），37例（71．2％）的肺癌患者血清游离DNA含量高于正常值。血清游离DNA含量诊断肺癌的价值等同于肿瘤标志物五项指标联合检测。其灵敏度、特异性、准确性分别为：71．15％，50％，68．3％，提示血清游离DNA含量作为一项新颖肿瘤标志物具有潜在的临床诊断价值。
- 杨顺芳董强刚张佩玲曹杰曾骏井口东郎
- 关键词：游离DNA肿瘤标志物荧光定量RT-PCR肺癌
- 高转移性人肺腺癌细胞株SPC-A-1BM的建立及其特性分析被引量：13
- 2006年
- 目的:建立高转移性人肺腺癌细胞株SPC-A-1BM及其免疫缺陷小鼠转移动物模型。方法:将人肺腺癌细胞株SPC-A-1经免疫缺陷小鼠血道或肺原位接种后形成转移,在放射性核素示踪下找到骨转移病灶,然后切除病变骨组织进行体外培养获得转移性肺癌细胞,用这些癌细胞重复以上循环10次,获得高转移肺癌细胞。采用荧光定量PCR方法检测亲代细胞和高转移细胞的基因表达。结果:获得以骨转移为主,肺、肾上腺、淋巴结等多脏器转移的人肺腺癌转移细胞株(SPC-A-1BM)及其免疫缺陷小鼠动物模型。定量PCR检测显示SPC-A-1BM的上皮生长因子受体(EGFR/HER)家族、血管内皮生长因子(VEGF)家族和3个抗凋亡蛋白的基因较原代细胞均有不同程度的变化。结论:SPC-A-1BM是以骨转移为主的高转移性人肺腺癌细胞株,该细胞株及其转移动物模型为肺癌转移的生物学研究提供了一个良好的技术平台。
- 杨顺芳董强刚姚明时梅萍赵兰香苏建中顾伟勇金秀木史振余曾骏
- 关键词：腺癌
- 晚期肺癌血清游离DNA中EGFR外显子19的基因突变研究被引量：9
- 2006年
- 目的：分析晚期肺癌的上皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor，EGFR）外显子19基因突变的类型及发生率。方法：从血清中提取游离DNA进行EGFR外显子19特异性PCR扩增和基因测序。结果：24例肺部良性疾病血样中EGFR基因外显子19均为野生型；而130例肺癌血样中检出突变55例，EGFR外显子19基因突变的检出率为42．3％。外显子19基因突变均为第746～752位密码子的碱基缺失，共有7种突变类型。外显子19基因突变主要见于肺腺癌及小细胞肺癌，其检出率分别为58．9％和57．1％，突变与患者年龄及性别无明显相关性。在肺癌的不同组织类型中，外显子19的突变形式存在显著差异，肺隙癌的基因突变谱与肺鳞癌、腺鳞癌及小细胞肺癌明显不同。结论：晚期肺癌病人的血清游离DNA中存在EGFR基因突变，这类突变可以通过适当的方法检测出来，这种血液检测方法在晚期肺癌的EGFR基因诊断及靶向治疗中具有广泛的应用价值。
- 董强刚韩宝惠黄进肃黄建赵春英卢丽琴
- 关键词：肺肿瘤游离DNA突变
- 肺癌靶向治疗研究进展与我国肺癌的EGFR基因突变概况被引量：39
- 2005年
- 近年来,以上皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)为靶标的分子靶向治疗(molecular targeted therapy)受到国内外肿瘤界的普遍关注,其中EGFR酪氨酸激酶抑制剂Gefitinib(又称Iressa)和Erlotinib(又称Tarceva)已被美国食品药品管理局(FDA)批准用于治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC),并且Gefitinib还获得包括日本、澳大利亚等27个国家的批准,我国也于2005年2月批准了Genfitinib进入临床.
- 董强刚黄进肃黄建卢丽琴杨立民
- 关键词：肺肿瘤基因疗法
- 肺腺癌组织EGFR外显子19基因突变的实时定量PCR检测被引量：5
- 2006年
- 目的:应用实时定量PCR技术建立上皮生长因子受体(EGFR)外显子19基因突变的检测新方法。方法:根据Taqman原理设计了外显子19特异性引物和探针,经过优化形成试剂盒后检测了61例肺腺癌组织中的EGFR外显子19基因突变,并将结果与基因测序进行对比分析。结果:本方法对22种EGFR外显子19基因突变均具有高度特异性,其最低检测限度为10个外显子19基因拷贝或3ng组织DNA,当突变型DNA占野生型DNA含量的20%或以上时,检测结果具有良好的分辨率。本诊断试剂在4℃保存4d仍性能稳定,批次间实验误差小于10%。在61例肺腺癌组织中,45例野生型组织的ABP/SYB比值为1.437±0.707,而16例突变型组织的比值为0.631±0.280,二组间差异具有统计学显著意义(P<0.001)。若以ABP/SYB比值<0.800作为外显子19基因突变的检测临界值,则定量PCR检测与基因测序结果完全相符。结论:实时定量PCR方法具有特异性好、敏感性高、简便易行等优点,有助于从肺癌患者中快速筛选EGFR抑制剂合适的治疗对象,便于合理用药。
- 董强刚刘刚黎飒李建璋苏建中贯剑
- 关键词：腺癌上皮生长因子受体
- 血清游离DNA中上皮生长因子受体(EGFR)外显子19－21缺失变异的基因测序技术
- 本发明提供了一种测定分离的血清DNA样品中上皮生长因子外显子19-21突变的方法，该方法包括：a)提供分离的血清样品，在93-97℃下用试剂处理所述分离的血清样品，所述试剂基本上由乙酸/乙酸钾缓冲液、十二烷基硫酸钠和水组...
- 董强刚
- 文献传递
- 上皮生长因子受体外显子21基因突变L858R的实时定量PCR检测被引量：3
- 2007年
- 目的应用实时定量PCR技术建立上皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)外显子21基因突变L858R的检测新方法。方法根据Taqman-MGB原理设计野生型外显子21和L858R特异性探针,经过优化制备成试剂盒检测171例肺癌组织中的L858R基因突变,并将结果与基因测序进行对比分析。结果171例肺癌组织经基因测序共检出L858R突变15例,突变率为8.8%。突变多见于女性、肺腺癌及腺鳞癌。定量PCR检测显示,15例突变型组织的R值平均为0.840±0.223,而156例野生型组织的R值平均为1.552±0.278,两组间差异具有统计学显著意义(P<0.001)。此外,以突变型为主的肺癌组织其R值(0.613±0.137)显著低于野生型占优势组织(0.992±0.103),两组间差异极为显著(P<0.001)。实验证明,定量PCR检测方法对L858R基因突变具有高度特异性,其最低检测限度为突变型DNA占野生型DNA含量的12.5%。结论本方法检测EGFR基因L858R突变具有敏感性高、特异性好、简便快速等优点,应用本方法不仅可以对野生型EGFR外显子21或突变型L858R进行诊断,而且还可以根据R值判断样本中突变型基因的比例。
- 董强刚李建璋黎飒刘刚苏建中贯剑
- 关键词：肺肿瘤DNA突变分析分子诊断技术
- 核素骨显像在建立高转移性人肺腺癌细胞株中的作用
- 目的探讨放射性核素骨显像在建立高潜能骨转移性人肺腺癌细胞株SPC-A-1BM及其免疫缺陷小鼠(NIH-BNX)转移动物模型中的作用。方法将人肺腺癌细胞株SPC-A-1经免疫缺陷小鼠左心室注射后形成转移,在放射性同位素显像...
- 杨顺芳时梅萍赵兰香苏建中顾伟勇史振余姚明董强刚曾骏
- 文献传递
- 中国肺腺癌患者上皮生长因子受体基因突变的研究被引量：11
- 2006年
- 目的：分析我国肺腺癌患者上皮生长因子受体（EGFR）基因突变的发生率和突变类型。方法：在上海、杭州和昆明等地收集61例肺腺癌及其正常肺组织，采用PCR扩增和基因测序方法对组织DNA中EGFR外显子19～21基因突变进行分析。结果：正常肺组织中EGFR基因均为野生型，肺腺癌组织中EGFR基因突变检测率为47．5％（29／61），其中外显子19和21突变分别占突变总数的55．2%（16／29）和44．8%（13／29），外显子20未检测到突变。外显子19突变发生在第746～752位密码子，均为碱基缺失突变，有6种不同类型。外显子21突变全部是第858位密码子碱基替换突变。EGFR基因突变与患者性别和年龄无显著相关性。但昆明和上海等地患者的基因突变存在明显差异。结论：EGFR基因突变是一种肿瘤特异性的体细胞遗传改变，突变发生率约占肺腺癌总数的一半，其中以外显子19和21突变为主。我国EGFR基因突变存在地域差异。
- 董强刚黄进肃杨立民黄建赵春英卢丽琴
- 关键词：肺肿瘤腺癌基因突变
- 分离和测定血液游离DNA的试剂和方法
- 本发明提供了分离提取血液样品中游离DNA的试剂和方法，以及对血液样品中游离DNA含量进行定量测定的试剂盒和方法。本发明能够迅速、高度灵敏地获得血液样品中游离DNA的定量分析结果。
- 董强刚
- 文献传递
